Specifická infekce tuberkulózy byla přítomna v lidských tkáních a strukturách po mnoho let a za určitých okolností se rychle šíří po celém těle za 2-3 měsíce. Někdy je nejvhodnější zvolit nejlepší léčbu z důvodu pozdní diagnózy a adaptace patogenu na mnoho léčiv.
Poslední PCR diagnostika tuberkulózy pomáhá odhalit nejenom vzniklé onemocnění, ale i samotný patogen, když se dosud neobjevily první známky onemocnění.
Co je to PCR?
Nedávno se objevila diagnostika tuberkulózy pomocí PCR. V roce 1983, mikrobiolog z Ameriky, Cary Mullis, vynalezl postup, kterým by mikroorganismy mohly být rekonstruovány z biologického materiálu v krátkém segmentu. Tato práce získala Nobelovu cenu.
PCR pro tuberkulózu je proces polymerního řetězce, ve kterém je diagnostika a detekce virových patogenů genetickým inženýrstvím. Tato technika se používá v imunologických, mikrobiologických, virologických a biochemických laboratořích.
Univerzální metoda pomáhá lékařům diagnostikovat a identifikovat infekční proces i po prvních hodinách infekce, dlouho před nástupem příznaků. Výzkum je možný i s malým množstvím biomateriálu.
Co je potřeba pro analýzu?
- Několik segmentů DNA (primery), se kterými začíná biologická syntéza;
- Nukleotidové sloučeniny, základ molekuly DNA nebo RNA;
- Enzym polymerázy, který urychluje PCR analýzu.
Jaký je základ metody?
Za prvé, segment DNA je extrahován z biomateriálu z infikované osoby za použití metod genově-molekulární biosyntézy, dále je určen typ mikroorganismů, ke kterým biofragment patří.
Tato složitá reakce trvá méně času než některé biometody. PCR určuje patogen za několik hodin, zatímco není třeba jej izolovat od biologické tekutiny (sputum, cerebrospinál nebo krevní médium), není nutné ji dlouho pěstovat na živném médiu. Stačí, když studovaný materiál obsahuje DNA vlákno infekčního patogenu.
Při provádění PCR krevního testu na tuberkulózu in vitro je uměle vytvořena syntéza ribonukleových kyselin mycobacterium tuberculosis.
Fáze diagnostiky
Molekulární reakce pomocí PCR je jednoduchý postup, který trvá málo času. Vybere se požadovaný biomateriál: krev, sputum, promývací kapalina pro průdušky se použijí ke stanovení tbc.
- Za prvé, primární forma DNA je zničena, 2 řetězce jsou odděleny při vysoké teplotě (maximálně 98 ° C po dobu ne delší než 2 minuty);
- Pak se provede žíhání, primární teplota se sníží několika děleními, řetězec DNA se naváže na primer;
- Další stupeň se nazývá elongace s biosyntézou nezbytných molekulárních struktur.
Pro získání požadovaného počtu kopií DNA musí projít 25 až 30 takových cyklů a výsledný počet mykobakterií je snadno rozpoznatelný.
Je nutné provést PCR pro tuberkulózu?
Přímo všem pacientům s podezřením na TVC se nedělá diagnostika řetězce, protože postup vyžaduje použití drahého vybavení. Ne všechny zdravotnické instituce umožňují jeho nákup, zejména proto, že obvyklé metody diagnostiky mycobacterium tuberculosis jsou také informativní.
- Pečlivá anamnéza, dotazování pacienta;
- Externí zkouška;
- Tuberkulinový test Mantoux;
- Radiografické nebo fluorografické vyšetření;
- V případě potřeby počítačová diagnostika;
- Mikroskopické nebo bakteriologické vyšetření masky pomocí sputa.
PCR pro tuberkulózu se provádí pouze tehdy, když není možné provést jinou instrumentální analýzu nebo za okolností, které je obtížné diagnostikovat.
Přestože bylo vynalezeno velké množství diagnostických metod, stále roste počet pacientů s tuberkulózou. Navíc incidence získala některé rysy: často je pozorována závažná forma onemocnění, zvyšuje se počet úmrtí, patogen se stává rezistentním vůči existujícím chemoterapeutikům.
Mnoho lidí nechce každoročně podstoupit rutinní inspekci, odmítnout očkování, což vede ke zvýšení incidence. Tyto okolnosti vyžadují účinné a informativní výzkumné metody dostupné pro dospělé a děti diagnostikované tbc. PCR má výhody oproti jiným diagnostickým metodám.
Jaká je hodnota metody?
Tento nejnovější výzkum se osvědčil. Pokud je z mnoha důvodů obtížné stanovit diagnózu nebo v některých sporných případech PCR detekuje tuberkulární bacilus snadněji v biologickém materiálu než jiné metody.
- Tato rychlá studie, malý segment molekuly umožňuje provést přesnou diagnózu v krátkém čase přibližně za 5 hodin, což se používá v naléhavých případech, například před urgentním chirurgickým zákrokem;
- Krevní test na tuberkulózu je možný, pokud jsou jiné metody nedostupné nebo kontraindikované - někdy pro detekci patogenu tbc, musí být odebráno mnoho Rg-snímků, přičemž dávka záření je příliš velká;
- Použitím polymerázové reakce mohou být vyšetřeny biologické tekutiny na přítomnost mykobakterií. Můžete například provést studii mozkomíšního moku s tuberkulózní meningitidou nebo močí s urogenitální tuberkulózou;
- Metoda je bezpečná, diagnostika tuberkulózy u dětí pomocí PCR nezpůsobuje potíže;
- Způsob polymerní reakce odhaluje bacil tuberkulózy v jakékoliv formě a stadiu onemocnění;
- Přítomnost pouze několika bakterií v biomateriálu umožňuje vidět přítomnost mikroorganismů, protože se jedná o citlivou reakci;
- PCR snadno diagnostikuje opakování onemocnění.
Navzdory velkému množství výhod se neuskutečňují všichni pacienti s podezřením na studii tbc, protože existují i nevýhody, které jsou také zohledněny.
Video
Video - časná diagnostika
Jaké jsou nevýhody?
Tato metoda diagnózy je spíše výjimečná než přirozená, proto existují důvody. Nejprve se berou v úvahu vysoké náklady na metodu. Zařízení je drahé, kliniky nemají možnost si ho koupit kvůli vysoké ceně, ale většina placených laboratoří má vybavení, které je analyzováno.
- Metoda detekuje mrtvé bakterie, které zemřely po léčbě, zatímco PCR vykazuje pozitivní výsledek. Bezprostředně po chemoterapii nemá smysl provádět studii, protože výsledek bude nespolehlivý;
- Mutace Mycobacterium tuberculosis jsou citlivé, což vede k neefektivnosti metody a řetězec DNA nemůže být syntetizován konzistentně.
Prostředí pro studii by mělo být pečlivě vybráno, krev nebo moč mohou být odebírány pouze v případě podezření na infekci. Při podezření na kostní tuberkulózu by se nemělo užívat sputum. V této situaci bude diagnóza nesprávná.
Krev a moč u pacienta s tuberkulózou, který má být studován na PCR, je zřídka užíván, identifikace onemocnění tímto způsobem je sporná. V těchto biologických prostředích je patogen stanoven pouze v sepse nebo v případě diseminované tuberkulózy. Nejčastější jsou lokální formy, jejich krev a moč mohou zůstat nezměněny. Nejčastěji je hlen vyšetřován.
Kdo ukazuje analýzu?
Většina pacientů je zaslána na PCR diagnostiku v kontroverzních a obtížných případech tuberkulózy. Kdy zdravotníci vydávají doporučení pro výzkum?
- Pokud existuje kontakt s osobou, která byla spolehlivě diagnostikována tuberkulózou, je obtížné ji diagnostikovat běžnými metodami;
- Za těchto okolností, pokud pacient poskytne kliniku je nemožné pro radiografii nebo jiný výzkum. V takové situaci je snazší jej zkontrolovat polymerní metodou. Analýza sputum je jednoduše dodána do laboratoře ve speciální nádobě a výsledek je znám po několika hodinách;
- Před operací je naléhavě nutné určit, zda je pacient nemocný tuberkulózou, v tomto případě je indikována PCR;
- Vzhledem k bezpečnosti metody je možné provést průzkum těhotné ženy nebo dítěte, aniž by vzniklo další rentgenové zatížení;
- Pochybné výsledky testu Mantoux.
Každý, kdo chce, může být vyšetřen za poplatek, pokud tuberkulóza nebyla potvrzena pomocí bakteriologie a fluoroskopie. To se děje, pokud je léze v plicní tkáni v přímém zobrazení neviditelná v Rg-obraze a pacient není schopen správně zachytit sputum, ale známky lidské tuberkulózy jsou narušeny.
Moderní PCR reakce na diagnózu je klíčem k úspěšné léčbě, v důsledku čehož se prevalence onemocnění snižuje. Tradiční metody identifikace onemocnění nevedou vždy k požadovanému účinku.
PCR analýza se tak stala jednou ze spolehlivých a bezpečných metod diagnózy v raných stadiích onemocnění.
PCR analýza tuberkulózy
PCR analýza tuberkulózy je nejoblíbenější mezi lékařským výzkumem v této oblasti.
Ale jak varovat sebe a své blízké z této hrozné nemoci? Jak složit potřebné testy pro PCR?
Příznaky tuberkulózy a její prevence
Odborníci říkají, že asi 30% z celkové populace trpí tuberkulózou.
Nejvyšší procento této choroby se vyvíjí v nerozvinutých zemích. K tomu nejčastěji dochází v důsledku snížené imunity u lidí.
Nemoc je jednou z nejstarších. Tato choroba se nachází ve sliznici mozku, v zažívacím traktu, na kloubech a páteři, v močovém systému av malých oblastech na lidské kůži.
Odborníci nejsnadněji určují postiženou kůži. Na místě jsou malé plomby, které se časem zvětšují, vybuchují bělavou kapalinou.
Kauzální původce tuberkulózy může být nejčastěji zachycen, když mluví s nemocnou osobou, když kašle nebo kýchá. Obvykle onemocnění postupuje bez symptomů nebo má otevřenou formu, ale PCR diagnostika tuberkulózy umožňuje jeho detekci v raných stadiích i v nouzových případech.
Symptomy onemocnění: prodloužený mokrý kašel, horečka, zimnice, nadměrné pocení v noci, prudká ztráta hmotnosti, pocit únavy a slabosti.
Otevřená forma onemocnění je nejnebezpečnější. Člověk trpící tuberkulózou je schopen infikovat zdravé lidi.
Nejdůležitějším příznakem plicního onemocnění je hemoptýza. Vyskytuje se v jakékoliv formě onemocnění.
V některých situacích to může vést k krvácení z plic osoby. Je to velmi nebezpečné a vyžaduje urgentní lékařský zásah.
Pro prevenci a rozpoznávání tuberkulózy odborníci předepisují: vzorek - tuberkulinový test, vyšetření biologického materiálu, fluorografii, rentgenové snímky a krevní test, sputum nebo sliny.
Diagnóza onemocnění
Zlepšení diagnostiky onemocnění - to je správné a během léčby. Ve většině případů obvyklé metody detekce patogenů nemají vždy účinek a jsou již zastaralé.
Nejdůležitějším způsobem, jak identifikovat a diagnostikovat plicní onemocnění, jsou lékařské vyšetření. Obvykle používejte PCR diagnostiku. Tento průzkum byl nedávno objeven v roce 1983 americkým biochemikem Mullisem.
Test u pacienta s plicní tuberkulózou se provádí výhradně ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo je nemožné detekovat onemocnění instrumentálním způsobem.
Polymerázová řetězová reakce je spolehlivá metoda PCR. Tato analýza umožňuje určit původce toho, kolik je v krvi, moči a tekutinách míchy. Taková lékařská prohlídka je nejbezpečnější.
PCR analýza dává 100% výsledek.
Má vysokou citlivost, která pomáhá rozpoznat onemocnění poprvé po infekci, než se objeví příznaky onemocnění. Tato metoda analýzy poskytuje výsledek během několika hodin po dodání biologického materiálu. Výsev této analýzy se provádí třikrát, ale odsávání nemocného žaludku se provádí pouze v nemocnici.
Pro stanovení výsledků byla vyvinuta tři kritéria: vysoká přesnost, citlivost až 90%, specificita.
V některých případech se používá test na PCR:
- diagnostikovat plicní tuberkulózu;
- určit zdroj choroby;
- definice extrapulmonální lokalizace;
- diagnóza opakování.
Vyhodnotit výsledek a předepsat správné lékařské ošetření, může pouze odborník. Je velmi důležité přiřadit správné schéma léčby pro detekci tuberkulózy, je nezbytné provést test citlivosti patogenu na zařízení proti tuberkulóze.
Různé lékařské testy tuberkulózy
Potřebnou analýzu můžete provést dvěma způsoby: odebrat krev člověku nebo slině nebo vzít sputum.
Krevní testy PCR mohou být dvou typů: ELISA a PCR. Taková studie pomáhá monitorovat účinnost léčby.
ELISA pomáhá najít protilátky v lidském těle, které odolávají mikrobům tuberkulózy. Tato studie se provádí jednou denně. Hlavní nevýhodou je nízká citlivost, která umožňuje stanovit pouze onemocnění s nízkou úrovní infekce.
Nejoblíbenějším a nejúčinnějším výzkumem je analýza mycobacterium tuberculosis. S ní mohou lékaři snadno najít DNA bakterií v lidské krvi. Tato metoda se také používá k určení počtu bakterií, ke kontrole léčby pacienta, k detekci časné recidivy.
PCR slin je jednou z nejmodernějších výzkumných metod. Taková analýza pomůže identifikovat infekční bakterie ve slinách. Použitím PCR se zvyšuje počet fragmentů DNA škodlivých mikrobů.
Metoda kultivace je určena pro vyšetření lidského sputa pro detekci mikrobakterií.
Příprava na PCR testování
Pozor, pro PCR potřebujete správnou přípravu slin. Pokud nebudou dodrženy všechny předpisy, může být analýza falešně pozitivní.
Před zahájením zkoušky je zakázáno kouřit, užívat jídlo a léky, stejně jako konzumovat alkohol po dobu 12 hodin. Je zakázáno čistit si zuby, nemůžete používat oplachovací prostředek, osvěžovač úst a dentální nit.
Je zakázáno používat rtěnku a vstupovat do intimních vztahů. Dovoleno opláchnout ústa hladkou převařenou vodou;
Toto vyšetření pomůže určit: herpes, chlamydia, tuberkulózu, patogeny pneumonie, onkoviry, barolleózu, mononukleózu, HIV, hepatitidu všeho druhu, zarděnku.
Analýza mykobakterií se provádí převážně v kontroverzních případech, zejména pokud je obtížné stanovit diagnózu nebo před zahájením operace došlo ke kontaktu s pacientem s tuberkulózou, aby se zjistila choroba. Používá se k vyšetření těhotné ženy, protože tato metoda je pro matku a plod nejbezpečnější.
Někdy se analýza provádí na soukromé klinice, protože pacient nedodržoval pravidla pro testování, ale zároveň se obává všech symptomů. Analýzu lze provést, když odborníci po provedení testu Mantoux neví, nebo je-li dítě dítě.
Výhody a nevýhody lékařských testů pro stanovení tuberkulózy
PCR je nejoblíbenější a nejúčinnější způsob, jak zjistit nemoc.
Jeho největší rozdíl od jiných studií je rychlý a přesný výsledek.
Výhodou tohoto lékařského vyšetření je, že může být prováděna pro urologické, gynekologické, onkologické, infekční, hematologické, plicní, gastroenterologické a další studie.
Hlavní výhodou takové lékařské studie je, že krevní testy, sputum a sliny jsou připraveny v krátkém čase (detekce onemocnění trvá 5 hodin). Takové lékařské vyšetření umožňuje provádět testy, pokud jsou některé metody studia nemoci zakázány nebo nepřístupné. Skvělé pro detekci recidivy u lidí.
Díky této analýze bylo možné provádět výzkum pro jakékoliv biologické prostředí. Je povoleno odebírat materiál od dětí. PCR umožňuje identifikovat původce v jakémkoliv stadiu onemocnění. Vzhledem ke své vysoké citlivosti lze nalézt mikroby i v případě, že je přítomno jen několik bakterií.
Metoda PCR rozšiřuje své možnosti. Používá se také k určení otcovství, k výrobě nových genů, mutací, křížení prvků DNA a podobně.
Nevýhody této studie jsou drahá metoda průzkumu.
Po lékařském ošetření může krevní test prokázat přítomnost živých nebo mrtvých patogenů v malých množstvích, po lékařském vyšetření poskytne pozitivní výsledek.
Bakterie a mikroby mohou podstoupit mutaci, po které PCR nebude schopna je identifikovat a identifikovat, proto pouze odborník může předepsat studium požadovaného prostředí, jinak bude takové vyšetření neúčinné.
Po testování je negativní výsledek, ale to nevylučuje možnost infikování osoby tuberkulózou. Takové lékařské vyšetření se provádí u pacientů se závažným plicním onemocněním, kdy jiné studie neposkytují přesné výsledky. PCR bude užitečná pro osoby s plicní a extrapulmonální tuberkulózou.
Bohužel zdravotnické prostředky pro detekci patogenů tuberkulózy jsou velmi drahé.
Veřejné nemocnice a kliniky si to nemohou dovolit, ale placené kliniky provádějí pacientské testy a v krátké době poskytují hotové výsledky.
PCR diagnostika tuberkulózy u dětí a dospělých
Moderní diagnostické metody (pcr, diaskintest, kvantiferon test) jsou vysoce účinné, ale v praxi nebyly studie ověřeny. Tuberkulinová diagnóza byla základem pro identifikaci infikovaných a nemocných lidí.
Metoda umožnila identifikovat mnoho nemocných lidí, snížit statistiku nemocnosti, úmrtnosti.
Výsev mikroskopie mykobakterií a sputa podle Zill-Nelson vám umožňuje spolehlivě diagnostikovat infekci. Problém způsobuje přesné odběr sputa přímo z postiženého průdušky. Na pozadí tuberkulózního procesu je ovlivněna významná část průduškového stromu. Po naočkování bakterií je možné provést test citlivosti patogenu na antibiotikum.
Po analýze výsledku diagnostiky fiatizistami bylo jasné, že nedostatek vylučování Kochových tyčinek neznamená, že v těle není infekce. Kauzativní agens lze stanovit po druhém, třetím, čtvrtém odebíraném materiálu.
Moderní diagnostické metody (dst, Quantiferonův test) detekují mykobakterie s aktivním průběhem onemocnění. V přítomnosti mykobakterií uvnitř lymfatických uzlin, s extrapulmonálními formami onemocnění, jsou testy nejčastěji negativní.
Včasná diagnóza je základem prevence závažných komplikací a nebezpečných následků onemocnění.
Moderní metody
Náhrada klasické tuberkulínové diagnózy je diaskintest (dst). Podle nejnovějších předpisů by studie měla nahradit standardní Mantoux test, který umožnil identifikovat mnoho případů morbidity a infekce mezi obyvatelstvem.
Podstata Diaskintestu, stejně jako diagnostika tuberkulinu, zahrnuje subkutánní podání proteinů patogenů tuberkulózy. Reakcí na injekci je reakce přecitlivělosti se specifickými změnami kůže: zarudnutí, indurace, tvorba puchýřů.
Pozitivní výsledek Diaskintestu je typický pro pacienty s aktivním průběhem onemocnění. V případě infekce nebo zvýšené alergie bude studie negativní. Negativní účinek dst může být výsledkem silné imunity, ale když je člověk infikován.
Ve srovnání s Mantu je Diaskintest všestrannějším a citlivějším způsobem diagnostiky tuberkulózy. Absence detekce infekce vyžaduje jeho použití současně s tuberkulínovou diagnózou.
Navzdory výsledkům klinických studií dst, vědci argumentují o obecné univerzálnosti a citlivosti metody, studie nemůže být považována za univerzální diagnostické řešení.
Test byl vyvinut akademiky z Sechenov Research Institute. Absence alergií při použití diaskintestu se vysvětluje subkutánním podáváním druhově specifických proteinů tuberkulózy. Po jejich zavedení je určeno kožní reakcí ve formě zarudnutí, tuleňů.
Co je kvantiferon test
Test kvantifikátoru se vyhodnocuje po odebrání pacientovy krve. Mechanismus postupu je stanovení gama-interferonu, který je uvolňován T-lymfocyty po setkání s mycobacteria tuberculosis. Testy určují tuberkulární proteiny, které obsahují nejen lidské a hovězí bakterie. Test kvantifikátoru lze také použít k diagnostice mykobakterií způsobených jinými mykobakteriemi, které tvoří specifické změny na rentgenovém snímku. Výsledek testu se stanoví v několika zkumavkách, což zvyšuje diagnostickou citlivost metody.
PCR pro diagnostiku tuberkulózy u dětí
Polymerázová řetězová reakce je přesná, ale nákladná metoda pro diagnostiku tuberkulózy. PCR se provádí po bronchoskopii.
Po obdržení negativních výsledků je racionální provádět polymerázovou řetězovou reakci. Výsledky jsou hodnoceny po trojnásobné kultivaci sputu Mycobacterium tuberculosis. Za nejpříznivějších podmínek znamená identifikace patogenu infekci. Účel chemoprofylaxe zabraňuje aktivnímu tuberkulóznímu procesu v přítomnosti Kochových tyčinek.
Po obdržení kmene mikroorganismu je možné naočkování na antibiotickou citlivost. Stanovení antibiotik, které mohou usmrcovat mikroorganismy, nám umožňuje vyhodnotit, které léky k léčbě infekce.
PCR u dětí se provádí s negativními výsledky výsevu, ale v případě otočení tuberkulinového testu, vizualizace rentgenových příznaků infekce, detekce klinických příznaků současné infekce.
Polymerázová řetězová reakce poskytuje vysokou přesnost (asi 99%). Metoda je založena na amplifikaci nukleové kyseliny. Mykobakterie, viry a další mikroorganismy mají jedinečné nukleotidové sekvence. Jejich diagnóza umožňuje identifikovat původce onemocnění.
Citlivost PCR u dětí je nižší než u dospělých. V praxi byly odhaleny následující rysy polymerázové řetězové reakce u dítěte:
- Specifičnost - 80-100%;
- Citlivost - 25-80%.
Navzdory vysoké přesnosti metody, získání negativního výsledku neznamená absenci tuberkulózy u dětí. Racionálnější využití metody u pacientů se stavy imunodeficience. V diagnostice extrapulmonální tuberkulózy.
Interpretační chyby jsou určeny porušením sběru a přípravy materiálu pro studii.
Důvody pro negativní výsledek PCR v diagnostice tuberkulózy
Šíření mykobakterií v organismu lymfatickými (přes lymfatické cévy) a hematogenní (skrze krevní oběh) zajišťuje kolonizaci mnoha tkání, výskyt extrapulmonálních ohnisek infekce.
Při rentgenovém stanovení ložisek destrukce (destrukce) v plicích není potřeba PCR. U dospělých, s použitím radiografie, je možné identifikovat pokročilé formy s vysokým stupněm důvěry.
U dětí se studie PCR používá častěji díky latentní lokalizaci mykobakterií uvnitř lymfatických uzlin, což vede k negativním výsledkům při použití jiných diagnostických metod. S bakteriální kulturou stačí detekovat asi 10 mikroorganismů. Je třeba mít na paměti, že ne každý je zodpovědný za aktivní plicní tuberkulózu.
Pro správnou diagnózu PCR, očkování bakterií, by měly být dodrženy požadavky DST:
- Materiál skladujte ve sterilních zkumavkách;
- Eliminovat vstup jiných bakterií;
- Při přepravě dodržujte osobní hygienu, aby nedošlo k pádu biomateriálu na tělo, obličej a dýchací cesty.
Uchovávaná krev spolu s konzervační EDTA. Existují jedinečné rysy přípravy materiálu pro každou laboratorní analýzu, se kterou jsou odborníci seznámeni.
Inovativní diagnostické metody
Včasná detekce infekce umožňuje včasnou chemoprofylaxi, aby se zabránilo závažnému onemocnění.
Vymazání kliniky v dětství, nedostatečné výsledky testů, negramotná interpretace hodnocení vzorků neumožňuje včasné ověření infekce. K prevenci morbidity kojenců je nutná pečlivá analýza výsledků s možností stanovení diagnózy v raném stadiu.
Moderní metoda laboratorní diagnostiky tuberkulózy u dětí - detekce TAB-TM
Reakce na stanovení markeru T-buněk u dětí nazývaných „TAB-TM“ se vyznačuje vysokou citlivostí. Podstata metody spočívá v identifikaci určitého klastru diferenciace (CD-27) lokalizovaného na povrchu T-lymfocytů. Po izolaci tohoto faktoru jsou cytokiny barveny cytometrií.
Metoda byla popsána v literatuře od roku 2014. Výsledky pozorování ukazují vysokou citlivost metody. Stanovení TAB-TM je expresní metoda pro diagnostiku tuberkulózy vyšetření sputem.
Krevní test na tuberkulózu - což ukazuje
V počátečním stádiu se infekce tuberkulózy vyskytuje bez specifických klinických symptomů. Laboratorní diagnostika u dětí je možná, když se násobí Kochova hůlka.
Jaké buňky jsou hodnoceny v tuberkulózním procesu v laboratorním krevním testu:
- Červené krvinky jsou červené krvinky, které jsou zodpovědné za transport kyslíku do tkání. S lehkým průběhem plicní tuberkulózy ze strany červeného výhonku krve, nejsou žádné patologické změny. Přítomnost destruktivního zaměření přispívá ke krvácení s krevní anémií. Stav se vyvíjí s tuberkulózním zánětem střevní stěny. Počet retikulocytů na pozadí patologie se zvyšuje o více než 1%;
- Leukocyty se zvyšují s jakoukoliv infekcí. Leukocytóza je doprovázena posunem leukogramu doleva. Zvýšení počtu segmentovaných neutrofilů lze sledovat v počáteční fázi. U těžké tuberkulózy s hnisavou fúzí, stavy imunodeficience je pozorována leukopenie (snížení počtu krevních leukocytů). Současně zvyšuje obsah lymfocytů (nad 20%);
- Eosinofilie může být sledována až do počáteční fáze. K tomuto stavu dochází, když tuberkulózní infiltráty různých orgánů. Těžká tuberkulóza s rozpadem u dospělých vede k úplné absenci eozinofilů;
- Vylepšení bazofilu.
Laboratorní testy na tuberkulózu nejsou specifické pro děti ani pro dospělé. Tyto změny jsou charakteristické pro mnoho bakteriálních nebo virových infekcí.
Hemogramové indikátory poskytují zájem odborníkům na stanovení stupně infekce tuberkulózy.
Při aktivní infiltraci je možné vysledovat leukocytózu v důsledku zvýšení počtu neutrofilů. V buňkách se objevuje patologická drť, která indikuje otravu krve.
Centra rozpadu vedou ke snížení počtu eozinofilů, neutrofilů, mladých forem, lymfocytů. Při diseminaci dochází k absolutní monocytose. Na pozadí resorpce vzrůstá počet lymfocytů a eosinofilů.
Při konsolidaci center není hemogram charakterizován změnami.
Dětské testy na tuberkulózu: diagnostika tuberkulinu
Dlouhodobě fthiatrici uváděli Mantouxovou reakci. Takové testy na tuberkulózu umožnily detekovat nejen aktivní infekci, ale také infekci. Podstatou vzorku byla subkutánní injekce tuberkulínu - látky, která způsobila alergizaci organismu. Použitý materiál z těsta získaný z Micobacterium Bovis. Po subkutánní injekci se získá papule, která odráží odezvu těla na pronikání mykobakterií:
- Normální papule - velikost od 5 do 16 mm;
- V nepřítomnosti reakce - oslabení imunitního systému, absence mykobakterií;
- Velká papule - přítomnost bakteriálních antigenů, kontakt s nosičem tuberkulózních bacilů.
Metoda není považována za spolehlivou vzhledem k velkému počtu falešně pozitivních reakcí. Při pochybných výsledcích bylo nutné potvrzení PCR. S příchodem diaskintestu (dst) se situace změnila. Kombinované použití metod umožňuje získat spolehlivější výsledky.
Klasické "fytiologické" metody diagnostiky tuberkulózy
Lékaři pro diagnostiku tuberkulózy u dětí a dospělých používají následující testy:
- Studie anamnézy pacienta (kontakt s pacientem nebo nosičem tuberkulózního bacillu). Identifikace sociálních rizikových faktorů pomáhá naznačit možnou infekci;
- Posouzení citlivosti tuberkulínu (Mantoux test) s PPD tuberkulínem v dávce 5-10 TE. Vyhodnocení výsledku se provádí za 48-72 hodin;
- Rentgenové vyšetření se provádí u dětí a dospělých s podezřením na tuberkulózu, ohyb tuberkulínových testů;
- Bakteriologická kultura je nezvratným důkazem infekce způsobené Mycobacterium tuberculosis. Při správném odběru sputu, detekci patogenu v oplachu žaludku lze testy na tuberkulózu považovat za pozitivní. Kochova hůlka se nachází v hnisavých abscesech, lymfatických uzlinách, ascitickém výpotku, pleurálním exsudátu, moči, mozkomíšním moku;
- Rychlost sedimentace erytrocytů se zvyšuje s každou infekcí, včetně tuberkulózy;
- PCR umožňuje identifikovat specifický patogen, ale studie je drahá;
- Diaskintest určuje plicní tuberkulózu, ale často dává negativní výsledky v extrapulmonální lokalizaci infekce.
Moderní diagnostika tuberkulózy s využitím komplexu metod umožňuje stanovení mykobakterií v těle s vysokým stupněm spolehlivosti. Pomocí existujících metod je detekován aktivní proces nebo infekce. Potřebujeme jen čas, abychom kontaktovali odborníky!
PCR diagnostika tuberkulózy
Tuberkulóza je specifická infekce, její zaměření může být v lidských tkáních po celá léta a pak se šíří několik měsíců. Jedná se o chronické onemocnění, jehož optimální léčebné režimy je obtížné vybrat. Jedním z důvodů je pozdní diagnostika, kdy se mykobakterie, zatímco v lidském těle, již přizpůsobily mnoha lékům.
Jaké moderní metody diagnózy existují? PCR diagnostika - co to je? Jaký je tento výzkum? V jakých případech je tuberkulóza diagnostikována touto metodou a jaká je její podstata?
Co je to PCR diagnostika
Je to jedna z nejmodernějších metod diagnostiky nejen nemocí, ale také detekce biologického materiálu. PCR diagnostika byla vynalezena relativně nedávno. Asi před 30 lety v roce 1983, americký biochemik, Carey Banks Mullis, navrhl komplexní schéma obnovy biologického materiálu mikroorganismů v jednom krátkém segmentu. Díky jeho objevu získal vědec nejvyšší cenu - Nobelovu cenu.
Co je to - PCR diagnostika infekcí? Polymerázová řetězová reakce (PCR) je diagnóza detekce virových onemocnění, založená na metodách genetického inženýrství. Je široce používán v lékařské mikrobiologii, imunologii a virologii. Metoda je univerzální a pomáhá diagnostikovat malé množství materiálu. Infekce může být detekována doslova v prvních hodinách infekce, dlouho předtím, než se objeví první příznaky onemocnění.
Metoda spočívá v tom, že z materiálu od nemocného není získán samotný patogen, nýbrž fragmenty genomu (částice DNA), jeho biosyntéza s následným určením, do které třídy mikroorganismů získaný genetický materiál patří, pomocí molekulárně genetických metod.
Navzdory skutečnosti, že se jedná o komplexní proces, trvá mnohem méně času než mnoho biologických metod detekce infekčních agens. Během několika hodin lze pomocí PCR detekovat mikroorganismus. K tomu není nutné izolovat ji od prostředí (krev, mozkomíšní mok, sputum) a pěstovat ji po dlouhou dobu na umělých živných médiích. Stačí, když je ve studovaném materiálu přítomen malý fragment řetězce DNA infekčního činidla.
Základem reakce je možnost za umělých podmínek (in vitro) vytvořit syntézu molekul nukleové kyseliny infekčního agens.
Co je potřeba pro PCR?
- Primery jsou segmenty DNA, ze kterých začíná biosyntéza nebo tvorba.
- Nukleotidy nebo komplexní sloučeniny, které jsou základem molekuly DNA nebo RNA.
- Polymerázová řetězová reakce není možná bez přítomnosti polymerázy, což je enzym urychlující PCR.
Fáze diagnostiky PCR
Jak probíhá molekulární diagnostika pomocí PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátkou dobu s ohledem na sběr materiálu.
- Před zahájením studie si vezmou potřebný biologický materiál - to je voda z průdušek, krev, obsah žaludku, sputum. Typ biologického materiálu závisí na podezřelém patogenu.
- Denaturace nebo zničení primární struktury DNA, která se skládá ze dvou řetězců. Podstatou této fáze je oddělení dvou řetězců pod vlivem vysoké teploty (maximum je 98 ° C, které trvá ne déle než dvě minuty).
- V dalším stadiu PCR, zvaném annealing, se teplota sníží o několik stupňů, takže se primer naváže na DNA řetězec.
- Prodloužení, během kterého probíhá syntéza požadovaných molekul přímo.
Výsledkem je, že pouze 25–30 takových cyklů obdrží potřebný počet kopií DNA mikroorganismu, které lze snadno rozpoznat.
Vyžaduje PCR diagnózu tuberkulózy?
Není možné, aby všichni lidé s podezřením na tuberkulózu prováděli PCR, protože tento způsob vyžaduje drahé vybavení. Ne všechny veřejné kliniky si to mohou dovolit koupit. Navíc se tak stalo, že obvyklé metody diagnostiky infekce ve většině případů se také ospravedlňují.
Patří mezi ně:
- průzkum pacientů, historie;
- úplné vyšetření osoby;
- studie s použitím tuberkulinového testu Mantoux;
- radiografie nebo fluorografie;
- počítačová diagnostika v případě potřeby;
- metody mikrobiologického výzkumu: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetření sputa.
PCR pro tuberkulózu se provádí ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo není možné provádět jiné instrumentální metody.
I přes hojnost diagnostických metod stále roste výskyt tuberkulózy. V současné době nejde jen o jeho růst, ale i další funkce:
- onemocnění se často vyskytuje v těžké formě;
- počet smrtelných případů se zvyšuje;
- stále odolnější vůči moderní chemoterapii jsou diagnostikovány formy onemocnění.
Neochota samotných lidí každoročně podstoupit rutinní lékařská vyšetření, odmítnutí očkování vede k šíření tuberkulózy. V takových podmínkách potřebujeme rychlé, informativní a účinné výzkumné metody, které by měly být přístupné dětem i dospělým. Všechny výše uvedené diagnostické metody jsou mnohem horší než PCR.
Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocí PCR
Tento výzkum, i když nový, se osvědčil, zejména v kontroverzních případech, kdy není možné provést diagnózu z několika důvodů.
Díky PCR je mnohem snazší detekovat původce tuberkulózy v testovaném materiálu.
Výhody PCR diagnostiky jsou následující.
- Jedná se o rychlou analýzu. Malý fragment molekuly DNA může být použit k diagnostice během pouhých několika hodin (asi pět), která se úspěšně používá v nouzových situacích, kdy například před operací je nutné určit, zda je člověk nemocný tuberkulózou.
- PCR analýza je povolena v případě, kdy jsou jiné metody nedostupné nebo zakázané (pro detekci plicní tuberkulózy, někdy musíte vzít několik radiografických snímků, což bude velká dávka záření).
- Pomocí PCR se vyšetřuje biologické prostředí na přítomnost patogenu. Například můžete provést studii mozkomíšního moku, pokud existuje podezření na tuberkulózní meningitidu.
- Povolena PCR diagnostika infekčních onemocnění u dětí, protože metoda je bezpečná.
- Umožňuje identifikovat patogen v jakékoli fázi onemocnění.
- Vysoká citlivost PCR umožňuje detekci Mycobacterium tuberculosis, i když je v biologickém materiálu pouze několik mikroorganismů.
- Je dobré provádět diagnózu recidivy onemocnění.
Přečtená PCR se zdá být téměř dokonalou diagnostickou metodou, která by měla mít podezření na tuberkulózu. Existují však i nevýhody, které je třeba vzít v úvahu.
Nevýhody PCR v diagnostice tuberkulózy
V naší době je taková diagnostika vzácnější než pravidelnost. A pro to je důvod.
- Jedná se o nákladnou výzkumnou metodu. Na mnoha klinikách chybí vybavení pro PCR kvůli jeho vysokým nákladům, ale analýza může být stále prováděna v placených laboratořích.
- Ihned po ošetření mohou být v lidském těle stále přítomny mrtvé mykobakterie nebo žijící v malých množstvích (výsledek bude pozitivní během diagnostiky PCR), takže metoda bude v této době nespolehlivá, nemá smysl ji provádět.
- Výsledkem mutací mykobakterií je neúčinná PCR - nelze syntetizovat normální sekvenci řetězce DNA.
- Je nutné zvolit správné prostředí pro studii, krev je odebírána pouze v případě, že je podezřelá z infekce (sepse), není třeba brát sputum, pokud existuje otázka tuberkulózy orgánů nervového systému. V tomto případě nebude PCR schopna detekovat patogen a diagnóza bude neinformativní.
Indikace pro detekci tuberkulózy pomocí PCR analýzy
PCR diagnostika tuberkulózy se provádí nejčastěji v kontroverzních případech. Kdy lékaři tuto studii doporučují?
- Pokud je obtížné provést diagnózu obvyklými dostupnými metodami, byl kontakt s pacientem s tuberkulózou.
- V případě, že osoba nemůže být doručena na kliniku, aby podstoupila rutinní rutinní testy na tuberkulózu, je snazší jej vyšetřit pomocí PCR, protože sputum pro test může být dodáno do nádoby a diagnóza je potvrzena během několika hodin.
- Pokud má člověk nouzovou operaci a je naléhavé zjistit, zda je nemocný tuberkulózou.
- Pokud je to nutné, těhotná žena je také lepší vyšetřit na tuberkulózu pomocí PCR, protože metoda je bezpečná.
- Každý, kdo nebyl diagnostikován tuberkulózou, byl na základě placení potvrzen bakteriologickými metodami a fluoroskopií. To se děje, když je léze v plicích nepostřehnutelná v přímém obraze, a osoba, která během studie dodala sputum, nemohla dodržovat doporučení pro správný sběr materiálu. V tomto případě se člověk obává všech příznaků charakteristických pro plicní tuberkulózu.
- Když existují pochybnosti o výsledcích testu Mantoux.
- Je vhodnější provést PCR diagnostiku tuberkulózy u dětí. Tento postup je bezpečný, nevytváří další ozáření a je účinný při detekci obtížně diagnostikovatelných forem onemocnění.
Včasná diagnóza tuberkulózy je klíčem k řádně předepsané léčbě a snížení šíření nemoci. Často známé metody detekce onemocnění nejsou vždy účinné. Proto je dnes PCR jednou z nejspolehlivějších a nejbezpečnějších způsobů detekce infekce v raných fázích jejího vývoje.
PCR analýza (diagnóza) tuberkulózy
Tuberkulóza nebo konzumace - jedna z nejoblíbenějších infekčních chorob 21. století. Jeho patogeny jsou speciální mikrobakterie - Kochovy tyčinky.
Onemocnění se šíří nejen do plic, ale také do mozku, trávení, kloubů nebo páteře, močového systému a kůže.
Podle WHO trpí každý rok 10 milionů lidí tuberkulózou, z nichž 3 miliony jsou smrtelné.
Situace je obzvláště smutná na území zemí SNS, zde se periodicky vyskytují tuberkulózní epidemie. Rusko, Kazachstán, Ukrajina jsou vedeny smutným hodnocením šíření této infekce.
Infekce je snadno přenášena vzduchem rozptýlenými kapičkami nebo prostřednictvím trávicího systému, ovlivňuje životně důležité orgány a je také schopna se rychle přizpůsobit polymerním lékům a chemoterapii.
Jedním z hlavních faktorů úspěšné léčby tuberkulózy je včasná detekce infekce.
Diagnostické metody
Lidstvo vynalezlo mnoho metod pro rozpoznání nebezpečné nemoci. Diagnóza tuberkulózy je rozdělena na instrumentální a laboratorní.
V prvním případě, krevní test na tuberkulózu, stejně jako sputum, moč.
Druhou skupinou je studie používající rentgenové a endoskopické vyšetření. Instrumentální metody pro diagnostiku tuberkulózy jsou zase radiační a chirurgické.
Typy radiačních metod pro zjištění onemocnění
- Fluorografie je metoda diagnostiky nemoci známé každému obyvateli CIS. Pomocí rentgenových paprsků se vyšetřují plíce a lymfatické uzliny.
- X-ray hrudníku - podobný fluorografii, ale lepší způsob detekce infekce. Obraz je získán podrobněji a ve dvou projekcích, ale tento postup je asi šestkrát dražší. Obvykle se používá po vzniku vážného podezření na nemoc.
- Počítačová tomografie se provádí jako další diagnóza, která se také používá po dobrém důvodu přítomnosti infekce.
Chirurgické metody diagnózy zahrnují bronchiální endoskopii, stejně jako mediastinoskopii a torakoskopii.
První metodou je studium bronchiálního stromu plic pomocí „sondy“ v tomto orgánu. Zbývající dvě metody umožňují studovat pleurální část plic propíchnutím hrudníku.
Všechny tři metody jsou závažným chirurgickým zákrokem a nejčastěji se používají v procesu progrese onemocnění.
Laboratorní testy zahrnují:
- Analýza sputa pro tuberkulózní bacil.
- Mikroskopické vyšetření.
- PCR diagnostika tuberkulózy
Co je to PCR diagnostika?
Jednou z nejmodernějších metod laboratorní diagnostiky infekčních specialistů je polymerázová řetězová reakce.
Tato metoda byla vyvinuta slavným americkým vědcem Carrie Mullis v roce 1983, za kterou získal Nobelovu cenu.
PCR analýza je izolace částic DNA ze sputa, krve, mozkomíšního moku, výkalů atd. pro jejich následnou biosyntézu.
S pomocí komplexní molekulárně genetické studie se stanoví povaha mikrobů v těle pacienta.
Tento druh analýzy tuberkulózy se provádí v několika fázích:
- Nejprve se odeberou biologické vzorky. Materiály jsou umístěny ve speciálních nádobách a odeslány do laboratoře.
- Ve výzkumném centru jsou analýzy vyhřívány na 97 stupňů. To umožňuje zničit strukturu genomu DNA mikroorganismů, která se skládá z několika řetězců.
- Teplota je specificky snížena tak, že primery (účastníci DNA, ze kterých začíná proces biosyntézy) se mohou připojit k jakémukoliv řetězci deoxyribonukleové kyseliny.
- Poté se provede biosyntéza molekul potřebných pro detekci.
Po 25–30 opakovaných cyklech v laboratorním výzkumném procesu mají lékaři možnost rozpoznat, zda jsou v těle pacienta přítomny infekční mikroorganismy nebo ne.
Výhody a nevýhody
PCR pro tuberkulózu je nejmodernější diagnostickou technikou. Metoda umožňuje detekci infekce v jakékoliv fázi s vysokou spolehlivostí. Výhody:
- Rychlost - studium trvá déle než pět hodin. Výsledky testu na mikroby tuberkulózy lze nalézt do 24 hodin.
- Bezpečnost - PCR metoda nemá žádné věkové kontraindikace.
- Včasnost - tato technika umožňuje detekovat tuberkulózu v těch stadiích, kdy onemocnění nemá žádné příznaky.
- Vysoký stupeň přesnosti - pokud je v analýzách jen několik mikroorganismů, budou nalezeny pomocí polymerázové řetězové reakce. Tato technika také umožňuje snadno identifikovat původce tuberkulózy.
- Všestrannost - diagnostika se používá nejen pro detekci spotřeby, ale i pro další nemoci, jako jsou chlamydie, kapavka apod.
Navzdory mnoha výhodám je použití této techniky v domácí lékařské praxi spíše výjimkou než pravidlem. Existuje pro to několik důvodů.
Nevýhodami této metody jsou:
- Vysoké náklady na průzkum.
- Tato metoda není vhodná pro ty, kteří podstoupili léčbu, protože přítomnost mrtvých bakterií Koch může vést k falešně pozitivnímu výsledku.
- V případě mutace infekčních mikroorganismů nelze jejich genom rozpoznat falešným závěrem.
- Je důležité zvolit správné prostředí pro detekci. Například výsledek krevního testu pro PCR na tuberkulózu (vstup ředění) bude negativní, pokud je infikován nervový systém.
- Tuto metodu nelze vždy aplikovat na pacienty s diagnózou plicních lézí.
Navíc taková analýza tuberkulózy vyžaduje moderní vybavení, které nemá 90 procent nemocnic. V CIS takovou analýzu může provádět síť klinik Invitro.
Podmínky analýzy
Doporučení pro pacienty podrobující se takovému testu na tuberkulózu se liší v závislosti na typu provedené analýzy.
Při odběru krve pro PCR je nutné upustit od kouření hodinu před zákrokem, dvě hodiny - aby se vyloučily alkoholické a tučné potraviny.
Doporučuje se také vyhnout se fyzické námaze, je také nemožné vzít krev na tuberkulózu na prázdný žaludek.
Když vezmete tampon z úst a nosní dutiny, nemůžete jíst 2-4 hodiny před zákrokem, jinak to nebude informativní. Také nepijte alkohol.
Pro přesné měření je zakázáno kouřit dříve než hodinu před zákrokem. V předvečer se vyhněte kartáčování zubů a sprejů a ústních sprejů.
Pokud máte podezření na tuberkulózu urogenitálního systému, pacient po dobu 2-3 dnů před porodem by měl vyloučit pohlaví, 2-3 hodiny před zákrokem, nechodte na toaletu „malým způsobem“. Genitální orgány by měly být umývány čistou vodou bez speciálních prostředků.
Ženy se nedoporučují používat vaginální tablety, svíčky, kuličky a také se zdržet testování v kritických dnech.
5 dnů před porodem je výsledek nutný k ukončení zákroku kolposkopie a transvaginální ultrazvuk,
Kdy se používá PCR diagnostika?
Ne každá klinika má takovou komplexní diagnózu, ale lékaři se stále více uchylují k těmto metodám výzkumu. Obvykle se tento druh analýzy provádí ve zvláštních situacích.
- V případě pochybných výsledků manty lze použít krevní test na tuberkulózu.
- V případech, kdy byl pacient v kontaktu s infikovanou osobou, ale ošetřující lékař nemůže přesně určit diagnózu.
- V případě nouzové operace, kdy je nutné v krátké době zjistit, zda má pacient tuto infekci.
- Když je pacientka těhotná, když jiné výzkumné metody nejsou pro novorozence dostatečně bezpečné.
Je třeba poznamenat, že tato diagnóza je doporučena pro děti z důvodu její bezpečnosti.
Pokud má student kontraindikace proti tuberkulínovému testu, může namísto pláště provést PCR krevní test na tuberkulózu.
Co je to PCR analýza tuberkulózy
Inovativní metoda detekce mikroorganismů, kterou objevil vědec Cary Mullis na konci minulého století - analýza PCR. Za své spisy obdržel Nobelovu cenu. Tento proces se nazývá polymerázová řetězová reakce. Spočívá v obnově typu mikroorganismu v poskytnutém biomateriálu za použití krátkých fragmentů DNA. To vám umožní detekovat infekci v raném stádiu a okamžitě zahájit léčbu, aniž by to vedlo k závažným příznakům a komplikacím.
Co je to analýza
Diagnóza PCR je získat segmenty patogenní DNA z biologického materiálu a zarovnat je ve správném řetězci. To umožňuje identifikaci mikroorganismu, ke kterému buňky patří.
Postup se provádí ve třech fázích:
- Sběr biologického materiálu.
- Identifikace a vyrovnání DNA.
- Rozpoznání infekce.
Tato studie vyžaduje speciální zdravotnické vybavení - zesilovač. Je vybaven kamerou, kde studovaný materiál interaguje s vysokoteplotními a chemickými enzymy. Na výstupu má laboratorní technik dlouhý řetězec DNA původce, pokud je v lidském těle jeden.
Jak se připravit na diagnózu
PCR analýza je komplexní proces genetického inženýrství, který vyžaduje přesnost a závažnost jak laboratorních techniků, tak pacientů. Velkou roli ve správnosti výsledků analýzy hraje příprava na postup, tj. Správný sběr materiálu.
Hlavními zdroji informací o této nemoci jsou:
Mohou být použity i jiné možnosti, v případě potřeby jsou kapaliny odebírány pro analýzu z různých orgánů.
Pro pacienta existují určitá pravidla, která musí být dodržena před zákrokem. Je-li proveden krevní test, je zakázán po dobu 8 hodin před odběrem:
- jíst jídlo;
- kouřit;
- pití alkoholických nápojů;
- vezměte léky dovnitř.
Ve večerních hodinách, před odběrem sputa, je lék opilý, aby ho zředil a usnadnil vykašlávání. Ráno sbírejte materiál po důkladné hygieně ústní dutiny.
Moč se shromažďuje ve sterilní nádobě ráno na lačný žaludek, po mytí před užitím jakéhokoliv léku.
Pokud člověk bere antibiotika, měla by být analýza polymerázové řetězové reakce odložena, jinak není výsledek PCR spolehlivý. Sputum nebo krev by měly být darovány dva týdny po skončení léčby.
Jak postup identifikace bakterií
Stručně řečeno, procesem je izolovat část DNA. Použití moderních metod genetického inženýrství nám umožňuje určit typ mikroorganismu. Navíc materiál pro analýzu potřebuje malé množství.
Technicky je to velmi komplikovaný postup, ale trvá méně času než klasické bakteriologické studie. Patogeny nemusí být izolovány od biomateriálu, není nutné je pěstovat několik týdnů. V den porodu může pacient již znát výsledek své analýzy.
Celý proces PCR probíhá ve fázích:
- Probíhá práce s primární formou DNA, která je při vysoké teplotě blízké 100 stupňům rozdělena na dva řetězce.
- Teplota klesá, vlákna jsou spojena s fragmenty nukleové kyseliny - primerem.
- K prodloužení dochází - syntéza molekulární struktury.
Celé zasedání se skládá z asi třiceti takových postupů, opakování cyklu jako řetězové reakce. To je nezbytné pro vytvoření počtu buněk, ve kterých se výsledné bakterie stanou rozpoznatelnými.
Závěr studie
Popis výsledku PCR (polymerázová řetězová reakce) dává TB lékaři, je jednoduchý nebo nasazený. V prvním případě bude popis obsahovat pouze informaci o přítomnosti nebo nepřítomnosti Kochových tyčinek. Pokud je dekódování podrobně popsáno, můžete z něj zjistit rozsah onemocnění, jeho zaměření. Podle těchto kritérií je možné v každém případě stanovit nejvhodnější léčbu tuberkulózy.
Polymerázová analýza řetězové reakce nerozlišuje mezi živými a mrtvými patogeny a hovoří pouze o jejich přítomnosti. Proto je smysluplné absolvovat druhý test na tuberkulózu pouze 3-4 týdny po ukončení léčby předepsané lékařem.
Je-li výsledek pozitivní, je na závěr uveden nápis „Mycobacterium tuberculosis“. Pokud je negativní výsledek, vedle biologického názvu bakterií je značka "nezjistena". Analýzy mohou být falešně pozitivní. K tomu dochází jen zřídka - v případě porušení techniky provádění studií PCR nebo v přítomnosti neživotaschopných mikroorganismů. Konečný závěr o nemoci může učinit pouze lékař TB.
Výhody metody
PCR diagnostika tuberkulózy získala popularitu z mnoha důvodů. Má mnoho výhod, včetně:
- Přesnost výzkumu. Při analýze technologie je možné identifikovat bakterie, i když jsou přítomny v malých množstvích.
- Rychlý výsledek. Celý proces od sběru materiálu až po hotový závěr trvá přibližně 5 hodin. Ve srovnání s setím musí vyčkat až několik týdnů.
- Plná bezpečnost pro osobu, na rozdíl od fluorografie s radiací.
- Používá se jakýkoliv kapalný biomateriál. Pro realizaci PCR u plicní tuberkulózy poskytuje sputum nejpřesnější informace, u tuberkulózní meningitidy se odebírá vzorek z míchy. Krevní test pomáhá určit lokální ložiska infekce.
- Testuje se citlivost bakterií na antibiotika. To vám umožňuje předepsat správnou léčbu.
- Včasná diagnóza. O přítomnosti nemoci se můžete dozvědět před nástupem jejích příznaků.
Kromě pozitivních aspektů existují i nevýhody. Hlavní je cena. Analýza PCR není levná, což je spojeno s použitím drahých zařízení. Další nevýhodou je potřeba čekat na čas na opakovanou zkoušku po léčbě tuberkulózy. Výsledek testu je někdy falešně pozitivní. K tomu dochází v důsledku bakteriální mutace.
Je-li nutná PCR
PCR pro plicní tuberkulózu nemá žádné kontraindikace a je naprosto bezpečná. Proto existují určité situace a nemoci, kdy je to jediná možnost výzkumu.
Patří mezi ně:
- těhotenství;
- kontakt s tuberkulózním pacientem;
- obtíže při určování diagnózy plicního onemocnění;
- vyšetření před operací;
- alergická reakce;
- HIV infekce;
- mladého věku.
Metodu PCR můžete použít ve směru, který je vydáván ve fisisiologii, stejně jako pediatr, lékař nebo pulmonolog.
Co může nahradit PCR diagnostiku tuberkulózy
Jiné typy průzkumů se nestaly zastaralé, ale nadále se používají. Používají se v případech, kdy není možné provést PCR pro tuberkulózu. Moderní metoda navíc není ideální, někdy jsou její ukazatele zpochybňovány a vyžadují opětovné ověření.
Následující metody pomáhají určit přítomnost tuberkulózy u člověka:
- tuberkulínová diagnóza (Mantoux);
- fluorografie;
- zkoušení biologického materiálu pro flóru;
- rentgen plic.
Tyto studie jsou zdarma a dostupné všem. Ale mají své nevýhody:
- Test na tuberkulózu způsobuje alergie. Kontraindikován při kožních onemocněních.
- Rentgenové studie jsou doprovázeny ozařováním, které není použitelné pro děti, osoby s imunodeficiencí a těhotné ženy.
- Bakteriologické analýzy trvají mnohem déle, výsledek lze očekávat až měsíc.
Alternativy nejsou zárukou 100% správného závěru. Nejčastěji se používají pro preventivní účely. Diagnostika tuberkulózy pomocí PCR poskytuje nejspolehlivější informace. Je-li to možné, je lepší jej použít.
Zvláštnosti tuberkulózy u dětí a potřeba PCR
Dítě by mělo být zvláště chráněno před onemocněním - infekce tuberkulózy může způsobit vážnou újmu na těle s dosud zcela nevytvořenou imunitou.
Po vstupu do Kochovy hůlky do dětského organismu prochází vývoj nemoci následujícími fázemi:
- Latentní. Trvá až rok, aniž by se projevily jakékoli příznaky.
- Intoxikace. Ovlivňuje celkové zdraví. Objevuje se slabost, apatie, nedostatek chuti k jídlu, ospalost a snížený výkon. Trvale mírně zvýšená teplota.
- Primární forma onemocnění. Tuberkulóza je lokalizovaná, tvořící ohnisko nemoci. Dítě má kašel, dušnost, bolesti hlavy, oteklé lymfatické uzliny.
- Tuberkulární bronchoadenitida. Symptomy jsou bolest v lopatkách, kašel s různou výškou zvuku, sípání.
Obvykle se tuberkulin injektuje k identifikaci infekce pod kůží dítěte. Pokud je tento typ vyšetření kontraindikován, pak je PCR pro tuberkulózu nepostradatelnou volbou pro diagnostiku. Děti obvykle provádějí krevní testy, ale v případě potřeby se odebírá sputum. Při sebemenším podezření na přítomnost tuberkulózy se provádějí další studie, které zajistí pozitivní výsledek a okamžitě zahájí léčbu v raném stadiu, která zabrání rozvoji onemocnění.
Moderní výzkumné metody jsou vždy rychlejší a spolehlivější. Je škoda, že vzhledem k nákladnému vybavení k provádění takovýchto testů existuje možnost, že to není ve všech zdravotnických zařízeních a lokalitách. Jaký způsob provedení vyšetření obvykle volí lékař, ale pacient má právo si vybrat. Pokud jste museli provést PCR test, řekněte nám o tom v komentářích. Pokud byl článek pro vás užitečný, sdílejte jej v sociálních sítích - možná to pomůže přátelům.