Polymerázová řetězová reakce (PCR) pro tuberkulózu

Tuberkulóza je jednou z nejnebezpečnějších nemocí, po které lidstvo trpí stovky let. Přestože vědci dokázali identifikovat původce a vymyslet antibiotika, léčba není vždy úspěšná. Hlavním důvodem je dlouhá doba latentní nebo latentní formy onemocnění, která může trvat několik let. Pozdní diagnóza významně snižuje šance pacienta na zotavení a plný život.

Co je to PCR?

Pro detekci mycobacterium tuberculosis v těle po více než sto let byl úspěšně použit test Mantoux. Další metody se osvědčily dobře: bakteriologická kultura v umělém médiu, mikroskopická analýza, ELISA. Velké množství komplikací a falešně pozitivních výsledků, stejně jako trvání některých metod, však vyžadovalo zavedení nových technologií do diagnostické metodiky. Obrovský průlom v oblasti mikrobiologie byl vznik PCR analýzy tuberkulózy. Již několik desetiletí vykazuje svou účinnost a je široce používán pro diferenciální diagnostiku různých forem tuberkulózy.

PCR analýza tuberkulózy nebo polymerázové řetězové reakce je metoda detekce DNA bakterií nebo jejich fragmentů, která je založena na zvýšení molekul nukleové kyseliny působením enzymu DNA polymerázy. Pro pozitivní výsledek stačí pouze jedna molekula patogenní DNA, proto je tato metoda považována za vysoce citlivou. Diagnóza OCP u tuberkulózy je účinnější než očkování mykobakterií v umělém prostředí, protože na rozdíl od kultivační metody umožňuje rozlišovat mezi divokými a vakcinačními kmeny očkovanými BCG. Tím se vyhnete falešně pozitivním výsledkům a diagnostika bude přesnější.

Výhody PCR

Diagnostika PCR pro tuberkulózu umožňuje detekci Kochova bacillu v jakémkoliv biologickém prostředí organismu s určením jejich kvantitativního složení i v počátečním stadiu onemocnění, kdy jsou mykobakterie v hibernaci. Diagnóza onemocnění v latentní fázi umožňuje včas zahájit profylaktickou léčbu, aby se zabránilo rozvoji ložisek zánětu v plicích a vzniku komplikací v jiných orgánech a systémech. Kromě toho má PCR test na tuberkulózu několik výhod:

• vysoká specificita - 90-100%;
• vysoká rychlost - od 4 hodin do 2 dnů;
• vysoká citlivost, zejména u imunodeficience;
• diferenciální diagnostika.

Hlavní výhodou metody je, že CRC diagnostika tuberkulózy u dětí umožňuje rozlišit diseminovanou formu onemocnění od omezeného ohniska, a to i při negativních výsledcích z jiných testů. Diferenciální testování umožňuje zvolit správný léčebný režim a zvýšit účinnost léčby.

Vysoká specificita analýzy je dosažena eliminací křížových reakcí s jinými molekulami nukleové kyseliny a vysoká citlivost umožňuje detekci mykobakterií i v malém objemu shromážděného materiálu. PCR metoda sputa pro tuberkulózu má největší spolehlivost, její specificita dosahuje 100% ve srovnání se studiem jiných biologických materiálů.

Speciální mechanismus PCR poskytuje dostatek příležitostí pro detekci Kochových tyčinek u imunokompromitovaných pacientů. Podle metody analýzy detekuje reakce antigeny, takže nezáleží na tom, zda tělo produkuje protilátky proti patogenu nebo ne. Je tedy možné diagnostikovat extrapulmonální formy onemocnění a pokročilé případy u pacientů s nepřesnostmi v imunitním systému, což není možné pomocí jiných metod.

Nevýhody metody

Navzdory mnoha výhodám a vysoké citlivosti testu může PCR pro tuberkulózu vyvolat falešně negativní výsledek. Vzhledem k tomu, že pro diagnostiku se používá velmi malé množství biomateriálu, není vyloučena skutečnost, že patogen „se schovává“ v buňce nebo zánětlivé ohnisko a není uvolňován ven.

Citlivost této metody u dětí je 25-80%. Například v randomizované studii ve skupině pacientů s klinicky prokázanou diagnózou PCR krevní test na tuberkulózu přinesl pozitivní výsledek pouze u 50% pacientů. V tomto ohledu není možné při testování dítěte na patogenní mykobakterie nahradit jednu diagnostickou metodu jinou. Aby bylo možné plně ověřit absenci infekce, je nutné provést komplexní studii několika způsoby najednou.

Proces sběru

Hlavní podmínkou spolehlivosti PCR diagnostiky je dodržování pravidel pro sběr biologických tekutin pro analýzu. Kontaminovaný nebo nesprávně shromážděný materiál může způsobit nesprávné výsledky. Nejběžnější je analýza sputa, krve a moči, ale pro hlubší diferenciální diagnózu můžete odebírat vzorky z obsahu žaludku, synoviální tekutiny, mozkomíšního moku, tekutin, průdušek, spermií, sekrece prostaty.

PCR moči pro tuberkulózu se odebírá ráno po vnější hygieně genitálií močením do sterilní nádoby. Během postupu je důležité nedotýkat se vnitřních stěn nádoby, aby se zabránilo vniknutí mikroorganismů třetích stran. Ženy, které žijí pravidelný sexuální život, by rozhodně měly dát do vagíny tampon, aby se vyhnuly propuštění třetí stranou.

Krevní test se provádí ráno na lačný žaludek a PCR sputu na tuberkulózu lze provést kdykoliv během dne s povinnou předchozí ústní hygienou. To je nezbytné pro odstranění zbytků potravin, které se mohou dostat do nádoby. Při vykašlávání sputa je důležité zabránit pronikání slin a hlenu z nosohltanu do nádoby, což může zkreslit data z analýzy.

Studium obsahu žaludku se provádí v nemocnici v časných ranních hodinách, zatímco sputum polknuté přes noc je v žaludku. Aby se detekovala mycobacterium tuberculosis, tato metoda umožňuje třínásobné očkování, což s největší pravděpodobností umožňuje izolovat Kochův bacil.

Výsledky dekódování

Kvalitativní analýza PCR dává 2 typy výsledků "detekovaných" nebo "nedetekovaných". Znamená to pozitivní a negativní verdikt, resp. Odpověď „detekovaná“ znamená, že v testovaném vzorku je přítomna DNA infekčního agens a s 97% pravděpodobností je tělo infikováno tuberkulózou. Negativní výsledek indikuje nepřítomnost DNA Kochovy tyčinky ve vzorku biologického materiálu a dává 97% šanci, že tělo nemá velké množství mykobakterií, a 60%, že osoba není infikována.

Největší specifičnost pro diagnostiku tuberkulózy má krevní test a sputum. S pozitivním výsledkem indikují infekci těla, která vyžaduje neodkladná terapeutická opatření. Studie jiných biomateriálů nemusí indikovat průběh onemocnění, ale pouze přítomnost cizích bakterií. K tomu dochází, když je osoba nositelem nemoci, ale nešíří infekci do životního prostředí a neinfikuje zdravé lidi.

Kvantitativní PCR analýza se provádí méně často a ošetřující lékař se zabývá dekódováním jejích výsledků. Indikátory výzkumu slouží k určení aktivity onemocnění a míry poškození organismu. Na základě získaných dat může odborník určit účinnost léčby a v případě potřeby upravit terapeutické schéma.

Tuberkulóza byla a je i nadále jedním z nejzávažnějších problémů pro zdraví celého lidstva. Moderní diagnostické metody mohou detekovat onemocnění v raném stádiu, aby bylo možné zahájit léčbu včas. V oblasti laboratorní diagnostiky tuberkulózy se osvědčily tuberkulinové testy, mikroskopická analýza, kultivace bakterií na umělých živných médiích. Dlouhé čekání na výsledky a zvýšená četnost falešně pozitivních výsledků je však učinila zastaralými a přinesla do popředí vyspělejší technologie. PCR analýza je vysoce specifický a vysoce účinný způsob diagnostiky tuberkulózy. Jeho výsledky jsou nejspolehlivější ze všech navržených laboratorních metod pro detekci Kochových tyčinek. Umožňuje nejen učinit konečný verdikt, ale také provést nezbytnou diferenciální diagnózu.

PCR diagnostika tuberkulózy u dětí a dospělých: indikace pro

Světová zdravotnická organizace uznala před 20 lety, že míra šíření tuberkulózy byla mimo kontrolu a dosáhla rozsahu epidemie. Od té doby se situace nezlepšila. Každý rok je diagnostikováno více než milion případů onemocnění, z nichž téměř čtvrtina je smrtelných. V posledním desetiletí se incidence u dětí zvýšila, většina forem nemoci není vhodná pro standardní léčbu antibiotiky.

Dnes je jedním z globálních úkolů v medicíně vývoj takových diagnostických metod, které umožní identifikovat patologii před nástupem výrazných klinických příznaků. Jedním z nich je polymerázová řetězová reakce (PCR) pro tuberkulózu, která pomáhá detekovat tyčinky způsobující Kochovu chorobu v krvi, sputu a dalších biologických tekutinách.

Diagnóza tuberkulózy

Screeningové testy jsou zaměřeny na detekci pacientů, nosičů tuberkulózy a prevenci šíření infekce ve společnosti. Pro děti mladší 14 let se masivně používá test Mantoux. Jde o imunologický test, při němž se dávka tuberkulínu podkoží injektuje - což je komplexní směs genetického materiálu několika typů mykobakterií. Výskyt výrazné reakce indikuje aktivně se vyskytující infekční proces.

Pro preventivní vyšetření u dospělých s použitím fluorografie nebo rentgenového záření. Tyto metody pomáhají zviditelnit patologické léze v plicní tkáni. Způsobuje však obtíže při diferenciaci tuberkulózy od jiné organické patologie (maligní a benigní neoplazmy, zánětlivé procesy, parazitární invaze, profesionální poškození plic).

Pro objasnění struktury a velikosti patologického zaměření mohou být zapotřebí další instrumentální studie:

• cílená radiografie;
• počítačová tomografie;
• zobrazování magnetickou rezonancí.

Metody diagnostiky tuberkulózy

V případě pochybných výsledků a při stanovení adekvátní terapie je zapotřebí přesnějších diagnostických metod, které umožní izolovat patogen. Mikroskopické a bakteriologické vyšetření sputa se používá k dlouhodobému potvrzení plicních forem tuberkulózy.

V posledních letech je výskyt mykobakterií různých orgánů a systémů - ledvin, kostí, střev, kůže - stále častější. K identifikaci těchto forem tuberkulózy, ultrazvukového vyšetření, kultury moči a stolice lze použít endoskopické vyšetření.

PCR diagnostika tuberkulózy pomůže potvrdit přítomnost Kochových tyčinek v krvi, stejně jako její citlivost na určité léky. Jedná se o vysoce účinnou metodu založenou na detekci bakteriálního genetického materiálu v různých biologických tekutinách.

Specifičnost a indikace

Polymerázová řetězová reakce je vysoce citlivá mikrobiologická diagnostická metoda založená na principech genetického inženýrství. Pro potvrzení přítomnosti patogenu v biologickém materiálu je postačující pro tento fragment detekovat jedinečný fragment nukleové kyseliny. PCR pro tuberkulózu může detekovat bakterie v krvi, sputu, moči.

V současné době vyvinula několik metod analýzy. Mezi nejoblíbenější patří:

• PCR v reálném čase;
• mikrofluidní technologie;
• sekvenování a pyrosekvenování.

PCR v reálném čase

Laboratoře nejčastěji využívají polymerázovou řetězovou reakci v reálném čase, protože snižuje počet falešně pozitivních výsledků a samotný proces analýzy trvá krátkou dobu.

Vzhledem k velkému počtu skrytých forem onemocnění a neúčinnosti standardních diagnostických metod se stále více používá PCR. Účel této analýzy je uveden na adrese:

• identifikaci podezřelých oblastí na rentgenovém snímku;
• pochybné výsledky tuberkulinového testu;
• nemožnost provádět mikroskopickou a bakteriologickou analýzu sputa u osob ve vážném stavu;
• provádění chirurgických zákroků, pokud je nutné rychle zajistit, že nedochází k infekci;
• nepřípustnost použití fluorografie, rentgenového záření nebo počítačové tomografie (například u těhotných žen a kojení v případech nadměrného ozáření);
• podezření na extrapulmonální tuberkulózu (doporučuje se použít nejen krev, ale i hlen).

PCR diagnostika tuberkulózy se osvědčila při vyšetření dětí z důvodu nedostatku dodatečné expozice a rychlých výsledků.

Postup přípravy a analýzy

Není nutná speciální příprava na krevní PCR. Aby se však předešlo komplikacím odběru vzorků krve a aby se získal kvalitní materiál, je třeba dodržovat následující obecná pravidla:

• analýza by měla být provedena ráno ne dříve než 2 hodiny po probuzení;
• Mělo by omezit příjem mastných a smažených potravin denně před odběrem krve;
• zdržujte se jídla, čaje a kávy po dobu 8-9 hodin, je dovoleno pít čistou vodu;
• Nekuřte nejméně 3-4 hodiny.

V případě trvalého léčení (hormony, antikoagulancia, protizánětlivá léčiva, antibiotika, ředidla krve) byste o tom měli informovat asistenta laboratoře.

Při aplikaci sputa byste měli dobře čistit zuby a několikrát si vypláchnout ústa. Materiál odeberte ve sterilní nádobě. Pro dosažení lepších výsledků lze večer použít expektoranci nebo mukolytikum.

Diagnóza se skládá z několika fází.

Plotový materiál. Lze jej provádět v laboratoři i na dálku. Některé typy materiálu, které pacient sbírá nezávisle (moč, hlen).

Zničení struktury nukleových kyselin (denaturace molekul DNA a RNA). K tomu se testovaný materiál zahřívá na teplotu 98 ° C a udržuje se několik minut. Výsledkem je, že se dvojitá šroubovice uvolní, vytvoří se jednovláknové molekuly.

Žíhání Po přidání primeru (krátký úsek nukleové kyseliny) teplota klesne o několik stupňů, aktivuje se polymeráza.

Elogace. Teplota je nastavena na optimální úroveň, enzymová aktivita dosahuje maxima a druhý řetězec je dokončen v souladu s Chargaffovým pravidlem komplementarity.

Pro dokončení studie je nezbytné syntetizovat požadovaný počet molekul DNA - asi 50 cyklů výše uvedené reakce. To trvá asi 2-3 hodiny. Pozitivní výsledek reakce neznamená vždy aktivní stadium onemocnění, ale je indikátorem přítomnosti mikroorganismu v těle.

Výhody a nevýhody metody

Ve srovnání s jinými mikrobiologickými metodami, PCR nepotrvá dlouho, než detekuje Mycobacterium tuberculosis pomocí PCR, výsledek lze získat v den testování.

Další výhodou je vysoká specifičnost analýzy, která umožňuje detekci přítomnosti patogenu s přesností 90-95% v téměř každém biomateriálu (krev, moč, výkaly, mozkomíšní mok, sputum, návaly průdušek).

Existuje však několik nevýhod metody:

• poměrně vysoké procento falešně pozitivních výsledků (až 15%), což je spojeno s detekcí neživých mikroorganismů;
• v některých případech můžete tuto skutečnost vynechat, protože Mycobacterium tuberculosis je často vystavena mutacím a změnám genetického materiálu;
• nízká účinnost při vyšetření osob s imunodeficiencí;
• vysoké náklady na výzkum, potřeba drahých zařízení a činidel.

Co lze vyměnit?

Vzhledem k rozmanitosti forem infekce tuberkulózy je pro přesnější diagnózu a volbu léčby nutné kombinovat několik diagnostických studií:

Povinná analýza pro děti je Mantoux test. Pokud se zavedení tuberkulínu (genetický materiál mykobakterií) projeví výraznou reakcí, lze předpokládat infekci tuberkulózním bacilem.

Pro vizualizaci patologického fokusu lze použít rentgenové metody. V diagnostice extrapulmonální tuberkulózy se používají endoskopické metody při současné biopsii:

• bronchoskopie pomáhá identifikovat léze hrtanu, průdušnice, průdušek;
• kolonoskopie - střeva;
• cystouretroskopie - orgány močového systému;
• hysteroskopie - ženské genitálie. Tyto metody nejsou specifické, pro stanovení přesné diagnózy by měl být identifikován patogen.

Obecné klinické testy pomohou specifičtěji určit stav těla. Vyžaduje se kompletní krevní obraz s leukocytárním vzorcem.

Zvýšení počtu neutrofilů se sníženou hladinou lymfocytů a zvýšení rychlosti sedimentace erytrocytů (ESR) indikuje aktivní zánětlivý proces bakteriální etiologie. Vyloučit poškození orgánů močového systému pomocí obecné analýzy moči a kultury pro sterilitu.

PCR je v současné době dostupná ve většině soukromých laboratoří. To vyžaduje nejen vysoce kvalifikované odborníky, ale také drahé vybavení, velký počet činidel. Použití této metody je proto i přes vysokou přesnost a specifičnost omezené.

PCR analýza pro diagnostiku tuberkulózy

Medicína nikdy nezůstane v klidu a pokrok ve zdravotnictví umožňuje diagnostikovat a léčit mnoho dříve nepostižených onemocnění. Existují také nemoci, které nelze zjistit vizuální kontrolou. Mezi nimi byla vždy tuberkulóza. Je to nebezpečné infekční onemocnění, které postihuje plíce, klouby a kosti a často vede k smrti i v našich dnech. Diagnostické metody pro toto onemocnění byly zlepšeny, což umožňuje detekci onemocnění v dřívějších stadiích, kdy je léčitelný. Mezi ně patří nejen rentgenové a Mantouxové testy, ale také PCR pro tuberkulózu.

Tuberkulóza - co to je

Dříve, tuberkulóza byla volána suchá nemoc nebo phisisis. Jedná se o bakteriální infekci, která nejčastěji postihuje plíce. Jeho extrapulmonální formy - tuberkulóza kostí a kloubů, tuberkulózní meningitida - jsou méně časté a pokročilejší stadia. Jako původce tohoto infekčního onemocnění se uvádějí mykobakterie. Tuberkulóza bacillus je také nazýván Koch hůlkou.

TBC infekce je velmi nakažlivá, přenáší se vzduchovými kapičkami při kašlání a kýchání pacienta. Jedinou ochranou proti tomuto onemocnění je včasná vakcína. Nechrání před infekcí, ale neumožňuje bacilům vstoupit do těla, aby způsobily tuberkulózu.

Formy tuberkulózy

K onemocnění může dojít jak v otevřené, tak v uzavřené formě. Rozdíly jsou následující:

• uzavřená tuberkulóza je asymptomatická. Za těchto okolností není Kochova hůlka ve sputu detekovatelná, proto není nakažený pro životní prostředí nebezpečný. Takový průběh nemoci obvykle neohrožuje nejinfikovanější, ale existují výjimky - v jednom případě deseti je uzavřená tuberkulóza schopna jít do otevřené formy;
• s otevřenou formou se mykobakterie, které způsobují tuberkulózu, nacházejí ve slinách a sputu pacienta. Infikovaný organismus představuje velké nebezpečí pro společnost i v izolaci. Zpravidla onemocnění postihuje plíce. Pokud není diagnostikována dříve, může mít jiné formy, jako je tuberkulóza kostí nebo kloubů.

Otevřená forma tuberkulózy je diagnostikována různými způsoby. Pacient podstoupí rentgen hrudníku nebo rentgen hrudníku, analýzy jeho biologického materiálu nebo kožního testu Mantoux. V poslední době se objevila další metoda, která je považována za stejně účinnou - analýzu polymerázové řetězové reakce (PCR).

Co znamená PCR

V lékařské praxi jsou již dlouho používány metody diagnostiky tohoto nebo tohoto onemocnění detekcí jeho DNA nebo RNA v lidském těle. To je přesně PCR pro tuberkulózu. Jedná se o vysoce přesnou analýzu krve nebo jiné biologické tekutiny, která vám umožní identifikovat bakterie s minimem jejich koncentrace ve vybraném materiálu, stačí jedna buňka. Studie se provádí za použití speciálního polymerázového enzymu.

Výhody metody

PCR je diagnostická metoda, která se ukázala na nejlepší straně, takže se používá poměrně často, a to jak v kombinaci s jinými metodami, tak nezávisle. Jeho výhody:

• nejkratší výrobní období. Studie se provádí rychle, asi za 5 hodin pomocí PCR může detekovat přítomnost bacil tuberkulózy v biologické tekutině pacienta. To platí zejména v případě, že potřebujete provést okamžitý chirurgický zákrok a předtím, než dostanete přesnou diagnózu;
• Stává se, že jiné diagnostické metody jsou pro pacienta kontraindikovány. Například, rentgenové paprsky mohou být dělány ne každý. Kromě toho, obraz není vždy možné provést diagnózu, zejména v případě, že nemoc je v rané fázi. Pomocí metody PCR je patogen okamžitě detekován;
• Pro analýzu je vhodná biologická tekutina pacienta. PCR urine a slin pro tuberkulózu se provádí k identifikaci plicních a extrapulmonálních forem. Studie se také provádí za použití pacientovy míchy k detekci tuberkulózní meningitidy.
• Metoda je naprosto bezpečná. Chcete-li to provést, stačí od pacienta získat biologickou tekutinu. PCR diagnostika tuberkulózy u dětí je pohodlná a neškodná, protože rentgenové vyšetření je povoleno pouze ve věku 18 let a Mantouxův test někdy způsobuje nežádoucí účinky;
• PCR je vysoce citlivá analýza. To vám umožní identifikovat Koch tyčinky s minimální koncentrací mykobakterií;
• S pomocí speciálního polymerázového enzymu je onemocnění diagnostikováno v jakémkoliv stadiu, od raného do pokročilého;
• tento způsob je účinný při diagnostice recidivy onemocnění;
• Tato metoda je průlom v přesných diagnózách v raných stadiích onemocnění. To vám umožní zahájit léčbu v nejkratším možném čase a zničit patogeny, pokud ještě neměly nevratný negativní vliv na orgány a systémy lidského těla.

Kde provést PCR analýzu tuberkulózy

Ačkoliv je PCR analýza tuberkulózy vysoce účinnou metodou pro diagnostiku tohoto onemocnění, používá se jen zřídka samostatně. Jedná se zpravidla o další metodu detekce tuberkulózy, která se používá vzácně. Faktem je, že tato metoda je poměrně drahá.

Veřejné kliniky nemají možnost nakupovat speciální vybavení pro provádění analýzy PCR a vláda nevidí smysl financování tohoto článku, protože tuberkulóza může být diagnostikována jinými způsoby. Taková studie se nejčastěji provádí na soukromých klinikách, které si mohou dovolit zakoupit potřebné vybavení.

Nevýhody metody

Vysoká cena není jedinou nevýhodou PCR. Kromě vysokých nákladů má metoda další nevýhody a nedostatky, například:

• PCR pro tuberkulózu dává pozitivní výsledek i po ošetření, protože bere mrtvé buňky jako živé bakterie, proto tato metoda není vhodná jako kontrolní vyšetření pacienta k potvrzení jeho uzdravení;
• mutace tuberkulózy bacilli a jejich DNA je modifikována, což může ovlivnit spolehlivost výsledku;
• PCR krevní testy na tuberkulózu se provádějí zřídka, protože přítomnost Kochových tyčinek v těchto biologických tekutinách je velmi obtížné detekovat. To je možné pouze v posledním stadiu nebo v sepse. Obvykle je pacientova sputa odebírána pro diagnózu;

Stojí za zmínku, že nejpřesnějším výsledkem je právě sběr obsahu žaludku pacienta. Pokud je podezření na plicní tuberkulózu, kultura sputa bude nejúčinnějším způsobem diagnostiky onemocnění. Pokud má pacient extrapulmonální formu, pak v tomto bioenvironmentu nemusí být žádné bakterie. Pro stanovení tuberkulózy kostí, kloubů atd. Pomocí PCR je potřebná další biologická tekutina, například mícha.

Jak je PCR pro tuberkulózu

Jak bylo popsáno výše, podstatou PCR analýzy je detekce DNA patogenu v biologické tekutině pacienta polymerázovou reakcí. Hlavní fáze metody:

1. Odběr biologických materiálů. PCR není jen hemotest - studovaná biomasa může být sliny, moč, cerebrospinální tekutina, bronchiální mycí tekutina, obsah žaludku, sputum.
2. Poté je biomasa vystavena vysokým teplotám, aby se zničila struktura DNA patogenu.
3. Pak se teplota postupně snižuje a na zničený prvek DNA je navázán primer.
4. Podle výsledků molekulární syntézy, která trvá přibližně 30 cyklů, je detekován kmen určitých patogenních bakterií nebo jeho nepřítomnost.

Tato analýza vyžaduje dobré financování, takže PCR není prováděna velmi často. Tato metoda však není stejná, pokud jsou jiné diagnostické možnosti zakázány, nebo v případě nouze, kdy není čas čekat na výsledek.

Shrnutí

Na závěr můžeme vyvodit následující závěry:

• PCR je vysoce přesná analýza, která dokáže detekovat tuberkulózu několik dní po infekci;
• tato analýza je prováděna za 3,5 - 5 hodin, takže v případě, že návrh zákona jde do hodin, je nenahraditelný;
• je to bezpečná metoda, která nemá žádné vedlejší účinky;
• Používá se v případech, kdy jiné diagnostické metody vykazují nekonzistentní výsledky nebo je jejich použití kontraindikováno.

Nicméně, PCR je zřídka hotová, protože to je drahá analýza, která vyžaduje instalaci speciálního vybavení. Navíc není vždy informativní, takže odborníci používají tuto metodu detekce tuberkulózy jako další.

PCR analýza (diagnóza) tuberkulózy

Tuberkulóza nebo konzumace - jedna z nejoblíbenějších infekčních chorob 21. století. Jeho patogeny jsou speciální mikrobakterie - Kochovy tyčinky.

Onemocnění se šíří nejen do plic, ale také do mozku, trávení, kloubů nebo páteře, močového systému a kůže.

Podle WHO trpí každý rok 10 milionů lidí tuberkulózou, z nichž 3 miliony jsou smrtelné.

Situace je obzvláště smutná na území zemí SNS, zde se periodicky vyskytují tuberkulózní epidemie. Rusko, Kazachstán, Ukrajina jsou vedeny smutným hodnocením šíření této infekce.

Infekce je snadno přenášena vzduchem rozptýlenými kapičkami nebo prostřednictvím trávicího systému, ovlivňuje životně důležité orgány a je také schopna se rychle přizpůsobit polymerním lékům a chemoterapii.

Jedním z hlavních faktorů úspěšné léčby tuberkulózy je včasná detekce infekce.

Diagnostické metody

Lidstvo vynalezlo mnoho metod pro rozpoznání nebezpečné nemoci. Diagnóza tuberkulózy je rozdělena na instrumentální a laboratorní.

V prvním případě, krevní test na tuberkulózu, stejně jako sputum, moč.

Druhou skupinou je studie používající rentgenové a endoskopické vyšetření. Instrumentální metody pro diagnostiku tuberkulózy jsou zase radiační a chirurgické.

Typy radiačních metod pro zjištění onemocnění

• Fluorografie je metoda diagnostiky nemoci známé každému obyvateli CIS. Pomocí rentgenových paprsků se vyšetřují plíce a lymfatické uzliny.
• X-ray hrudníku - podobný fluorografii, ale lepší způsob detekce infekce. Obraz je získán podrobněji a ve dvou projekcích, ale tento postup je asi šestkrát dražší. Obvykle se používá po vzniku vážného podezření na nemoc.
• Počítačová tomografie se provádí jako další diagnóza, která se také používá po dobrém důvodu přítomnosti infekce.

Chirurgické metody diagnózy zahrnují bronchiální endoskopii, stejně jako mediastinoskopii a torakoskopii.

První metodou je studium bronchiálního stromu plic pomocí „sondy“ v tomto orgánu. Zbývající dvě metody umožňují studovat pleurální část plic propíchnutím hrudníku.

Všechny tři metody jsou závažným chirurgickým zákrokem a nejčastěji se používají v procesu progrese onemocnění.

Laboratorní testy zahrnují:

• Analýza sputa pro tuberkulózní bacil.
• Mikroskopické vyšetření.
• PCR diagnostika tuberkulózy

Co je to PCR diagnostika?

Jednou z nejmodernějších metod laboratorní diagnostiky infekčních specialistů je polymerázová řetězová reakce.

Tato metoda byla vyvinuta slavným americkým vědcem Carrie Mullis v roce 1983, za kterou získal Nobelovu cenu.

PCR analýza je izolace částic DNA ze sputa, krve, mozkomíšního moku, výkalů atd. pro jejich následnou biosyntézu.

S pomocí komplexní molekulárně genetické studie se stanoví povaha mikrobů v těle pacienta.

Tento druh analýzy tuberkulózy se provádí v několika fázích:

• Nejprve se odeberou biologické vzorky. Materiály jsou umístěny ve speciálních nádobách a odeslány do laboratoře.
• Ve výzkumném centru jsou analýzy vyhřívány na 97 stupňů. To umožňuje zničit strukturu genomu DNA mikroorganismů, která se skládá z několika řetězců.
• Teplota je specificky snížena tak, že primery (účastníci DNA, ze kterých začíná proces biosyntézy) se mohou připojit k jakémukoliv řetězci deoxyribonukleové kyseliny.
• Poté se provede biosyntéza molekul potřebných pro detekci.

Po 25–30 opakovaných cyklech v laboratorním výzkumném procesu mají lékaři možnost rozpoznat, zda jsou v těle pacienta přítomny infekční mikroorganismy nebo ne.

Výhody a nevýhody

PCR pro tuberkulózu je nejmodernější diagnostickou technikou. Metoda umožňuje detekci infekce v jakékoliv fázi s vysokou spolehlivostí. Výhody:

• Rychlost - studium trvá déle než pět hodin. Výsledky testu na mikroby tuberkulózy lze nalézt do 24 hodin.
• Bezpečnost - PCR metoda nemá žádné věkové kontraindikace.
• Včasnost - tato technika umožňuje detekovat tuberkulózu v těch stadiích, kdy onemocnění nemá žádné příznaky.
• Vysoký stupeň přesnosti - pokud je v analýzách jen několik mikroorganismů, budou nalezeny pomocí polymerázové řetězové reakce. Tato technika také umožňuje snadno identifikovat původce tuberkulózy.
• Všestrannost - diagnostika se používá nejen pro detekci spotřeby, ale i pro další nemoci, jako jsou chlamydie, kapavka apod.

Navzdory mnoha výhodám je použití této techniky v domácí lékařské praxi spíše výjimkou než pravidlem. Existuje pro to několik důvodů.

Nevýhodami této metody jsou:

• Vysoké náklady na průzkum.
• Tato metoda není vhodná pro ty, kteří podstoupili léčbu, protože přítomnost mrtvých bakterií Koch může vést k falešně pozitivnímu výsledku.
• V případě mutace infekčních mikroorganismů nelze jejich genom rozpoznat falešným závěrem.
• Je důležité zvolit správné prostředí pro detekci. Například výsledek krevního testu pro PCR na tuberkulózu (vstup ředění) bude negativní, pokud je infikován nervový systém.
• Tuto metodu nelze vždy aplikovat na pacienty s diagnózou plicních lézí.

Navíc taková analýza tuberkulózy vyžaduje moderní vybavení, které nemá 90 procent nemocnic. V CIS takovou analýzu může provádět síť klinik Invitro.

Podmínky analýzy

Doporučení pro pacienty podrobující se takovému testu na tuberkulózu se liší v závislosti na typu provedené analýzy.

Při odběru krve pro PCR je nutné upustit od kouření hodinu před zákrokem, dvě hodiny - aby se vyloučily alkoholické a tučné potraviny.

Doporučuje se také vyhnout se fyzické námaze, je také nemožné vzít krev na tuberkulózu na prázdný žaludek.

Když vezmete tampon z úst a nosní dutiny, nemůžete jíst 2-4 hodiny před zákrokem, jinak to nebude informativní. Také nepijte alkohol.

Pro přesné měření je zakázáno kouřit dříve než hodinu před zákrokem. V předvečer se vyhněte kartáčování zubů a sprejů a ústních sprejů.

Pokud máte podezření na tuberkulózu urogenitálního systému, pacient po dobu 2-3 dnů před porodem by měl vyloučit pohlaví, 2-3 hodiny před zákrokem, nechodte na toaletu „malým způsobem“. Genitální orgány by měly být umývány čistou vodou bez speciálních prostředků.

Ženy se nedoporučují používat vaginální tablety, svíčky, kuličky a také se zdržet testování v kritických dnech.

5 dnů před porodem je výsledek nutný k ukončení zákroku kolposkopie a transvaginální ultrazvuk,

Kdy se používá PCR diagnostika?

Ne každá klinika má takovou komplexní diagnózu, ale lékaři se stále více uchylují k těmto metodám výzkumu. Obvykle se tento druh analýzy provádí ve zvláštních situacích.

• V případě pochybných výsledků manty lze použít krevní test na tuberkulózu.
• V případech, kdy byl pacient v kontaktu s infikovanou osobou, ale ošetřující lékař nemůže přesně určit diagnózu.
• V případě nouzové operace, kdy je nutné v krátké době zjistit, zda má pacient tuto infekci.
• Když je pacientka těhotná, když jiné výzkumné metody nejsou pro novorozence dostatečně bezpečné.

Je třeba poznamenat, že tato diagnóza je doporučena pro děti z důvodu její bezpečnosti.

Pokud má student kontraindikace proti tuberkulínovému testu, může namísto pláště provést PCR krevní test na tuberkulózu.

PCR analýza tuberkulózy

PCR analýza tuberkulózy je nejoblíbenější mezi lékařským výzkumem v této oblasti.

Ale jak varovat sebe a své blízké z této hrozné nemoci? Jak složit potřebné testy pro PCR?

Příznaky tuberkulózy a její prevence

Odborníci říkají, že asi 30% z celkové populace trpí tuberkulózou.

Nejvyšší procento této choroby se vyvíjí v nerozvinutých zemích. K tomu nejčastěji dochází v důsledku snížené imunity u lidí.

Nemoc je jednou z nejstarších. Tato choroba se nachází ve sliznici mozku, v zažívacím traktu, na kloubech a páteři, v močovém systému av malých oblastech na lidské kůži.

Odborníci nejsnadněji určují postiženou kůži. Na místě jsou malé plomby, které se časem zvětšují, vybuchují bělavou kapalinou.

Kauzální původce tuberkulózy může být nejčastěji zachycen, když mluví s nemocnou osobou, když kašle nebo kýchá. Obvykle onemocnění postupuje bez symptomů nebo má otevřenou formu, ale PCR diagnostika tuberkulózy umožňuje jeho detekci v raných stadiích i v nouzových případech.

Symptomy onemocnění: prodloužený mokrý kašel, horečka, zimnice, nadměrné pocení v noci, prudká ztráta hmotnosti, pocit únavy a slabosti.

Otevřená forma onemocnění je nejnebezpečnější. Člověk trpící tuberkulózou je schopen infikovat zdravé lidi.

Nejdůležitějším příznakem plicního onemocnění je hemoptýza. Vyskytuje se v jakékoliv formě onemocnění.

V některých situacích to může vést k krvácení z plic osoby. Je to velmi nebezpečné a vyžaduje urgentní lékařský zásah.

Pro prevenci a rozpoznávání tuberkulózy odborníci předepisují: vzorek - tuberkulinový test, vyšetření biologického materiálu, fluorografii, rentgenové snímky a krevní test, sputum nebo sliny.

Diagnóza onemocnění

Zlepšení diagnostiky onemocnění - to je správné a během léčby. Ve většině případů obvyklé metody detekce patogenů nemají vždy účinek a jsou již zastaralé.

Nejdůležitějším způsobem, jak identifikovat a diagnostikovat plicní onemocnění, jsou lékařské vyšetření. Obvykle používejte PCR diagnostiku. Tento průzkum byl nedávno objeven v roce 1983 americkým biochemikem Mullisem.

Test u pacienta s plicní tuberkulózou se provádí výhradně ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo je nemožné detekovat onemocnění instrumentálním způsobem.

Polymerázová řetězová reakce je spolehlivá metoda PCR. Tato analýza umožňuje určit původce toho, kolik je v krvi, moči a tekutinách míchy. Taková lékařská prohlídka je nejbezpečnější.

PCR analýza dává 100% výsledek.

Má vysokou citlivost, která pomáhá rozpoznat onemocnění poprvé po infekci, než se objeví příznaky onemocnění. Tato metoda analýzy poskytuje výsledek během několika hodin po dodání biologického materiálu. Výsev této analýzy se provádí třikrát, ale odsávání nemocného žaludku se provádí pouze v nemocnici.

Pro stanovení výsledků byla vyvinuta tři kritéria: vysoká přesnost, citlivost až 90%, specificita.

V některých případech se používá test na PCR:

1. diagnostikovat plicní tuberkulózu;
2. určit zdroj choroby;
3. definice extrapulmonální lokalizace;
4. diagnóza opakování.

Vyhodnotit výsledek a předepsat správné lékařské ošetření, může pouze odborník. Je velmi důležité přiřadit správné schéma léčby pro detekci tuberkulózy, je nezbytné provést test citlivosti patogenu na zařízení proti tuberkulóze.

Různé lékařské testy tuberkulózy

Potřebnou analýzu můžete provést dvěma způsoby: odebrat krev člověku nebo slině nebo vzít sputum.

Krevní testy PCR mohou být dvou typů: ELISA a PCR. Taková studie pomáhá monitorovat účinnost léčby.

ELISA pomáhá najít protilátky v lidském těle, které odolávají mikrobům tuberkulózy. Tato studie se provádí jednou denně. Hlavní nevýhodou je nízká citlivost, která umožňuje stanovit pouze onemocnění s nízkou úrovní infekce.

Nejoblíbenějším a nejúčinnějším výzkumem je analýza mycobacterium tuberculosis. S ní mohou lékaři snadno najít DNA bakterií v lidské krvi. Tato metoda se také používá k určení počtu bakterií, ke kontrole léčby pacienta, k detekci časné recidivy.

PCR slin je jednou z nejmodernějších výzkumných metod. Taková analýza pomůže identifikovat infekční bakterie ve slinách. Použitím PCR se zvyšuje počet fragmentů DNA škodlivých mikrobů.

Metoda kultivace je určena pro vyšetření lidského sputa pro detekci mikrobakterií.

Příprava na PCR testování

Pozor, pro PCR potřebujete správnou přípravu slin. Pokud nebudou dodrženy všechny předpisy, může být analýza falešně pozitivní.

Před zahájením zkoušky je zakázáno kouřit, užívat jídlo a léky, stejně jako konzumovat alkohol po dobu 12 hodin. Je zakázáno čistit si zuby, nemůžete používat oplachovací prostředek, osvěžovač úst a dentální nit.

Je zakázáno používat rtěnku a vstupovat do intimních vztahů. Dovoleno opláchnout ústa hladkou převařenou vodou;

Toto vyšetření pomůže určit: herpes, chlamydia, tuberkulózu, patogeny pneumonie, onkoviry, barolleózu, mononukleózu, HIV, hepatitidu všeho druhu, zarděnku.

Analýza mykobakterií se provádí převážně v kontroverzních případech, zejména pokud je obtížné stanovit diagnózu nebo před zahájením operace došlo ke kontaktu s pacientem s tuberkulózou, aby se zjistila choroba. Používá se k vyšetření těhotné ženy, protože tato metoda je pro matku a plod nejbezpečnější.

Někdy se analýza provádí na soukromé klinice, protože pacient nedodržoval pravidla pro testování, ale zároveň se obává všech symptomů. Analýzu lze provést, když odborníci po provedení testu Mantoux neví, nebo je-li dítě dítě.

Výhody a nevýhody lékařských testů pro stanovení tuberkulózy

PCR je nejoblíbenější a nejúčinnější způsob, jak zjistit nemoc.

Jeho největší rozdíl od jiných studií je rychlý a přesný výsledek.

Výhodou tohoto lékařského vyšetření je, že může být prováděna pro urologické, gynekologické, onkologické, infekční, hematologické, plicní, gastroenterologické a další studie.

Hlavní výhodou takové lékařské studie je, že krevní testy, sputum a sliny jsou připraveny v krátkém čase (detekce onemocnění trvá 5 hodin). Takové lékařské vyšetření umožňuje provádět testy, pokud jsou některé metody studia nemoci zakázány nebo nepřístupné. Skvělé pro detekci recidivy u lidí.

Díky této analýze bylo možné provádět výzkum pro jakékoliv biologické prostředí. Je povoleno odebírat materiál od dětí. PCR umožňuje identifikovat původce v jakémkoliv stadiu onemocnění. Vzhledem ke své vysoké citlivosti lze nalézt mikroby i v případě, že je přítomno jen několik bakterií.

Metoda PCR rozšiřuje své možnosti. Používá se také k určení otcovství, k výrobě nových genů, mutací, křížení prvků DNA a podobně.

Nevýhody této studie jsou drahá metoda průzkumu.

Po lékařském ošetření může krevní test prokázat přítomnost živých nebo mrtvých patogenů v malých množstvích, po lékařském vyšetření poskytne pozitivní výsledek.

Bakterie a mikroby mohou podstoupit mutaci, po které PCR nebude schopna je identifikovat a identifikovat, proto pouze odborník může předepsat studium požadovaného prostředí, jinak bude takové vyšetření neúčinné.

Po testování je negativní výsledek, ale to nevylučuje možnost infikování osoby tuberkulózou. Takové lékařské vyšetření se provádí u pacientů se závažným plicním onemocněním, kdy jiné studie neposkytují přesné výsledky. PCR bude užitečná pro osoby s plicní a extrapulmonální tuberkulózou.

Bohužel zdravotnické prostředky pro detekci patogenů tuberkulózy jsou velmi drahé.

Veřejné nemocnice a kliniky si to nemohou dovolit, ale placené kliniky provádějí pacientské testy a v krátké době poskytují hotové výsledky.

PCR diagnostika tuberkulózy

Tuberkulóza je specifická infekce, její zaměření může být v lidských tkáních po celá léta a pak se šíří několik měsíců. Jedná se o chronické onemocnění, jehož optimální léčebné režimy je obtížné vybrat. Jedním z důvodů je pozdní diagnostika, kdy se mykobakterie, zatímco v lidském těle, již přizpůsobily mnoha lékům.

Jaké moderní metody diagnózy existují? PCR diagnostika - co to je? Jaký je tento výzkum? V jakých případech je tuberkulóza diagnostikována touto metodou a jaká je její podstata?

Co je to PCR diagnostika

Je to jedna z nejmodernějších metod diagnostiky nejen nemocí, ale také detekce biologického materiálu. PCR diagnostika byla vynalezena relativně nedávno. Asi před 30 lety v roce 1983, americký biochemik, Carey Banks Mullis, navrhl komplexní schéma obnovy biologického materiálu mikroorganismů v jednom krátkém segmentu. Díky jeho objevu získal vědec nejvyšší cenu - Nobelovu cenu.

Co je to - PCR diagnostika infekcí? Polymerázová řetězová reakce (PCR) je diagnóza detekce virových onemocnění, založená na metodách genetického inženýrství. Je široce používán v lékařské mikrobiologii, imunologii a virologii. Metoda je univerzální a pomáhá diagnostikovat malé množství materiálu. Infekce může být detekována doslova v prvních hodinách infekce, dlouho předtím, než se objeví první příznaky onemocnění.

Metoda spočívá v tom, že z materiálu od nemocného není získán samotný patogen, nýbrž fragmenty genomu (částice DNA), jeho biosyntéza s následným určením, do které třídy mikroorganismů získaný genetický materiál patří, pomocí molekulárně genetických metod.

Navzdory skutečnosti, že se jedná o komplexní proces, trvá mnohem méně času než mnoho biologických metod detekce infekčních agens. Během několika hodin lze pomocí PCR detekovat mikroorganismus. K tomu není nutné izolovat ji od prostředí (krev, mozkomíšní mok, sputum) a pěstovat ji po dlouhou dobu na umělých živných médiích. Stačí, když je ve studovaném materiálu přítomen malý fragment řetězce DNA infekčního činidla.

Základem reakce je možnost za umělých podmínek (in vitro) vytvořit syntézu molekul nukleové kyseliny infekčního agens.

Co je potřeba pro PCR?

1. Primery jsou segmenty DNA, ze kterých začíná biosyntéza nebo tvorba.
2. Nukleotidy nebo komplexní sloučeniny, které jsou základem molekuly DNA nebo RNA.
3. Polymerázová řetězová reakce není možná bez přítomnosti polymerázy, což je enzym urychlující PCR.

Fáze diagnostiky PCR

Jak probíhá molekulární diagnostika pomocí PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátkou dobu s ohledem na sběr materiálu.

1. Před zahájením studie si vezmou potřebný biologický materiál - to je voda z průdušek, krev, obsah žaludku, sputum. Typ biologického materiálu závisí na podezřelém patogenu.
2. Denaturace nebo zničení primární struktury DNA, která se skládá ze dvou řetězců. Podstatou této fáze je oddělení dvou řetězců pod vlivem vysoké teploty (maximum je 98 ° C, které trvá ne déle než dvě minuty).
3. V dalším stadiu PCR, zvaném annealing, se teplota sníží o několik stupňů, takže se primer naváže na DNA řetězec.
4. Prodloužení, během kterého probíhá syntéza požadovaných molekul přímo.

Výsledkem je, že pouze 25–30 takových cyklů obdrží potřebný počet kopií DNA mikroorganismu, které lze snadno rozpoznat.

Vyžaduje PCR diagnózu tuberkulózy?

Není možné, aby všichni lidé s podezřením na tuberkulózu prováděli PCR, protože tento způsob vyžaduje drahé vybavení. Ne všechny veřejné kliniky si to mohou dovolit koupit. Navíc se tak stalo, že obvyklé metody diagnostiky infekce ve většině případů se také ospravedlňují.

Patří mezi ně:

• průzkum pacientů, historie;
• úplné vyšetření osoby;
• studie s použitím tuberkulinového testu Mantoux;
• radiografie nebo fluorografie;
• počítačová diagnostika v případě potřeby;
• metody mikrobiologického výzkumu: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetření sputa.

PCR pro tuberkulózu se provádí ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo není možné provádět jiné instrumentální metody.

I přes hojnost diagnostických metod stále roste výskyt tuberkulózy. V současné době nejde jen o jeho růst, ale i další funkce:

• onemocnění se často vyskytuje v těžké formě;
• počet smrtelných případů se zvyšuje;
• stále odolnější vůči moderní chemoterapii jsou diagnostikovány formy onemocnění.

Neochota samotných lidí každoročně podstoupit rutinní lékařská vyšetření, odmítnutí očkování vede k šíření tuberkulózy. V takových podmínkách potřebujeme rychlé, informativní a účinné výzkumné metody, které by měly být přístupné dětem i dospělým. Všechny výše uvedené diagnostické metody jsou mnohem horší než PCR.

Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocí PCR

Tento výzkum, i když nový, se osvědčil, zejména v kontroverzních případech, kdy není možné provést diagnózu z několika důvodů.

Díky PCR je mnohem snazší detekovat původce tuberkulózy v testovaném materiálu.

Výhody PCR diagnostiky jsou následující.

1. Jedná se o rychlou analýzu. Malý fragment molekuly DNA může být použit k diagnostice během pouhých několika hodin (asi pět), která se úspěšně používá v nouzových situacích, kdy například před operací je nutné určit, zda je člověk nemocný tuberkulózou.
2. PCR analýza je povolena v případě, kdy jsou jiné metody nedostupné nebo zakázané (pro detekci plicní tuberkulózy, někdy musíte vzít několik radiografických snímků, což bude velká dávka záření).
3. Pomocí PCR se vyšetřuje biologické prostředí na přítomnost patogenu. Například můžete provést studii mozkomíšního moku, pokud existuje podezření na tuberkulózní meningitidu.
4. Povolena PCR diagnostika infekčních onemocnění u dětí, protože metoda je bezpečná.
5. Umožňuje identifikovat patogen v jakékoli fázi onemocnění.
6. Vysoká citlivost PCR umožňuje detekci Mycobacterium tuberculosis, i když je v biologickém materiálu pouze několik mikroorganismů.
7. Je dobré provádět diagnózu recidivy onemocnění.

Přečtená PCR se zdá být téměř dokonalou diagnostickou metodou, která by měla mít podezření na tuberkulózu. Existují však i nevýhody, které je třeba vzít v úvahu.

Nevýhody PCR v diagnostice tuberkulózy

V naší době je taková diagnostika vzácnější než pravidelnost. A pro to je důvod.

1. Jedná se o nákladnou výzkumnou metodu. Na mnoha klinikách chybí vybavení pro PCR kvůli jeho vysokým nákladům, ale analýza může být stále prováděna v placených laboratořích.
2. Ihned po ošetření mohou být v lidském těle stále přítomny mrtvé mykobakterie nebo žijící v malých množstvích (výsledek bude pozitivní během diagnostiky PCR), takže metoda bude v této době nespolehlivá, nemá smysl ji provádět.
3. Výsledkem mutací mykobakterií je neúčinná PCR - nelze syntetizovat normální sekvenci řetězce DNA.
4. Je nutné zvolit správné prostředí pro studii, krev je odebírána pouze v případě, že je podezřelá z infekce (sepse), není třeba brát sputum, pokud existuje otázka tuberkulózy orgánů nervového systému. V tomto případě nebude PCR schopna detekovat patogen a diagnóza bude neinformativní.

Indikace pro detekci tuberkulózy pomocí PCR analýzy

PCR diagnostika tuberkulózy se provádí nejčastěji v kontroverzních případech. Kdy lékaři tuto studii doporučují?

1. Pokud je obtížné provést diagnózu obvyklými dostupnými metodami, byl kontakt s pacientem s tuberkulózou.
2. V případě, že osoba nemůže být doručena na kliniku, aby podstoupila rutinní rutinní testy na tuberkulózu, je snazší jej vyšetřit pomocí PCR, protože sputum pro test může být dodáno do nádoby a diagnóza je potvrzena během několika hodin.
3. Pokud má člověk nouzovou operaci a je naléhavé zjistit, zda je nemocný tuberkulózou.
4. Pokud je to nutné, těhotná žena je také lepší vyšetřit na tuberkulózu pomocí PCR, protože metoda je bezpečná.
5. Každý, kdo nebyl diagnostikován tuberkulózou, byl na základě placení potvrzen bakteriologickými metodami a fluoroskopií. To se děje, když je léze v plicích nepostřehnutelná v přímém obraze, a osoba, která během studie dodala sputum, nemohla dodržovat doporučení pro správný sběr materiálu. V tomto případě se člověk obává všech příznaků charakteristických pro plicní tuberkulózu.
6. Když existují pochybnosti o výsledcích testu Mantoux.
7. Je vhodnější provést PCR diagnostiku tuberkulózy u dětí. Tento postup je bezpečný, nevytváří další ozáření a je účinný při detekci obtížně diagnostikovatelných forem onemocnění.

Včasná diagnóza tuberkulózy je klíčem k řádně předepsané léčbě a snížení šíření nemoci. Často známé metody detekce onemocnění nejsou vždy účinné. Proto je dnes PCR jednou z nejspolehlivějších a nejbezpečnějších způsobů detekce infekce v raných fázích jejího vývoje.