PCR analýza pro diagnostiku tuberkulózy

Medicína nikdy nezůstane v klidu a pokrok ve zdravotnictví umožňuje diagnostikovat a léčit mnoho dříve nepostižených onemocnění. Existují také nemoci, které nelze zjistit vizuální kontrolou. Mezi nimi byla vždy tuberkulóza. Je to nebezpečné infekční onemocnění, které postihuje plíce, klouby a kosti a často vede k smrti i v našich dnech. Diagnostické metody pro toto onemocnění byly zlepšeny, což umožňuje detekci onemocnění v dřívějších stadiích, kdy je léčitelný. Mezi ně patří nejen rentgenové a Mantouxové testy, ale také PCR pro tuberkulózu.

Tuberkulóza - co to je

Dříve, tuberkulóza byla volána suchá nemoc nebo phisisis. Jedná se o bakteriální infekci, která nejčastěji postihuje plíce. Jeho extrapulmonální formy - tuberkulóza kostí a kloubů, tuberkulózní meningitida - jsou méně časté a pokročilejší stadia. Jako původce tohoto infekčního onemocnění se uvádějí mykobakterie. Tuberkulóza bacillus je také nazýván Koch hůlkou.

TBC infekce je velmi nakažlivá, přenáší se vzduchovými kapičkami při kašlání a kýchání pacienta. Jedinou ochranou proti tomuto onemocnění je včasná vakcína. Nechrání před infekcí, ale neumožňuje bacilům vstoupit do těla, aby způsobily tuberkulózu.

Formy tuberkulózy

K onemocnění může dojít jak v otevřené, tak v uzavřené formě. Rozdíly jsou následující:

• uzavřená tuberkulóza je asymptomatická. Za těchto okolností není Kochova hůlka ve sputu detekovatelná, proto není nakažený pro životní prostředí nebezpečný. Takový průběh nemoci obvykle neohrožuje nejinfikovanější, ale existují výjimky - v jednom případě deseti je uzavřená tuberkulóza schopna jít do otevřené formy;
• s otevřenou formou se mykobakterie, které způsobují tuberkulózu, nacházejí ve slinách a sputu pacienta. Infikovaný organismus představuje velké nebezpečí pro společnost i v izolaci. Zpravidla onemocnění postihuje plíce. Pokud není diagnostikována dříve, může mít jiné formy, jako je tuberkulóza kostí nebo kloubů.

Otevřená forma tuberkulózy je diagnostikována různými způsoby. Pacient podstoupí rentgen hrudníku nebo rentgen hrudníku, analýzy jeho biologického materiálu nebo kožního testu Mantoux. V poslední době se objevila další metoda, která je považována za stejně účinnou - analýzu polymerázové řetězové reakce (PCR).

Co znamená PCR

V lékařské praxi jsou již dlouho používány metody diagnostiky tohoto nebo tohoto onemocnění detekcí jeho DNA nebo RNA v lidském těle. To je přesně PCR pro tuberkulózu. Jedná se o vysoce přesnou analýzu krve nebo jiné biologické tekutiny, která vám umožní identifikovat bakterie s minimem jejich koncentrace ve vybraném materiálu, stačí jedna buňka. Studie se provádí za použití speciálního polymerázového enzymu.

Výhody metody

PCR je diagnostická metoda, která se ukázala na nejlepší straně, takže se používá poměrně často, a to jak v kombinaci s jinými metodami, tak nezávisle. Jeho výhody:

• nejkratší výrobní období. Studie se provádí rychle, asi za 5 hodin pomocí PCR může detekovat přítomnost bacil tuberkulózy v biologické tekutině pacienta. To platí zejména v případě, že potřebujete provést okamžitý chirurgický zákrok a předtím, než dostanete přesnou diagnózu;
• Stává se, že jiné diagnostické metody jsou pro pacienta kontraindikovány. Například, rentgenové paprsky mohou být dělány ne každý. Kromě toho, obraz není vždy možné provést diagnózu, zejména v případě, že nemoc je v rané fázi. Pomocí metody PCR je patogen okamžitě detekován;
• Pro analýzu je vhodná biologická tekutina pacienta. PCR urine a slin pro tuberkulózu se provádí k identifikaci plicních a extrapulmonálních forem. Studie se také provádí za použití pacientovy míchy k detekci tuberkulózní meningitidy.
• Metoda je naprosto bezpečná. Chcete-li to provést, stačí od pacienta získat biologickou tekutinu. PCR diagnostika tuberkulózy u dětí je pohodlná a neškodná, protože rentgenové vyšetření je povoleno pouze ve věku 18 let a Mantouxův test někdy způsobuje nežádoucí účinky;
• PCR je vysoce citlivá analýza. To vám umožní identifikovat Koch tyčinky s minimální koncentrací mykobakterií;
• S pomocí speciálního polymerázového enzymu je onemocnění diagnostikováno v jakémkoliv stadiu, od raného do pokročilého;
• tento způsob je účinný při diagnostice recidivy onemocnění;
• Tato metoda je průlom v přesných diagnózách v raných stadiích onemocnění. To vám umožní zahájit léčbu v nejkratším možném čase a zničit patogeny, pokud ještě neměly nevratný negativní vliv na orgány a systémy lidského těla.

Kde provést PCR analýzu tuberkulózy

Ačkoliv je PCR analýza tuberkulózy vysoce účinnou metodou pro diagnostiku tohoto onemocnění, používá se jen zřídka samostatně. Jedná se zpravidla o další metodu detekce tuberkulózy, která se používá vzácně. Faktem je, že tato metoda je poměrně drahá.

Veřejné kliniky nemají možnost nakupovat speciální vybavení pro provádění analýzy PCR a vláda nevidí smysl financování tohoto článku, protože tuberkulóza může být diagnostikována jinými způsoby. Taková studie se nejčastěji provádí na soukromých klinikách, které si mohou dovolit zakoupit potřebné vybavení.

Nevýhody metody

Vysoká cena není jedinou nevýhodou PCR. Kromě vysokých nákladů má metoda další nevýhody a nedostatky, například:

• PCR pro tuberkulózu dává pozitivní výsledek i po ošetření, protože bere mrtvé buňky jako živé bakterie, proto tato metoda není vhodná jako kontrolní vyšetření pacienta k potvrzení jeho uzdravení;
• mutace tuberkulózy bacilli a jejich DNA je modifikována, což může ovlivnit spolehlivost výsledku;
• PCR krevní testy na tuberkulózu se provádějí zřídka, protože přítomnost Kochových tyčinek v těchto biologických tekutinách je velmi obtížné detekovat. To je možné pouze v posledním stadiu nebo v sepse. Obvykle je pacientova sputa odebírána pro diagnózu;

Stojí za zmínku, že nejpřesnějším výsledkem je právě sběr obsahu žaludku pacienta. Pokud je podezření na plicní tuberkulózu, kultura sputa bude nejúčinnějším způsobem diagnostiky onemocnění. Pokud má pacient extrapulmonální formu, pak v tomto bioenvironmentu nemusí být žádné bakterie. Pro stanovení tuberkulózy kostí, kloubů atd. Pomocí PCR je potřebná další biologická tekutina, například mícha.

Jak je PCR pro tuberkulózu

Jak bylo popsáno výše, podstatou PCR analýzy je detekce DNA patogenu v biologické tekutině pacienta polymerázovou reakcí. Hlavní fáze metody:

1. Odběr biologických materiálů. PCR není jen hemotest - studovaná biomasa může být sliny, moč, cerebrospinální tekutina, bronchiální mycí tekutina, obsah žaludku, sputum.
2. Poté je biomasa vystavena vysokým teplotám, aby se zničila struktura DNA patogenu.
3. Pak se teplota postupně snižuje a na zničený prvek DNA je navázán primer.
4. Podle výsledků molekulární syntézy, která trvá přibližně 30 cyklů, je detekován kmen určitých patogenních bakterií nebo jeho nepřítomnost.

Tato analýza vyžaduje dobré financování, takže PCR není prováděna velmi často. Tato metoda však není stejná, pokud jsou jiné diagnostické možnosti zakázány, nebo v případě nouze, kdy není čas čekat na výsledek.

Shrnutí

Na závěr můžeme vyvodit následující závěry:

• PCR je vysoce přesná analýza, která dokáže detekovat tuberkulózu několik dní po infekci;
• tato analýza je prováděna za 3,5 - 5 hodin, takže v případě, že návrh zákona jde do hodin, je nenahraditelný;
• je to bezpečná metoda, která nemá žádné vedlejší účinky;
• Používá se v případech, kdy jiné diagnostické metody vykazují nekonzistentní výsledky nebo je jejich použití kontraindikováno.

Nicméně, PCR je zřídka hotová, protože to je drahá analýza, která vyžaduje instalaci speciálního vybavení. Navíc není vždy informativní, takže odborníci používají tuto metodu detekce tuberkulózy jako další.

Výhody a nevýhody PCR (a) pro diagnostiku tuberkulózy

Specifická infekce tuberkulózy byla přítomna v lidských tkáních a strukturách po mnoho let a za určitých okolností se rychle šíří po celém těle za 2-3 měsíce. Někdy je nejvhodnější zvolit nejlepší léčbu z důvodu pozdní diagnózy a adaptace patogenu na mnoho léčiv.

Poslední PCR diagnostika tuberkulózy pomáhá odhalit nejenom vzniklé onemocnění, ale i samotný patogen, když se dosud neobjevily první známky onemocnění.

Co je to PCR?

Nedávno se objevila diagnostika tuberkulózy pomocí PCR. V roce 1983, mikrobiolog z Ameriky, Cary Mullis, vynalezl postup, kterým by mikroorganismy mohly být rekonstruovány z biologického materiálu v krátkém segmentu. Tato práce získala Nobelovu cenu.

PCR pro tuberkulózu je proces polymerního řetězce, ve kterém je diagnostika a detekce virových patogenů genetickým inženýrstvím. Tato technika se používá v imunologických, mikrobiologických, virologických a biochemických laboratořích.

Univerzální metoda pomáhá lékařům diagnostikovat a identifikovat infekční proces i po prvních hodinách infekce, dlouho před nástupem příznaků. Výzkum je možný i s malým množstvím biomateriálu.

Co je potřeba pro analýzu?

• Několik segmentů DNA (primery), se kterými začíná biologická syntéza;
• Nukleotidové sloučeniny, základ molekuly DNA nebo RNA;
• Enzym polymerázy, který urychluje PCR analýzu.

Jaký je základ metody?

Za prvé, segment DNA je extrahován z biomateriálu z infikované osoby za použití metod genově-molekulární biosyntézy, dále je určen typ mikroorganismů, ke kterým biofragment patří.

Tato složitá reakce trvá méně času než některé biometody. PCR určuje patogen za několik hodin, zatímco není třeba jej izolovat od biologické tekutiny (sputum, cerebrospinál nebo krevní médium), není nutné ji dlouho pěstovat na živném médiu. Stačí, když studovaný materiál obsahuje DNA vlákno infekčního patogenu.

Při provádění PCR krevního testu na tuberkulózu in vitro je uměle vytvořena syntéza ribonukleových kyselin mycobacterium tuberculosis.

Fáze diagnostiky

Molekulární reakce pomocí PCR je jednoduchý postup, který trvá málo času. Vybere se požadovaný biomateriál: krev, sputum, promývací kapalina pro průdušky se použijí ke stanovení tbc.

1. Za prvé, primární forma DNA je zničena, 2 řetězce jsou odděleny při vysoké teplotě (maximálně 98 ° C po dobu ne delší než 2 minuty);
2. Pak se provede žíhání, primární teplota se sníží několika děleními, řetězec DNA se naváže na primer;
3. Další stupeň se nazývá elongace s biosyntézou nezbytných molekulárních struktur.

Pro získání požadovaného počtu kopií DNA musí projít 25 až 30 takových cyklů a výsledný počet mykobakterií je snadno rozpoznatelný.

Je nutné provést PCR pro tuberkulózu?

Přímo všem pacientům s podezřením na TVC se nedělá diagnostika řetězce, protože postup vyžaduje použití drahého vybavení. Ne všechny zdravotnické instituce umožňují jeho nákup, zejména proto, že obvyklé metody diagnostiky mycobacterium tuberculosis jsou také informativní.

• Pečlivá anamnéza, dotazování pacienta;
• Externí zkouška;
• Tuberkulinový test Mantoux;
• Radiografické nebo fluorografické vyšetření;
• V případě potřeby počítačová diagnostika;
• Mikroskopické nebo bakteriologické vyšetření masky pomocí sputa.

PCR pro tuberkulózu se provádí pouze tehdy, když není možné provést jinou instrumentální analýzu nebo za okolností, které je obtížné diagnostikovat.

Přestože bylo vynalezeno velké množství diagnostických metod, stále roste počet pacientů s tuberkulózou. Navíc incidence získala některé rysy: často je pozorována závažná forma onemocnění, zvyšuje se počet úmrtí, patogen se stává rezistentním vůči existujícím chemoterapeutikům.

Mnoho lidí nechce každoročně podstoupit rutinní inspekci, odmítnout očkování, což vede ke zvýšení incidence. Tyto okolnosti vyžadují účinné a informativní výzkumné metody dostupné pro dospělé a děti diagnostikované tbc. PCR má výhody oproti jiným diagnostickým metodám.

Jaká je hodnota metody?

Tento nejnovější výzkum se osvědčil. Pokud je z mnoha důvodů obtížné stanovit diagnózu nebo v některých sporných případech PCR detekuje tuberkulární bacilus snadněji v biologickém materiálu než jiné metody.

• Tato rychlá studie, malý segment molekuly umožňuje provést přesnou diagnózu v krátkém čase přibližně za 5 hodin, což se používá v naléhavých případech, například před urgentním chirurgickým zákrokem;
• Krevní test na tuberkulózu je možný, pokud jsou jiné metody nedostupné nebo kontraindikované - někdy pro detekci patogenu tbc, musí být odebráno mnoho Rg-snímků, přičemž dávka záření je příliš velká;
• Použitím polymerázové reakce mohou být vyšetřeny biologické tekutiny na přítomnost mykobakterií. Můžete například provést studii mozkomíšního moku s tuberkulózní meningitidou nebo močí s urogenitální tuberkulózou;
• Metoda je bezpečná, diagnostika tuberkulózy u dětí pomocí PCR nezpůsobuje potíže;
• Způsob polymerní reakce odhaluje bacil tuberkulózy v jakékoliv formě a stadiu onemocnění;
• Přítomnost pouze několika bakterií v biomateriálu umožňuje vidět přítomnost mikroorganismů, protože se jedná o citlivou reakci;
• PCR snadno diagnostikuje opakování onemocnění.

Navzdory velkému množství výhod se neuskutečňují všichni pacienti s podezřením na studii tbc, protože existují i ​​nevýhody, které jsou také zohledněny.

Video

Video - časná diagnostika

Jaké jsou nevýhody?

Tato metoda diagnózy je spíše výjimečná než přirozená, proto existují důvody. Nejprve se berou v úvahu vysoké náklady na metodu. Zařízení je drahé, kliniky nemají možnost si ho koupit kvůli vysoké ceně, ale většina placených laboratoří má vybavení, které je analyzováno.

• Metoda detekuje mrtvé bakterie, které zemřely po léčbě, zatímco PCR vykazuje pozitivní výsledek. Bezprostředně po chemoterapii nemá smysl provádět studii, protože výsledek bude nespolehlivý;
• Mutace Mycobacterium tuberculosis jsou citlivé, což vede k neefektivnosti metody a řetězec DNA nemůže být syntetizován konzistentně.

Prostředí pro studii by mělo být pečlivě vybráno, krev nebo moč mohou být odebírány pouze v případě podezření na infekci. Při podezření na kostní tuberkulózu by se nemělo užívat sputum. V této situaci bude diagnóza nesprávná.

Krev a moč u pacienta s tuberkulózou, který má být studován na PCR, je zřídka užíván, identifikace onemocnění tímto způsobem je sporná. V těchto biologických prostředích je patogen stanoven pouze v sepse nebo v případě diseminované tuberkulózy. Nejčastější jsou lokální formy, jejich krev a moč mohou zůstat nezměněny. Nejčastěji je hlen vyšetřován.

Kdo ukazuje analýzu?

Většina pacientů je zaslána na PCR diagnostiku v kontroverzních a obtížných případech tuberkulózy. Kdy zdravotníci vydávají doporučení pro výzkum?

1. Pokud existuje kontakt s osobou, která byla spolehlivě diagnostikována tuberkulózou, je obtížné ji diagnostikovat běžnými metodami;
2. Za těchto okolností, pokud pacient poskytne kliniku je nemožné pro radiografii nebo jiný výzkum. V takové situaci je snazší jej zkontrolovat polymerní metodou. Analýza sputum je jednoduše dodána do laboratoře ve speciální nádobě a výsledek je znám po několika hodinách;
3. Před operací je naléhavě nutné určit, zda je pacient nemocný tuberkulózou, v tomto případě je indikována PCR;
4. Vzhledem k bezpečnosti metody je možné provést průzkum těhotné ženy nebo dítěte, aniž by vzniklo další rentgenové zatížení;
5. Pochybné výsledky testu Mantoux.

Každý, kdo chce, může být vyšetřen za poplatek, pokud tuberkulóza nebyla potvrzena pomocí bakteriologie a fluoroskopie. To se děje, pokud je léze v plicní tkáni v přímém zobrazení neviditelná v Rg-obraze a pacient není schopen správně zachytit sputum, ale známky lidské tuberkulózy jsou narušeny.

Moderní PCR reakce na diagnózu je klíčem k úspěšné léčbě, v důsledku čehož se prevalence onemocnění snižuje. Tradiční metody identifikace onemocnění nevedou vždy k požadovanému účinku.

PCR analýza se tak stala jednou ze spolehlivých a bezpečných metod diagnózy v raných stadiích onemocnění.

Existují kontraindikace testu Mantoux? Provede se PCR analýza tuberkulózy.

Tuberkulóza je nebezpečné onemocnění, které lze úspěšně léčit včasnou diagnózou.

Jedna z nejvíce informativních studií k identifikaci onemocnění v rané fázi se nazývá metoda PCR (polymerázová řetězová reakce).

PCR analýza není pouze nejinformativnější, ale také jednou z nejpřístupnějších studií, které mohou detekovat tuberkulózu v jejích raných stadiích.

Co je to PCR analýza?

Všechny živé mikroorganismy, včetně virů a bakterií, obsahují ve své struktuře molekuly RNA a DNA. Zvýrazněním těchto kyselin je možno s velkou jistotou říci, které cizí látky jsou přítomny v lidské krvi a které umožňují přesnou diagnózu.

Podstatou metody PCR je speciální zpracování vzorků biologických tekutin, v důsledku čehož lze určit, ke kterým druhům mikroorganismů v nich patří.

Analýza PCR pro tuberkulózu: indikace, výhody a nevýhody

PCR technika se používá u lidí s těžkými plicními lézemi v těchto případech a respiračních projevech (těžký kašel, hemoptýza), kdy je nemožné přesně diagnostikovat nemoc klinickými symptomy.

Doporučuje se podstoupit studii a po přímém kontaktu s nositelem onemocnění. Mezi jeho výhody patří:

• rychlost provedení - pro dosažení výsledku nemusíte pěstovat kulturu patogenu ani provádět jiné složité postupy;
• vysoce informativní - při diagnostice tuberkulózy dosahuje přesnost analýzy 90% a vyšší;
• vysoká citlivost a specificita - pro identifikaci patogenů v materiálu může obsahovat pouze jednu buňku viru;
• univerzálnost - pro analýzu jsou vhodné prakticky všechny biologické tekutiny: sputum, krev, průduškové lávy.

Pro srovnání: přesnost mikroskopie nátěrů sputa, která se používá k detekci tuberkulózy, je pouze 40-50% a při nízkém počtu patogenů je snížena na 10% nebo méně. Kultura sputa je informativnější, ale dosažení výsledků trvá 2 až 8 týdnů.

PCR můžete použít pro tuberkulózu místo Mantouxu, pokud má osoba nějaké kontraindikace na vzorku.

Nevýhody této techniky zahrnují riziko falešně negativního výsledku. Jinými slovy, absence specifické DNA ve sputu, krvi nebo moči ještě nenaznačuje absenci tuberkulózy u pacienta.

Je to důležité. V diagnostice tuberkulózy u dětí je citlivost PCR analýzy nižší než u dospělých a je přibližně 25-83%.

Foto 1. Dělat PCR místo Mantoux k dítěti je dobrá volba, pokud je alergický nebo často nemocný.

Postup analýzy PCR

Postup pro provádění PCR analýzy se provádí pomocí speciálního zařízení zvaného zesilovač a sestává ze čtyř stupňů. Studie vyžaduje řezy DNA, které začínají syntézu molekul, nukleotidů (bází molekul DNA), stejně jako polymerázy nebo enzymu, který postup urychluje.

1. Sběr biologického materiálu (sputum, krev, výplach průdušek).
2. Zahřátí vzorku na teplotu asi 98%, aby se zničila primární struktura řetězce DNA.
3. Žíhání nebo snížení teploty o několik stupňů pro navázání primeru na řetězec DNA.
4. Syntéza molekul potřebných k dosažení výsledku.

Po provedení 25-30 takových cyklů se vytvoří určitý počet kopií DNA virů, pomocí nichž lze snadno určit původce onemocnění.

Pozor: PCR analýza nerozlišuje mezi „mrtvými“ mikroorganismy a „živými“, proto může být výsledek po určité době po léčbě pozitivní.

Příprava na analýzu

Pokud se provádí PCR krevní test na tuberkulózu, pak není nutné speciální školení, ale pacientům se doporučuje dodržovat obecná pravidla: zdržet se jídla nejméně 8 hodin, eliminovat alkohol a užívat léky, nekuřte hodinu před odebráním materiálu.

Sputum se shromažďuje ráno po kartáčování a důkladném opláchnutí úst.

Pokud je exsudát špatně vylučován, měli byste vykašlávání užít večer nebo inhalovat. Sputum s hlenem, hnisem, bílými nebo nažloutlými skvrnami má diagnostickou hodnotu.

Pokud není možné pro analýzu použít sputum, používají se k identifikaci patogenů bronchiové tampony. Taková analýza nevyžaduje přípravu a materiál se odebere následujícím způsobem. S pomocí laryngeální stříkačky se pacient nalije do průdušnice a pro výzkum se používá roztok chloridu sodného, ​​který způsobuje silný kašel - kapalina pro kašel.

Pozor. Výsledek analýzy naruší antibiotika, heparin a další léky používané pro lokální léčbu, proto se studie doporučuje 10-14 dnů po podání.

PCR analýza (diagnóza) tuberkulózy

Tuberkulóza nebo konzumace - jedna z nejoblíbenějších infekčních chorob 21. století. Jeho patogeny jsou speciální mikrobakterie - Kochovy tyčinky.

Onemocnění se šíří nejen do plic, ale také do mozku, trávení, kloubů nebo páteře, močového systému a kůže.

Podle WHO trpí každý rok 10 milionů lidí tuberkulózou, z nichž 3 miliony jsou smrtelné.

Situace je obzvláště smutná na území zemí SNS, zde se periodicky vyskytují tuberkulózní epidemie. Rusko, Kazachstán, Ukrajina jsou vedeny smutným hodnocením šíření této infekce.

Infekce je snadno přenášena vzduchem rozptýlenými kapičkami nebo prostřednictvím trávicího systému, ovlivňuje životně důležité orgány a je také schopna se rychle přizpůsobit polymerním lékům a chemoterapii.

Jedním z hlavních faktorů úspěšné léčby tuberkulózy je včasná detekce infekce.

Diagnostické metody

Lidstvo vynalezlo mnoho metod pro rozpoznání nebezpečné nemoci. Diagnóza tuberkulózy je rozdělena na instrumentální a laboratorní.

V prvním případě, krevní test na tuberkulózu, stejně jako sputum, moč.

Druhou skupinou je studie používající rentgenové a endoskopické vyšetření. Instrumentální metody pro diagnostiku tuberkulózy jsou zase radiační a chirurgické.

Typy radiačních metod pro zjištění onemocnění

• Fluorografie je metoda diagnostiky nemoci známé každému obyvateli CIS. Pomocí rentgenových paprsků se vyšetřují plíce a lymfatické uzliny.
• X-ray hrudníku - podobný fluorografii, ale lepší způsob detekce infekce. Obraz je získán podrobněji a ve dvou projekcích, ale tento postup je asi šestkrát dražší. Obvykle se používá po vzniku vážného podezření na nemoc.
• Počítačová tomografie se provádí jako další diagnóza, která se také používá po dobrém důvodu přítomnosti infekce.

Chirurgické metody diagnózy zahrnují bronchiální endoskopii, stejně jako mediastinoskopii a torakoskopii.

První metodou je studium bronchiálního stromu plic pomocí „sondy“ v tomto orgánu. Zbývající dvě metody umožňují studovat pleurální část plic propíchnutím hrudníku.

Všechny tři metody jsou závažným chirurgickým zákrokem a nejčastěji se používají v procesu progrese onemocnění.

Laboratorní testy zahrnují:

• Analýza sputa pro tuberkulózní bacil.
• Mikroskopické vyšetření.
• PCR diagnostika tuberkulózy

Co je to PCR diagnostika?

Jednou z nejmodernějších metod laboratorní diagnostiky infekčních specialistů je polymerázová řetězová reakce.

Tato metoda byla vyvinuta slavným americkým vědcem Carrie Mullis v roce 1983, za kterou získal Nobelovu cenu.

PCR analýza je izolace částic DNA ze sputa, krve, mozkomíšního moku, výkalů atd. pro jejich následnou biosyntézu.

S pomocí komplexní molekulárně genetické studie se stanoví povaha mikrobů v těle pacienta.

Tento druh analýzy tuberkulózy se provádí v několika fázích:

• Nejprve se odeberou biologické vzorky. Materiály jsou umístěny ve speciálních nádobách a odeslány do laboratoře.
• Ve výzkumném centru jsou analýzy vyhřívány na 97 stupňů. To umožňuje zničit strukturu genomu DNA mikroorganismů, která se skládá z několika řetězců.
• Teplota je specificky snížena tak, že primery (účastníci DNA, ze kterých začíná proces biosyntézy) se mohou připojit k jakémukoliv řetězci deoxyribonukleové kyseliny.
• Poté se provede biosyntéza molekul potřebných pro detekci.

Po 25–30 opakovaných cyklech v laboratorním výzkumném procesu mají lékaři možnost rozpoznat, zda jsou v těle pacienta přítomny infekční mikroorganismy nebo ne.

Výhody a nevýhody

PCR pro tuberkulózu je nejmodernější diagnostickou technikou. Metoda umožňuje detekci infekce v jakékoliv fázi s vysokou spolehlivostí. Výhody:

• Rychlost - studium trvá déle než pět hodin. Výsledky testu na mikroby tuberkulózy lze nalézt do 24 hodin.
• Bezpečnost - PCR metoda nemá žádné věkové kontraindikace.
• Včasnost - tato technika umožňuje detekovat tuberkulózu v těch stadiích, kdy onemocnění nemá žádné příznaky.
• Vysoký stupeň přesnosti - pokud je v analýzách jen několik mikroorganismů, budou nalezeny pomocí polymerázové řetězové reakce. Tato technika také umožňuje snadno identifikovat původce tuberkulózy.
• Všestrannost - diagnostika se používá nejen pro detekci spotřeby, ale i pro další nemoci, jako jsou chlamydie, kapavka apod.

Navzdory mnoha výhodám je použití této techniky v domácí lékařské praxi spíše výjimkou než pravidlem. Existuje pro to několik důvodů.

Nevýhodami této metody jsou:

• Vysoké náklady na průzkum.
• Tato metoda není vhodná pro ty, kteří podstoupili léčbu, protože přítomnost mrtvých bakterií Koch může vést k falešně pozitivnímu výsledku.
• V případě mutace infekčních mikroorganismů nelze jejich genom rozpoznat falešným závěrem.
• Je důležité zvolit správné prostředí pro detekci. Například výsledek krevního testu pro PCR na tuberkulózu (vstup ředění) bude negativní, pokud je infikován nervový systém.
• Tuto metodu nelze vždy aplikovat na pacienty s diagnózou plicních lézí.

Navíc taková analýza tuberkulózy vyžaduje moderní vybavení, které nemá 90 procent nemocnic. V CIS takovou analýzu může provádět síť klinik Invitro.

Podmínky analýzy

Doporučení pro pacienty podrobující se takovému testu na tuberkulózu se liší v závislosti na typu provedené analýzy.

Při odběru krve pro PCR je nutné upustit od kouření hodinu před zákrokem, dvě hodiny - aby se vyloučily alkoholické a tučné potraviny.

Doporučuje se také vyhnout se fyzické námaze, je také nemožné vzít krev na tuberkulózu na prázdný žaludek.

Když vezmete tampon z úst a nosní dutiny, nemůžete jíst 2-4 hodiny před zákrokem, jinak to nebude informativní. Také nepijte alkohol.

Pro přesné měření je zakázáno kouřit dříve než hodinu před zákrokem. V předvečer se vyhněte kartáčování zubů a sprejů a ústních sprejů.

Pokud máte podezření na tuberkulózu urogenitálního systému, pacient po dobu 2-3 dnů před porodem by měl vyloučit pohlaví, 2-3 hodiny před zákrokem, nechodte na toaletu „malým způsobem“. Genitální orgány by měly být umývány čistou vodou bez speciálních prostředků.

Ženy se nedoporučují používat vaginální tablety, svíčky, kuličky a také se zdržet testování v kritických dnech.

5 dnů před porodem je výsledek nutný k ukončení zákroku kolposkopie a transvaginální ultrazvuk,

Kdy se používá PCR diagnostika?

Ne každá klinika má takovou komplexní diagnózu, ale lékaři se stále více uchylují k těmto metodám výzkumu. Obvykle se tento druh analýzy provádí ve zvláštních situacích.

• V případě pochybných výsledků manty lze použít krevní test na tuberkulózu.
• V případech, kdy byl pacient v kontaktu s infikovanou osobou, ale ošetřující lékař nemůže přesně určit diagnózu.
• V případě nouzové operace, kdy je nutné v krátké době zjistit, zda má pacient tuto infekci.
• Když je pacientka těhotná, když jiné výzkumné metody nejsou pro novorozence dostatečně bezpečné.

Je třeba poznamenat, že tato diagnóza je doporučena pro děti z důvodu její bezpečnosti.

Pokud má student kontraindikace proti tuberkulínovému testu, může namísto pláště provést PCR krevní test na tuberkulózu.

PCR diagnostika tuberkulózy

Tuberkulóza je specifická infekce, její zaměření může být v lidských tkáních po celá léta a pak se šíří několik měsíců. Jedná se o chronické onemocnění, jehož optimální léčebné režimy je obtížné vybrat. Jedním z důvodů je pozdní diagnostika, kdy se mykobakterie, zatímco v lidském těle, již přizpůsobily mnoha lékům.

Jaké moderní metody diagnózy existují? PCR diagnostika - co to je? Jaký je tento výzkum? V jakých případech je tuberkulóza diagnostikována touto metodou a jaká je její podstata?

Co je to PCR diagnostika

Je to jedna z nejmodernějších metod diagnostiky nejen nemocí, ale také detekce biologického materiálu. PCR diagnostika byla vynalezena relativně nedávno. Asi před 30 lety v roce 1983, americký biochemik, Carey Banks Mullis, navrhl komplexní schéma obnovy biologického materiálu mikroorganismů v jednom krátkém segmentu. Díky jeho objevu získal vědec nejvyšší cenu - Nobelovu cenu.

Co je to - PCR diagnostika infekcí? Polymerázová řetězová reakce (PCR) je diagnóza detekce virových onemocnění, založená na metodách genetického inženýrství. Je široce používán v lékařské mikrobiologii, imunologii a virologii. Metoda je univerzální a pomáhá diagnostikovat malé množství materiálu. Infekce může být detekována doslova v prvních hodinách infekce, dlouho předtím, než se objeví první příznaky onemocnění.

Metoda spočívá v tom, že z materiálu od nemocného není získán samotný patogen, nýbrž fragmenty genomu (částice DNA), jeho biosyntéza s následným určením, do které třídy mikroorganismů získaný genetický materiál patří, pomocí molekulárně genetických metod.

Navzdory skutečnosti, že se jedná o komplexní proces, trvá mnohem méně času než mnoho biologických metod detekce infekčních agens. Během několika hodin lze pomocí PCR detekovat mikroorganismus. K tomu není nutné izolovat ji od prostředí (krev, mozkomíšní mok, sputum) a pěstovat ji po dlouhou dobu na umělých živných médiích. Stačí, když je ve studovaném materiálu přítomen malý fragment řetězce DNA infekčního činidla.

Základem reakce je možnost za umělých podmínek (in vitro) vytvořit syntézu molekul nukleové kyseliny infekčního agens.

Co je potřeba pro PCR?

1. Primery jsou segmenty DNA, ze kterých začíná biosyntéza nebo tvorba.
2. Nukleotidy nebo komplexní sloučeniny, které jsou základem molekuly DNA nebo RNA.
3. Polymerázová řetězová reakce není možná bez přítomnosti polymerázy, což je enzym urychlující PCR.

Fáze diagnostiky PCR

Jak probíhá molekulární diagnostika pomocí PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátkou dobu s ohledem na sběr materiálu.

1. Před zahájením studie si vezmou potřebný biologický materiál - to je voda z průdušek, krev, obsah žaludku, sputum. Typ biologického materiálu závisí na podezřelém patogenu.
2. Denaturace nebo zničení primární struktury DNA, která se skládá ze dvou řetězců. Podstatou této fáze je oddělení dvou řetězců pod vlivem vysoké teploty (maximum je 98 ° C, které trvá ne déle než dvě minuty).
3. V dalším stadiu PCR, zvaném annealing, se teplota sníží o několik stupňů, takže se primer naváže na DNA řetězec.
4. Prodloužení, během kterého probíhá syntéza požadovaných molekul přímo.

Výsledkem je, že pouze 25–30 takových cyklů obdrží potřebný počet kopií DNA mikroorganismu, které lze snadno rozpoznat.

Vyžaduje PCR diagnózu tuberkulózy?

Není možné, aby všichni lidé s podezřením na tuberkulózu prováděli PCR, protože tento způsob vyžaduje drahé vybavení. Ne všechny veřejné kliniky si to mohou dovolit koupit. Navíc se tak stalo, že obvyklé metody diagnostiky infekce ve většině případů se také ospravedlňují.

Patří mezi ně:

• průzkum pacientů, historie;
• úplné vyšetření osoby;
• studie s použitím tuberkulinového testu Mantoux;
• radiografie nebo fluorografie;
• počítačová diagnostika v případě potřeby;
• metody mikrobiologického výzkumu: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetření sputa.

PCR pro tuberkulózu se provádí ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo není možné provádět jiné instrumentální metody.

I přes hojnost diagnostických metod stále roste výskyt tuberkulózy. V současné době nejde jen o jeho růst, ale i další funkce:

• onemocnění se často vyskytuje v těžké formě;
• počet smrtelných případů se zvyšuje;
• stále odolnější vůči moderní chemoterapii jsou diagnostikovány formy onemocnění.

Neochota samotných lidí každoročně podstoupit rutinní lékařská vyšetření, odmítnutí očkování vede k šíření tuberkulózy. V takových podmínkách potřebujeme rychlé, informativní a účinné výzkumné metody, které by měly být přístupné dětem i dospělým. Všechny výše uvedené diagnostické metody jsou mnohem horší než PCR.

Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocí PCR

Tento výzkum, i když nový, se osvědčil, zejména v kontroverzních případech, kdy není možné provést diagnózu z několika důvodů.

Díky PCR je mnohem snazší detekovat původce tuberkulózy v testovaném materiálu.

Výhody PCR diagnostiky jsou následující.

1. Jedná se o rychlou analýzu. Malý fragment molekuly DNA může být použit k diagnostice během pouhých několika hodin (asi pět), která se úspěšně používá v nouzových situacích, kdy například před operací je nutné určit, zda je člověk nemocný tuberkulózou.
2. PCR analýza je povolena v případě, kdy jsou jiné metody nedostupné nebo zakázané (pro detekci plicní tuberkulózy, někdy musíte vzít několik radiografických snímků, což bude velká dávka záření).
3. Pomocí PCR se vyšetřuje biologické prostředí na přítomnost patogenu. Například můžete provést studii mozkomíšního moku, pokud existuje podezření na tuberkulózní meningitidu.
4. Povolena PCR diagnostika infekčních onemocnění u dětí, protože metoda je bezpečná.
5. Umožňuje identifikovat patogen v jakékoli fázi onemocnění.
6. Vysoká citlivost PCR umožňuje detekci Mycobacterium tuberculosis, i když je v biologickém materiálu pouze několik mikroorganismů.
7. Je dobré provádět diagnózu recidivy onemocnění.

Přečtená PCR se zdá být téměř dokonalou diagnostickou metodou, která by měla mít podezření na tuberkulózu. Existují však i nevýhody, které je třeba vzít v úvahu.

Nevýhody PCR v diagnostice tuberkulózy

V naší době je taková diagnostika vzácnější než pravidelnost. A pro to je důvod.

1. Jedná se o nákladnou výzkumnou metodu. Na mnoha klinikách chybí vybavení pro PCR kvůli jeho vysokým nákladům, ale analýza může být stále prováděna v placených laboratořích.
2. Ihned po ošetření mohou být v lidském těle stále přítomny mrtvé mykobakterie nebo žijící v malých množstvích (výsledek bude pozitivní během diagnostiky PCR), takže metoda bude v této době nespolehlivá, nemá smysl ji provádět.
3. Výsledkem mutací mykobakterií je neúčinná PCR - nelze syntetizovat normální sekvenci řetězce DNA.
4. Je nutné zvolit správné prostředí pro studii, krev je odebírána pouze v případě, že je podezřelá z infekce (sepse), není třeba brát sputum, pokud existuje otázka tuberkulózy orgánů nervového systému. V tomto případě nebude PCR schopna detekovat patogen a diagnóza bude neinformativní.

Indikace pro detekci tuberkulózy pomocí PCR analýzy

PCR diagnostika tuberkulózy se provádí nejčastěji v kontroverzních případech. Kdy lékaři tuto studii doporučují?

1. Pokud je obtížné provést diagnózu obvyklými dostupnými metodami, byl kontakt s pacientem s tuberkulózou.
2. V případě, že osoba nemůže být doručena na kliniku, aby podstoupila rutinní rutinní testy na tuberkulózu, je snazší jej vyšetřit pomocí PCR, protože sputum pro test může být dodáno do nádoby a diagnóza je potvrzena během několika hodin.
3. Pokud má člověk nouzovou operaci a je naléhavé zjistit, zda je nemocný tuberkulózou.
4. Pokud je to nutné, těhotná žena je také lepší vyšetřit na tuberkulózu pomocí PCR, protože metoda je bezpečná.
5. Každý, kdo nebyl diagnostikován tuberkulózou, byl na základě placení potvrzen bakteriologickými metodami a fluoroskopií. To se děje, když je léze v plicích nepostřehnutelná v přímém obraze, a osoba, která během studie dodala sputum, nemohla dodržovat doporučení pro správný sběr materiálu. V tomto případě se člověk obává všech příznaků charakteristických pro plicní tuberkulózu.
6. Když existují pochybnosti o výsledcích testu Mantoux.
7. Je vhodnější provést PCR diagnostiku tuberkulózy u dětí. Tento postup je bezpečný, nevytváří další ozáření a je účinný při detekci obtížně diagnostikovatelných forem onemocnění.

Včasná diagnóza tuberkulózy je klíčem k řádně předepsané léčbě a snížení šíření nemoci. Často známé metody detekce onemocnění nejsou vždy účinné. Proto je dnes PCR jednou z nejspolehlivějších a nejbezpečnějších způsobů detekce infekce v raných fázích jejího vývoje.

Co je to PCR analýza tuberkulózy

Inovativní metoda detekce mikroorganismů, kterou objevil vědec Cary Mullis na konci minulého století - analýza PCR. Za své spisy obdržel Nobelovu cenu. Tento proces se nazývá polymerázová řetězová reakce. Spočívá v obnově typu mikroorganismu v poskytnutém biomateriálu za použití krátkých fragmentů DNA. To vám umožní detekovat infekci v raném stádiu a okamžitě zahájit léčbu, aniž by to vedlo k závažným příznakům a komplikacím.

Co je to analýza

Diagnóza PCR je získat segmenty patogenní DNA z biologického materiálu a zarovnat je ve správném řetězci. To umožňuje identifikaci mikroorganismu, ke kterému buňky patří.

Postup se provádí ve třech fázích:

1. Sběr biologického materiálu.
2. Identifikace a vyrovnání DNA.
3. Rozpoznání infekce.

Tato studie vyžaduje speciální zdravotnické vybavení - zesilovač. Je vybaven kamerou, kde studovaný materiál interaguje s vysokoteplotními a chemickými enzymy. Na výstupu má laboratorní technik dlouhý řetězec DNA původce, pokud je v lidském těle jeden.

Jak se připravit na diagnózu

PCR analýza je komplexní proces genetického inženýrství, který vyžaduje přesnost a závažnost jak laboratorních techniků, tak pacientů. Velkou roli ve správnosti výsledků analýzy hraje příprava na postup, tj. Správný sběr materiálu.

Hlavními zdroji informací o této nemoci jsou:

Mohou být použity i jiné možnosti, v případě potřeby jsou kapaliny odebírány pro analýzu z různých orgánů.

Pro pacienta existují určitá pravidla, která musí být dodržena před zákrokem. Je-li proveden krevní test, je zakázán po dobu 8 hodin před odběrem:

• jíst jídlo;
• kouřit;
• pití alkoholických nápojů;
• vezměte léky dovnitř.

Ve večerních hodinách, před odběrem sputa, je lék opilý, aby ho zředil a usnadnil vykašlávání. Ráno sbírejte materiál po důkladné hygieně ústní dutiny.

Moč se shromažďuje ve sterilní nádobě ráno na lačný žaludek, po mytí před užitím jakéhokoliv léku.

Pokud člověk bere antibiotika, měla by být analýza polymerázové řetězové reakce odložena, jinak není výsledek PCR spolehlivý. Sputum nebo krev by měly být darovány dva týdny po skončení léčby.

Jak postup identifikace bakterií

Stručně řečeno, procesem je izolovat část DNA. Použití moderních metod genetického inženýrství nám umožňuje určit typ mikroorganismu. Navíc materiál pro analýzu potřebuje malé množství.

Technicky je to velmi komplikovaný postup, ale trvá méně času než klasické bakteriologické studie. Patogeny nemusí být izolovány od biomateriálu, není nutné je pěstovat několik týdnů. V den porodu může pacient již znát výsledek své analýzy.

Celý proces PCR probíhá ve fázích:

1. Probíhá práce s primární formou DNA, která je při vysoké teplotě blízké 100 stupňům rozdělena na dva řetězce.
2. Teplota klesá, vlákna jsou spojena s fragmenty nukleové kyseliny - primerem.
3. K prodloužení dochází - syntéza molekulární struktury.

Celé zasedání se skládá z asi třiceti takových postupů, opakování cyklu jako řetězové reakce. To je nezbytné pro vytvoření počtu buněk, ve kterých se výsledné bakterie stanou rozpoznatelnými.

Závěr studie

Popis výsledku PCR (polymerázová řetězová reakce) dává TB lékaři, je jednoduchý nebo nasazený. V prvním případě bude popis obsahovat pouze informaci o přítomnosti nebo nepřítomnosti Kochových tyčinek. Pokud je dekódování podrobně popsáno, můžete z něj zjistit rozsah onemocnění, jeho zaměření. Podle těchto kritérií je možné v každém případě stanovit nejvhodnější léčbu tuberkulózy.

Polymerázová analýza řetězové reakce nerozlišuje mezi živými a mrtvými patogeny a hovoří pouze o jejich přítomnosti. Proto je smysluplné absolvovat druhý test na tuberkulózu pouze 3-4 týdny po ukončení léčby předepsané lékařem.

Je-li výsledek pozitivní, je na závěr uveden nápis „Mycobacterium tuberculosis“. Pokud je negativní výsledek, vedle biologického názvu bakterií je značka "nezjistena". Analýzy mohou být falešně pozitivní. K tomu dochází jen zřídka - v případě porušení techniky provádění studií PCR nebo v přítomnosti neživotaschopných mikroorganismů. Konečný závěr o nemoci může učinit pouze lékař TB.

Výhody metody

PCR diagnostika tuberkulózy získala popularitu z mnoha důvodů. Má mnoho výhod, včetně:

1. Přesnost výzkumu. Při analýze technologie je možné identifikovat bakterie, i když jsou přítomny v malých množstvích.
2. Rychlý výsledek. Celý proces od sběru materiálu až po hotový závěr trvá přibližně 5 hodin. Ve srovnání s setím musí vyčkat až několik týdnů.
3. Plná bezpečnost pro osobu, na rozdíl od fluorografie s radiací.
4. Používá se jakýkoliv kapalný biomateriál. Pro realizaci PCR u plicní tuberkulózy poskytuje sputum nejpřesnější informace, u tuberkulózní meningitidy se odebírá vzorek z míchy. Krevní test pomáhá určit lokální ložiska infekce.
5. Testuje se citlivost bakterií na antibiotika. To vám umožňuje předepsat správnou léčbu.
6. Včasná diagnóza. O přítomnosti nemoci se můžete dozvědět před nástupem jejích příznaků.

Kromě pozitivních aspektů existují i ​​nevýhody. Hlavní je cena. Analýza PCR není levná, což je spojeno s použitím drahých zařízení. Další nevýhodou je potřeba čekat na čas na opakovanou zkoušku po léčbě tuberkulózy. Výsledek testu je někdy falešně pozitivní. K tomu dochází v důsledku bakteriální mutace.

Je-li nutná PCR

PCR pro plicní tuberkulózu nemá žádné kontraindikace a je naprosto bezpečná. Proto existují určité situace a nemoci, kdy je to jediná možnost výzkumu.

Patří mezi ně:

• těhotenství;
• kontakt s tuberkulózním pacientem;
• obtíže při určování diagnózy plicního onemocnění;
• vyšetření před operací;
• alergická reakce;
• HIV infekce;
• mladého věku.

Metodu PCR můžete použít ve směru, který je vydáván ve fisisiologii, stejně jako pediatr, lékař nebo pulmonolog.

Co může nahradit PCR diagnostiku tuberkulózy

Jiné typy průzkumů se nestaly zastaralé, ale nadále se používají. Používají se v případech, kdy není možné provést PCR pro tuberkulózu. Moderní metoda navíc není ideální, někdy jsou její ukazatele zpochybňovány a vyžadují opětovné ověření.

Následující metody pomáhají určit přítomnost tuberkulózy u člověka:

• tuberkulínová diagnóza (Mantoux);
• fluorografie;
• zkoušení biologického materiálu pro flóru;
• rentgen plic.

Tyto studie jsou zdarma a dostupné všem. Ale mají své nevýhody:

• Test na tuberkulózu způsobuje alergie. Kontraindikován při kožních onemocněních.
• Rentgenové studie jsou doprovázeny ozařováním, které není použitelné pro děti, osoby s imunodeficiencí a těhotné ženy.
• Bakteriologické analýzy trvají mnohem déle, výsledek lze očekávat až měsíc.

Alternativy nejsou zárukou 100% správného závěru. Nejčastěji se používají pro preventivní účely. Diagnostika tuberkulózy pomocí PCR poskytuje nejspolehlivější informace. Je-li to možné, je lepší jej použít.

Zvláštnosti tuberkulózy u dětí a potřeba PCR

Dítě by mělo být zvláště chráněno před onemocněním - infekce tuberkulózy může způsobit vážnou újmu na těle s dosud zcela nevytvořenou imunitou.

Po vstupu do Kochovy hůlky do dětského organismu prochází vývoj nemoci následujícími fázemi:

• Latentní. Trvá až rok, aniž by se projevily jakékoli příznaky.
• Intoxikace. Ovlivňuje celkové zdraví. Objevuje se slabost, apatie, nedostatek chuti k jídlu, ospalost a snížený výkon. Trvale mírně zvýšená teplota.
• Primární forma onemocnění. Tuberkulóza je lokalizovaná, tvořící ohnisko nemoci. Dítě má kašel, dušnost, bolesti hlavy, oteklé lymfatické uzliny.
• Tuberkulární bronchoadenitida. Symptomy jsou bolest v lopatkách, kašel s různou výškou zvuku, sípání.

Obvykle se tuberkulin injektuje k identifikaci infekce pod kůží dítěte. Pokud je tento typ vyšetření kontraindikován, pak je PCR pro tuberkulózu nepostradatelnou volbou pro diagnostiku. Děti obvykle provádějí krevní testy, ale v případě potřeby se odebírá sputum. Při sebemenším podezření na přítomnost tuberkulózy se provádějí další studie, které zajistí pozitivní výsledek a okamžitě zahájí léčbu v raném stadiu, která zabrání rozvoji onemocnění.

Moderní výzkumné metody jsou vždy rychlejší a spolehlivější. Je škoda, že vzhledem k nákladnému vybavení k provádění takovýchto testů existuje možnost, že to není ve všech zdravotnických zařízeních a lokalitách. Jaký způsob provedení vyšetření obvykle volí lékař, ale pacient má právo si vybrat. Pokud jste museli provést PCR test, řekněte nám o tom v komentářích. Pokud byl článek pro vás užitečný, sdílejte jej v sociálních sítích - možná to pomůže přátelům.