PCR diagnostika tuberkulózy u dětí a dospělých: indikace pro

Světová zdravotnická organizace uznala před 20 lety, že míra šíření tuberkulózy byla mimo kontrolu a dosáhla rozsahu epidemie. Od té doby se situace nezlepšila. Každý rok je diagnostikováno více než milion případů onemocnění, z nichž téměř čtvrtina je smrtelných. V posledním desetiletí se incidence u dětí zvýšila, většina forem nemoci není vhodná pro standardní léčbu antibiotiky.

Dnes je jedním z globálních úkolů v medicíně vývoj takových diagnostických metod, které umožní identifikovat patologii před nástupem výrazných klinických příznaků. Jedním z nich je polymerázová řetězová reakce (PCR) pro tuberkulózu, která pomáhá detekovat tyčinky způsobující Kochovu chorobu v krvi, sputu a dalších biologických tekutinách.

Diagnóza tuberkulózy

Screeningové testy jsou zaměřeny na detekci pacientů, nosičů tuberkulózy a prevenci šíření infekce ve společnosti. Pro děti mladší 14 let se masivně používá test Mantoux. Jde o imunologický test, při němž se dávka tuberkulínu podkoží injektuje - což je komplexní směs genetického materiálu několika typů mykobakterií. Výskyt výrazné reakce indikuje aktivně se vyskytující infekční proces.

Pro preventivní vyšetření u dospělých s použitím fluorografie nebo rentgenového záření. Tyto metody pomáhají zviditelnit patologické léze v plicní tkáni. Způsobuje však obtíže při diferenciaci tuberkulózy od jiné organické patologie (maligní a benigní neoplazmy, zánětlivé procesy, parazitární invaze, profesionální poškození plic).

Pro objasnění struktury a velikosti patologického zaměření mohou být zapotřebí další instrumentální studie:

• cílená radiografie;
• počítačová tomografie;
• zobrazování magnetickou rezonancí.

Metody diagnostiky tuberkulózy

V případě pochybných výsledků a při stanovení adekvátní terapie je zapotřebí přesnějších diagnostických metod, které umožní izolovat patogen. Mikroskopické a bakteriologické vyšetření sputa se používá k dlouhodobému potvrzení plicních forem tuberkulózy.

V posledních letech je výskyt mykobakterií různých orgánů a systémů - ledvin, kostí, střev, kůže - stále častější. K identifikaci těchto forem tuberkulózy, ultrazvukového vyšetření, kultury moči a stolice lze použít endoskopické vyšetření.

PCR diagnostika tuberkulózy pomůže potvrdit přítomnost Kochových tyčinek v krvi, stejně jako její citlivost na určité léky. Jedná se o vysoce účinnou metodu založenou na detekci bakteriálního genetického materiálu v různých biologických tekutinách.

Specifičnost a indikace

Polymerázová řetězová reakce je vysoce citlivá mikrobiologická diagnostická metoda založená na principech genetického inženýrství. Pro potvrzení přítomnosti patogenu v biologickém materiálu je postačující pro tento fragment detekovat jedinečný fragment nukleové kyseliny. PCR pro tuberkulózu může detekovat bakterie v krvi, sputu, moči.

V současné době vyvinula několik metod analýzy. Mezi nejoblíbenější patří:

• PCR v reálném čase;
• mikrofluidní technologie;
• sekvenování a pyrosekvenování.

PCR v reálném čase

Laboratoře nejčastěji využívají polymerázovou řetězovou reakci v reálném čase, protože snižuje počet falešně pozitivních výsledků a samotný proces analýzy trvá krátkou dobu.

Vzhledem k velkému počtu skrytých forem onemocnění a neúčinnosti standardních diagnostických metod se stále více používá PCR. Účel této analýzy je uveden na adrese:

• identifikaci podezřelých oblastí na rentgenovém snímku;
• pochybné výsledky tuberkulinového testu;
• nemožnost provádět mikroskopickou a bakteriologickou analýzu sputa u osob ve vážném stavu;
• provádění chirurgických zákroků, pokud je nutné rychle zajistit, že nedochází k infekci;
• nepřípustnost použití fluorografie, rentgenového záření nebo počítačové tomografie (například u těhotných žen a kojení v případech nadměrného ozáření);
• podezření na extrapulmonální tuberkulózu (doporučuje se použít nejen krev, ale i hlen).

PCR diagnostika tuberkulózy se osvědčila při vyšetření dětí z důvodu nedostatku dodatečné expozice a rychlých výsledků.

Postup přípravy a analýzy

Není nutná speciální příprava na krevní PCR. Aby se však předešlo komplikacím odběru vzorků krve a aby se získal kvalitní materiál, je třeba dodržovat následující obecná pravidla:

• analýza by měla být provedena ráno ne dříve než 2 hodiny po probuzení;
• Mělo by omezit příjem mastných a smažených potravin denně před odběrem krve;
• zdržujte se jídla, čaje a kávy po dobu 8-9 hodin, je dovoleno pít čistou vodu;
• Nekuřte nejméně 3-4 hodiny.

V případě trvalého léčení (hormony, antikoagulancia, protizánětlivá léčiva, antibiotika, ředidla krve) byste o tom měli informovat asistenta laboratoře.

Při aplikaci sputa byste měli dobře čistit zuby a několikrát si vypláchnout ústa. Materiál odeberte ve sterilní nádobě. Pro dosažení lepších výsledků lze večer použít expektoranci nebo mukolytikum.

Diagnóza se skládá z několika fází.

Plotový materiál. Lze jej provádět v laboratoři i na dálku. Některé typy materiálu, které pacient sbírá nezávisle (moč, hlen).

Zničení struktury nukleových kyselin (denaturace molekul DNA a RNA). K tomu se testovaný materiál zahřívá na teplotu 98 ° C a udržuje se několik minut. Výsledkem je, že se dvojitá šroubovice uvolní, vytvoří se jednovláknové molekuly.

Žíhání Po přidání primeru (krátký úsek nukleové kyseliny) teplota klesne o několik stupňů, aktivuje se polymeráza.

Elogace. Teplota je nastavena na optimální úroveň, enzymová aktivita dosahuje maxima a druhý řetězec je dokončen v souladu s Chargaffovým pravidlem komplementarity.

Pro dokončení studie je nezbytné syntetizovat požadovaný počet molekul DNA - asi 50 cyklů výše uvedené reakce. To trvá asi 2-3 hodiny. Pozitivní výsledek reakce neznamená vždy aktivní stadium onemocnění, ale je indikátorem přítomnosti mikroorganismu v těle.

Výhody a nevýhody metody

Ve srovnání s jinými mikrobiologickými metodami, PCR nepotrvá dlouho, než detekuje Mycobacterium tuberculosis pomocí PCR, výsledek lze získat v den testování.

Další výhodou je vysoká specifičnost analýzy, která umožňuje detekci přítomnosti patogenu s přesností 90-95% v téměř každém biomateriálu (krev, moč, výkaly, mozkomíšní mok, sputum, návaly průdušek).

Existuje však několik nevýhod metody:

• poměrně vysoké procento falešně pozitivních výsledků (až 15%), což je spojeno s detekcí neživých mikroorganismů;
• v některých případech můžete tuto skutečnost vynechat, protože Mycobacterium tuberculosis je často vystavena mutacím a změnám genetického materiálu;
• nízká účinnost při vyšetření osob s imunodeficiencí;
• vysoké náklady na výzkum, potřeba drahých zařízení a činidel.

Co lze vyměnit?

Vzhledem k rozmanitosti forem infekce tuberkulózy je pro přesnější diagnózu a volbu léčby nutné kombinovat několik diagnostických studií:

Povinná analýza pro děti je Mantoux test. Pokud se zavedení tuberkulínu (genetický materiál mykobakterií) projeví výraznou reakcí, lze předpokládat infekci tuberkulózním bacilem.

Pro vizualizaci patologického fokusu lze použít rentgenové metody. V diagnostice extrapulmonální tuberkulózy se používají endoskopické metody při současné biopsii:

• bronchoskopie pomáhá identifikovat léze hrtanu, průdušnice, průdušek;
• kolonoskopie - střeva;
• cystouretroskopie - orgány močového systému;
• hysteroskopie - ženské genitálie. Tyto metody nejsou specifické, pro stanovení přesné diagnózy by měl být identifikován patogen.

Obecné klinické testy pomohou specifičtěji určit stav těla. Vyžaduje se kompletní krevní obraz s leukocytárním vzorcem.

Zvýšení počtu neutrofilů se sníženou hladinou lymfocytů a zvýšení rychlosti sedimentace erytrocytů (ESR) indikuje aktivní zánětlivý proces bakteriální etiologie. Vyloučit poškození orgánů močového systému pomocí obecné analýzy moči a kultury pro sterilitu.

PCR je v současné době dostupná ve většině soukromých laboratoří. To vyžaduje nejen vysoce kvalifikované odborníky, ale také drahé vybavení, velký počet činidel. Použití této metody je proto i přes vysokou přesnost a specifičnost omezené.

PCR analýza tuberkulózy

V případě podezření na onemocnění je lepší okamžitě předat PCR analýzu tuberkulózy. Během této studie se odebírá krev, která se kontroluje pod mikroskopem. Polymerová řetězová reakce začala stále častěji nahrazovat Mantouxův test k detekci tuberkulózy.

Výhody metody

Tato analýza po několika hodinách určuje přítomnost patogenu. Navíc, pokud je v těle přítomno malé množství bakterií, bude tato metoda schopna je identifikovat.

Hlavní výhody testu PCR jsou následující pozitivní body:

1. Tato choroba je detekována ve 100% případů.
2. Specifičnost DNA úřadu je vysoká.
3. Analýza odhalila původce za 4-4,5 hodiny.
4. Plicní tuberkulóza je úspěšně diagnostikována, s níž jiné metody nedokážou zvládnout.
5. Schopnost detekovat specifický fragment, který je obsažen v tomto patogenu.

Polymerní řetězová reakce umožňuje nejen včas identifikovat původce a zahájit léčbu pacienta, ale také poskytuje čas na izolování osoby od společnosti v případě infekce. Kochova hůlka - původce tuberkulózy - se nachází kdekoli v těle. A pouze PCR analýza to umožňuje identifikovat na místě.

Studie PCR také poskytuje možnost zvolit lék v závislosti na citlivosti mikroorganismů.

Popis nemoci

V devatenáctém století, tuberkulóza byla volána spotřeba. Onemocnění je infekce vnitřních orgánů, především plic. Tuberkulóza se přenáší vzduchem kýcháním a kašlem. Předmětem infekce může být člověk i zvíře.

Po proniknutí bakterií tuberkulózy do těla může onemocnění trvat dlouho v latentní formě.

V závislosti na stupni expozice nemocné osoby jiným osobám se rozlišují 2 formy onemocnění:

1. Uzavřená forma tuberkulózy. Není to nebezpečné, protože člověk nemůže infikovat ostatní. I v analýzách, vč. a PCR, nemoci mykobakterií nejsou detekovány. Přesto je v této formě nebezpečí, protože kdykoliv může otevřený formulář jít do otevřeného prostoru. Taková aktivní forma tuberkulózy může být nebezpečná nejen pro samotného pacienta, ale i pro jeho okolí.
2. Otevřená forma infekce. Když je v biologických tekutinách osoby Kochova hůl je detekována. Pacient s tuberkulózou v tomto stádiu nese zvláštní hrozbu pro ty kolem něj. Můžete se nakazit, i když se dopravce pečlivě sleduje z hlediska hygieny.

Mezi nejběžnější výzkumné metody používané k identifikaci onemocnění patří:

1. Fluorografie.
2. Tomografie hrudníku nebo jiných postižených oblastí.
3. Radiografická studie.
4. Studium biologických materiálů pacienta.
5. Tuberkulinový test (Mantoux).

Nejúčinnějším způsobem identifikace Kochova bacillu je molekulárně genetická analýza polymerázové řetězové reakce - PCR diagnostiky tuberkulózy.

Vyšetřování tuberkulózy

Polymerázová řetězová reakce je nejpřesnější molekulárně genetická analýza. Pokud dojde k infekci infekcí tuberkulózou, polymerní test studie vám umožní přesně identifikovat DNA nebo RNA patogenu. K tomu darujte krev nebo jinou biologickou tekutinu.

Pro zjištění přítomnosti tuberkulózy stačí dostatečné množství bakterií, a to i 1 buňka.

Mezi další výhody diagnostiky PCR patří:

1. Při provádění této analýzy se používá speciální enzym, díky kterému je detekována přesná přítomnost infekce tuberkulózy.
2. PCR analýza je zvláště citlivá na infekce mycobacterium, takže diagnostická přesnost odpovídá téměř 100%.
3. Již po 3,5-5,5 hodinách po provedení testu bude možné znát výsledky analýz.

S onemocněním, jako je tuberkulóza, je velmi důležité identifikovat patologii v raném stadiu. Z tohoto důvodu je test polymerázové řetězové reakce v tomto případě nejvíce informativní. Když bakterie teprve začínají útočit, měly by být detekovány co nejdříve, dokud jejich dopad neovlivní životně důležité funkce vnitřních orgánů.

PCR analýza má další výhodu oproti jiným typům výzkumu: tato technika určuje citlivost mikroorganismů na konkrétní léčivo, což umožňuje nejúčinnější terapii.

Příprava na PCR testování

Je-li slinami dána, je nutná příprava. 12 hodin před zákrokem se musíte vzdát kouření, alkoholu, léků a potravin. Kartáčování zubů, vypláchnutí úst různými osvěžovači a dokonce i flossing je zakázáno. Také nemůžete používat rtěnku a živý sexuální život. Je nutné opláchnout ústní dutinu převařenou vodou.

Metoda PCR detekuje nejen tuberkulózu. Stejně tak nemůžeme detekovat méně závažná onemocnění, jako je herpes, chlamydie, mononukleóza, pneumonie, barolleóza, HIV, hepatitida, rubeola.

Krev je nejčastěji odebírána ze žíly, ale v některých případech může být zapotřebí zcela jiný biologický materiál:

1. Slin.
2. Analýza moči
3. Škrábání z kterékoliv části těla.
4. Sexuální sekrece.
5. Cal.
6. Spinální tekutina.
7. Hlen z průdušek během vykašlávání.
8. Analýza hlenu.

Nejvíce informativní metodou PCR je však stále krevní test na tuberkulózu.

Sběr biomateriálu

Navzdory skutečnosti, že postup identifikace patogenu metodou PCR trvá pouze 4-4,5 hodiny, patří mezi nejobtížnější typy diagnóz. Přesnost výsledků může ovlivnit mnoho faktorů. Například je nutné odebírat vzorky pro výzkum podle určitých pravidel. Hlavní je zvýšení sterility ve sběru biologického materiálu. Tato analýza je proto obtížné provádět malé dítě.

Pokud je vzorek odebrán jako krev ze žíly, pak specialista provede krevní test na PCR na tuberkulózu nejen sterilní injekční stříkačkou, ale podle všech pravidel obecné hygieny.

Krev se shromažďuje ve speciální zkumavce a po celou dobu studie se uchovává v takových podmínkách, které zabraňují její srážení.

Pokud je to PCR analýza moči na tuberkulózu, pak je tekutina shromažďována brzy ráno, když je osoba právě vzhůru. Před odchodem na toaletu si pacient vezme sprchu a pak vezme sterilní nádobu na odběr moči.

V případě škrábání z genitálií, a to jak žen, tak mužů, je celý postup prováděn ve zdravotnickém zařízení.

Existují složitější testy, například odebírání tekutiny z míchy. V tomto případě jsou všechny akce prováděny v nemocnici zkušenými lékaři.

Nejčastěji je v těchto případech přiřazen průchod analýzy polymerní řetězové reakce:

1. Diagnostikovat onemocnění v plicní tkáni.
2. Identifikovat zdroj nemoci.
3. Identifikovat nemoc mimo plíce.
4. Za účelem diagnostiky recidivy onemocnění.

Pořadí testu

Diagnóza tuberkulózy u dětí a dospělých pomocí polymerní řetězové reakce prochází následujícími kroky:

1. V určitých situacích je pro výzkum používán jiný materiál. To může být výplach krve, sputa nebo průdušek.
2. Poté je biologický materiál po určitou dobu vystaven vysokým teplotám (až + 97 ° C) (nejčastěji je to několik minut). Výsledkem je zničení původní struktury DNA mikroorganismu, která se skládá ze dvou řetězců.
3. Poté začne teplota klesat, tato akce se nazývá žíhání. V tomto okamžiku se základní nátěr připojí k jednomu z odpojených obvodů.
4. Na konci prodloužení se provede. Během ní dochází k nezbytné biologické syntéze existujících molekul.

Získání požadovaného počtu kopií DNA na Mycobacterium tuberculosis bude trvat 25-30 cyklů.

Tento postup vyžaduje drahé vybavení, takže ne všechny zdravotnické instituce mají možnost provést PCR test na tuberkulózu místo Mantouxu.

Díky očkování a studiu PCR (namísto Mantouxu) je možné zabránit rozvoji takové nebezpečné nemoci, jako je tuberkulóza. Nyní nemusíte čekat na nástup onemocnění nebo fotografovat na rentgenovém přístroji. Pokud jsou podezření na infekci, aby se odstranily zlé následky nemoci, můžete vždy udělat PCR test, který určuje stav těla s maximální přesností. V real-time podmínkách, takové diagnostické formy jako Mantoux test a fluorography postupně mizí do pozadí ve srovnání s PCR metodou.

Metody testování sputa pro tuberkulózu

Analýza sputum pro tuberkulózu je zahrnuta v souboru diagnostických opatření nezbytných k identifikaci a objasnění diagnózy. Obsah sputa pomůže vytvořit kompetentní léčebný režim.

Jak projít testem na sputum na tuberkulózu

Lékaři vyvinuli pravidla pro provádění analýzy. Sliny se sbírají v dopoledních hodinách před tím, než osoba měla snídaně. Nejprve pacient provede hygienické procedury:

• Čištění zubní skloviny;
• důkladné opláchnutí čistou vodou ústní dutiny a hltanu.

Poté začíná okamžité dodání materiálu pro analýzu. Jak projít testem sputa? Požadavky na postup:

1. Příprava začíná předem, večer. Pacientovi se doporučuje, aby užíval speciální léky, které učiní plicní sekreci přirozenější. Jedná se o vykašlávání a ředění sloučenin. Pokud takové postupy nepomohou, proveďte inhalaci farmaceutickou kompozicí pro vykašlávání.
2. Připravte nádoby na sputum. Mucus musí být sbírán do sterilizovaných nádob, těsně uzavřen, pevně uzavřen.
3. Před porodem vykašlete a vyplivněte do nádoby. Objem slin by neměl být velký, vyžaduje si sputum z hrtanu. Bakterie ústní dutiny jsou v analýze cizí.
4. Sliny sbírejte v místnosti s vynikající ventilací. Analýza se provádí otevřením příčníku a spuštěním odsavače par. Doporučuje se otevřít okna, nebo jít ven na čerstvý vzduch.

Během procedury v místnosti je zakázáno vstupovat. Outsiders mohou přispět k mikroflóře kanceláře, a tak k sputum, patologickým formacím. Zdravotníci obdrží analýzu ve speciální masce (respirátor).

Analýza sputum transkriptu tuberkulózy

Dekódování začíná pohledem na vzhled hlenu. Patologie charakterizuje změnu barvy - ztmavne, s viditelnými příměsemi krve. Barva není hlavním indikátorem. Sputum ztmavne od pití červeného vína, vášeň kávy. Některé léky a barevné nápoje mění vzhled hlenu.

Shromážděný materiál je dešifrován dvěma ukazateli, to znamená, že lékaři mají dva výsledky:

Pozitivní odpověď

Analýza výsledného sputa potvrzuje přítomnost onemocnění v těle. Co to potvrzuje:

• cizí látky nebo neznámé inkluze;
• přítomnost sliznic hlenu;
• viditelné pruhy;
• nepříjemný hnisavý nebo infekční zápach;
• hnis.

Metoda makroskopického výzkumu poskytuje další údaje:

• fibrinové vazby;
• Kochové formace čoček;
• produkty z rozkladného rozkladu bakteriálních látek;
• zbytky patologického procesu v plicní tkáni.

Pozitivní výsledek ukazuje zvýšené množství proteinových sloučenin. Dosahuje 100-120 g / l.

Další mikroskopická metoda umožňuje identifikovat další nebezpečné prvky:

• alveolární makrofágy;
• nadhodnocené složení leukocytů;
• vysoká míra lymfocytů.

Pro tuberkulózu se člověk často plivne z úst. Hemoptýza zvyšuje tvorbu červených krvinek. Objem slin v ústech je takový, že ho člověk nemůže polknout, aniž by si toho všiml. Je to více než ve zdravém stavu.

Negativní odpověď

Studie ukazuje, že počet leukocytů je malý, odpovídá normě. Mikrobakterie také nejsou detekovány. Pokud pacient není zdravý, odborník předepíše další vyšetření. Je možné, že onemocnění souvisí s plicním onemocněním. Typy a metody další diagnostiky závisí na symptomech a stavu pacienta.

Jak se studuje hlen

Tuberkulóza je nebezpečným patologickým účinkem na plicní tkáň, je pozorována jejich dezintegrace. Analýza se provádí několika metodami. Nejběžnější - ELISA (imunotest). Podstata metody:

1. Protilátky jsou přidány do roztoku, ve kterém je umístěna část sputa.
2. Zkontrolujte koncentraci antigenů ve srovnání s normou zdravého těla.
3. Určete aktivitu patologického prostředí.
4. Diagnostikujte.

Druhou verzí laboratorního výzkumu jsou ODPADY. Pro tuto metodu vezměte speciální zdravotnické vybavení. Podstata výzkumu hardwaru:

1. V sputu byl mikroprostředí vstřikován pro zamýšlený typ infekce.
2. Přístroj začne růst u určitých teplotních kmenů bakterií.
3. Oxid uhličitý je produkován v procesu, a senzory vyzvednout.
4. Plyn se kombinuje s barvivem.
5. Na fluorescenčním indexu vyvozte závěry o typu onemocnění.

Nejjednodušší způsob je kulturní. Hleny zasety ve speciálním prostředí. Lékař zkoumá typy kolonií mikrobiálních útvarů. Metoda je nejdelší, ale umožňuje prokázat diagnózu. Používá se velmi zřídka, přesně z důvodu dlouhého časového období, které není vždy vhodné pro pacienta.

Analýza pcr sputa pro tuberkulózu

PCR je zkratka pro lékařský termín polymerázová řetězová reakce. Diagnostika je jedním z nejnovějších vědců. To bylo otevřeno v roce 1983, význam objevu je oceňován na světě, vědec získal nejvyšší uznání - Nobelova cena.

Metoda je založena na použití genetického inženýrství. Jeho všestrannost v potřebě malého množství materiálu pro přesnou diagnózu. Identifikace infekce tuberkulózou je opravdu v prvních hodinách infekce, bez čekání na vývoj onemocnění.

Podstata metody, kterou je polymeráza:

• pacient vezme fragment DNA částic;
• provádět biologickou syntézu materiálu;
• určeno třídou mikroorganismů.

Tento proces je technologicky složitý, zahrnuje molekulárně genetické vyšetření. PCR na tuberkulózu trvá doslova několik hodin. Doba potřebná pro jiné metody nemůže být porovnána s ním v rychlosti. Po absolvování analýzy pacient čeká na detekci původce. Proces, který je základem pouze odborníka, může pochopit. Běžný člověk nerozumí složitosti metody.

Jak je diagnostikována tuberkulóza:

1. Vezměte potřebný materiál pro analýzu. Co by to mohlo být: krev, žaludek, sputum, voda, umyté průduškami.
2. Typ materiálu se volí v závislosti na typu infekce možného patogenu.
3. Dalším krokem je studium řetězového spojení. Dva řetězy jsou vystaveny vysokým teplotám až 98 stupňů. Stádium se nazývá denaturace (destrukce strukturního řetězce DNA). Doba expozice - až 2 minuty.
4. Další fází je žíhání. Teplota se sníží, primer se nechá navázat na řetězec DNA.
5. V důsledku toho dochází k prodloužení - syntéze molekul nezbytných pro tento proces.

Pro takovou analýzu je vyžadováno speciální vybavení. Je to drahé, takže není k dispozici v žádném zdravotnickém zařízení. PCR se provádí v obtížných případech, kdy neexistuje přesný výsledek konvenčních diagnostických metod, není možné provádět instrumentální metody kontroly stavu pacienta.

Výhody technologie PCR:

1. Rychlost dosažení výsledku. Přibližně 5 hodin má lékař přesné údaje. Tato rychlost vám umožní pomoci pacientovi v případě nouze. Častěji se jedná o předoperační období.
2. Povoleno, pokud nelze použít jiné metody. Například časté opakování rentgenových paprsků vede k záření. PCR není pro pacienta nebezpečná.
3. Můžete zkoumat jakékoliv biologické prostředí. Jsou identifikovány i komplexní formy tuberkulózy.
4. Metoda je tedy bezpečná pro děti.
5. Infekce je detekována v každém stadiu.
6. PCR neumožňuje skrýt ani malý počet bakteriálních mikroformací.
7. Vhodné pro kontrolu možného opakovaného výskytu tuberkulózy.

Kolik analýzy sputum pro tuberkulózu

Vzorky se odebírají více než jednou. Opakování vylučuje možnost chyb nebo získání nekvalitního materiálu, který neodráží skutečnou polohu a stav pacienta. Kolikrát sbírat sputum, řekněte ošetřujícímu lékaři. Nejlepší volba je třikrát denně. Někdy mohou být vyžadovány další vzorky. Během které doby shromažďují:

1. Před jídlem ráno.
2. 3-4 hodiny po prvním testu.
3. Druhý den, také před jídlem.

Tuberkulóza je nebezpečné onemocnění, které může ovlivnit tělo jakékoli osoby. Existuje mnoho situací infekce. Při jakémkoliv podezření na možnost infekce nečekejte na jasné příznaky. Měla by být testována, vyšetřena a včas zahájena léčba.

PCR diagnostika tuberkulózy

Tuberkulóza je specifická infekce, její zaměření může být v lidských tkáních po celá léta a pak se šíří několik měsíců. Jedná se o chronické onemocnění, jehož optimální léčebné režimy je obtížné vybrat. Jedním z důvodů je pozdní diagnostika, kdy se mykobakterie, zatímco v lidském těle, již přizpůsobily mnoha lékům.

Jaké moderní metody diagnózy existují? PCR diagnostika - co to je? Jaký je tento výzkum? V jakých případech je tuberkulóza diagnostikována touto metodou a jaká je její podstata?

Co je to PCR diagnostika

Je to jedna z nejmodernějších metod diagnostiky nejen nemocí, ale také detekce biologického materiálu. PCR diagnostika byla vynalezena relativně nedávno. Asi před 30 lety v roce 1983, americký biochemik, Carey Banks Mullis, navrhl komplexní schéma obnovy biologického materiálu mikroorganismů v jednom krátkém segmentu. Díky jeho objevu získal vědec nejvyšší cenu - Nobelovu cenu.

Co je to - PCR diagnostika infekcí? Polymerázová řetězová reakce (PCR) je diagnóza detekce virových onemocnění, založená na metodách genetického inženýrství. Je široce používán v lékařské mikrobiologii, imunologii a virologii. Metoda je univerzální a pomáhá diagnostikovat malé množství materiálu. Infekce může být detekována doslova v prvních hodinách infekce, dlouho předtím, než se objeví první příznaky onemocnění.

Metoda spočívá v tom, že z materiálu od nemocného není získán samotný patogen, nýbrž fragmenty genomu (částice DNA), jeho biosyntéza s následným určením, do které třídy mikroorganismů získaný genetický materiál patří, pomocí molekulárně genetických metod.

Navzdory skutečnosti, že se jedná o komplexní proces, trvá mnohem méně času než mnoho biologických metod detekce infekčních agens. Během několika hodin lze pomocí PCR detekovat mikroorganismus. K tomu není nutné izolovat ji od prostředí (krev, mozkomíšní mok, sputum) a pěstovat ji po dlouhou dobu na umělých živných médiích. Stačí, když je ve studovaném materiálu přítomen malý fragment řetězce DNA infekčního činidla.

Základem reakce je možnost za umělých podmínek (in vitro) vytvořit syntézu molekul nukleové kyseliny infekčního agens.

Co je potřeba pro PCR?

1. Primery jsou segmenty DNA, ze kterých začíná biosyntéza nebo tvorba.
2. Nukleotidy nebo komplexní sloučeniny, které jsou základem molekuly DNA nebo RNA.
3. Polymerázová řetězová reakce není možná bez přítomnosti polymerázy, což je enzym urychlující PCR.

Fáze diagnostiky PCR

Jak probíhá molekulární diagnostika pomocí PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátkou dobu s ohledem na sběr materiálu.

1. Před zahájením studie si vezmou potřebný biologický materiál - to je voda z průdušek, krev, obsah žaludku, sputum. Typ biologického materiálu závisí na podezřelém patogenu.
2. Denaturace nebo zničení primární struktury DNA, která se skládá ze dvou řetězců. Podstatou této fáze je oddělení dvou řetězců pod vlivem vysoké teploty (maximum je 98 ° C, které trvá ne déle než dvě minuty).
3. V dalším stadiu PCR, zvaném annealing, se teplota sníží o několik stupňů, takže se primer naváže na DNA řetězec.
4. Prodloužení, během kterého probíhá syntéza požadovaných molekul přímo.

Výsledkem je, že pouze 25–30 takových cyklů obdrží potřebný počet kopií DNA mikroorganismu, které lze snadno rozpoznat.

Vyžaduje PCR diagnózu tuberkulózy?

Není možné, aby všichni lidé s podezřením na tuberkulózu prováděli PCR, protože tento způsob vyžaduje drahé vybavení. Ne všechny veřejné kliniky si to mohou dovolit koupit. Navíc se tak stalo, že obvyklé metody diagnostiky infekce ve většině případů se také ospravedlňují.

Patří mezi ně:

• průzkum pacientů, historie;
• úplné vyšetření osoby;
• studie s použitím tuberkulinového testu Mantoux;
• radiografie nebo fluorografie;
• počítačová diagnostika v případě potřeby;
• metody mikrobiologického výzkumu: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetření sputa.

PCR pro tuberkulózu se provádí ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo není možné provádět jiné instrumentální metody.

I přes hojnost diagnostických metod stále roste výskyt tuberkulózy. V současné době nejde jen o jeho růst, ale i další funkce:

• onemocnění se často vyskytuje v těžké formě;
• počet smrtelných případů se zvyšuje;
• stále odolnější vůči moderní chemoterapii jsou diagnostikovány formy onemocnění.

Neochota samotných lidí každoročně podstoupit rutinní lékařská vyšetření, odmítnutí očkování vede k šíření tuberkulózy. V takových podmínkách potřebujeme rychlé, informativní a účinné výzkumné metody, které by měly být přístupné dětem i dospělým. Všechny výše uvedené diagnostické metody jsou mnohem horší než PCR.

Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocí PCR

Tento výzkum, i když nový, se osvědčil, zejména v kontroverzních případech, kdy není možné provést diagnózu z několika důvodů.

Díky PCR je mnohem snazší detekovat původce tuberkulózy v testovaném materiálu.

Výhody PCR diagnostiky jsou následující.

1. Jedná se o rychlou analýzu. Malý fragment molekuly DNA může být použit k diagnostice během pouhých několika hodin (asi pět), která se úspěšně používá v nouzových situacích, kdy například před operací je nutné určit, zda je člověk nemocný tuberkulózou.
2. PCR analýza je povolena v případě, kdy jsou jiné metody nedostupné nebo zakázané (pro detekci plicní tuberkulózy, někdy musíte vzít několik radiografických snímků, což bude velká dávka záření).
3. Pomocí PCR se vyšetřuje biologické prostředí na přítomnost patogenu. Například můžete provést studii mozkomíšního moku, pokud existuje podezření na tuberkulózní meningitidu.
4. Povolena PCR diagnostika infekčních onemocnění u dětí, protože metoda je bezpečná.
5. Umožňuje identifikovat patogen v jakékoli fázi onemocnění.
6. Vysoká citlivost PCR umožňuje detekci Mycobacterium tuberculosis, i když je v biologickém materiálu pouze několik mikroorganismů.
7. Je dobré provádět diagnózu recidivy onemocnění.

Přečtená PCR se zdá být téměř dokonalou diagnostickou metodou, která by měla mít podezření na tuberkulózu. Existují však i nevýhody, které je třeba vzít v úvahu.

Nevýhody PCR v diagnostice tuberkulózy

V naší době je taková diagnostika vzácnější než pravidelnost. A pro to je důvod.

1. Jedná se o nákladnou výzkumnou metodu. Na mnoha klinikách chybí vybavení pro PCR kvůli jeho vysokým nákladům, ale analýza může být stále prováděna v placených laboratořích.
2. Ihned po ošetření mohou být v lidském těle stále přítomny mrtvé mykobakterie nebo žijící v malých množstvích (výsledek bude pozitivní během diagnostiky PCR), takže metoda bude v této době nespolehlivá, nemá smysl ji provádět.
3. Výsledkem mutací mykobakterií je neúčinná PCR - nelze syntetizovat normální sekvenci řetězce DNA.
4. Je nutné zvolit správné prostředí pro studii, krev je odebírána pouze v případě, že je podezřelá z infekce (sepse), není třeba brát sputum, pokud existuje otázka tuberkulózy orgánů nervového systému. V tomto případě nebude PCR schopna detekovat patogen a diagnóza bude neinformativní.

Indikace pro detekci tuberkulózy pomocí PCR analýzy

PCR diagnostika tuberkulózy se provádí nejčastěji v kontroverzních případech. Kdy lékaři tuto studii doporučují?

1. Pokud je obtížné provést diagnózu obvyklými dostupnými metodami, byl kontakt s pacientem s tuberkulózou.
2. V případě, že osoba nemůže být doručena na kliniku, aby podstoupila rutinní rutinní testy na tuberkulózu, je snazší jej vyšetřit pomocí PCR, protože sputum pro test může být dodáno do nádoby a diagnóza je potvrzena během několika hodin.
3. Pokud má člověk nouzovou operaci a je naléhavé zjistit, zda je nemocný tuberkulózou.
4. Pokud je to nutné, těhotná žena je také lepší vyšetřit na tuberkulózu pomocí PCR, protože metoda je bezpečná.
5. Každý, kdo nebyl diagnostikován tuberkulózou, byl na základě placení potvrzen bakteriologickými metodami a fluoroskopií. To se děje, když je léze v plicích nepostřehnutelná v přímém obraze, a osoba, která během studie dodala sputum, nemohla dodržovat doporučení pro správný sběr materiálu. V tomto případě se člověk obává všech příznaků charakteristických pro plicní tuberkulózu.
6. Když existují pochybnosti o výsledcích testu Mantoux.
7. Je vhodnější provést PCR diagnostiku tuberkulózy u dětí. Tento postup je bezpečný, nevytváří další ozáření a je účinný při detekci obtížně diagnostikovatelných forem onemocnění.

Včasná diagnóza tuberkulózy je klíčem k řádně předepsané léčbě a snížení šíření nemoci. Často známé metody detekce onemocnění nejsou vždy účinné. Proto je dnes PCR jednou z nejspolehlivějších a nejbezpečnějších způsobů detekce infekce v raných fázích jejího vývoje.

PCR analýza

PCR (polymerázová řetězová reakce) je zdaleka nejrychlejší a nejspolehlivější metodou diagnostiky infekčních onemocnění.

Princip metody polymerázové řetězové reakce vyvinul Kary Mullis v roce 1983. K jeho objevu získal K. Mullis v roce 1993 Nobelovu cenu za chemii.

Metoda PCR umožňuje dosáhnout významného zvýšení malých koncentrací některých fragmentů nukleové kyseliny (DNA) v biologickém materiálu (vzorek). Metoda je založena na vícenásobném selektivním kopírování (amplifikaci) určitého úseku DNA za použití enzymů za umělých podmínek.

Výhody diagnostické metody PCR jako diagnostické metody pro infekční onemocnění

Přímá detekce patogenů

Mnoho tradičních diagnostických metod, jako je enzymová imunoanalýza, detekuje proteinové markery, které jsou produkty vitální aktivity infekčních agens, což poskytuje pouze nepřímý důkaz přítomnosti infekce. Identifikace specifické oblasti DNA patogenu metodou PCR poskytuje přímou indikaci přítomnosti patogenu.

Vysoká specificita

Vysoká specifičnost metody PCR je způsobena skutečností, že ve studovaném materiálu je detekován unikátní fragment DNA. Specifičnost je určena nukleotidovou sekvencí primerů, což vylučuje možnost získání falešných výsledků, na rozdíl od imunologických metod analýzy, kde jsou chyby v souvislosti se zkříženě reagujícími antigeny časté.

Vysoká citlivost

Metoda PCR umožňuje detekovat i jednotlivé buňky bakterií nebo virů. PCR analýza odhalila přítomnost patogenů infekčních nemocí v případech, kdy to nemohou udělat jiné metody (imunologické, bakteriologické, mikroskopické). Citlivost PCR analýzy je 10-100 buněk na vzorek (citlivost imunologických a mikroskopických testů je 103-105 buněk).

Univerzálnost postupu pro detekci různých patogenů

Materiál pro studium pomocí PCR je DNA patogenu. Metoda je založena na detekci DNA fragmentu nebo RNA, která je specifická pro konkrétní organismus. Podobnost chemického složení všech nukleových kyselin umožňuje využití jednotných metod laboratorního výzkumu. To umožňuje diagnostikovat několik patogenů z jednoho biotestu.

Výsledkem je vysoká rychlost analýzy

Pro PCR analýzu není nutná izolace a kultivace kultury patogenu, což trvá mnoho času. Jednotný způsob zpracování biomateriálu a detekce reakčních produktů a automatizace amplifikačního procesu umožňují provést kompletní analýzu za 4-5 hodin.

Schopnost diagnostikovat nejen akutní, ale i latentní infekce

Metoda PCR je zvláště účinná pro diagnostiku obtížně kultivovatelných, nekultivovaných a perzistentních forem mikroorganismů, se kterými se často setkáváme při latentních a chronických infekcích, protože tato metoda se vyhne potížím spojeným s pěstováním těchto mikroorganismů v laboratoři. Použití PCR diagnostiky je také velmi účinné proti patogenům s vysokou antigenní variabilitou a intracelulárními parazity.

Jak účinné je vyšetření na tuberkulózu sputem pomocí PCR?

Pro identifikaci Kochových tyčinek u lidí se používají různé diagnostické metody. Díky němu lze patologii detekovat i v počáteční fázi, což zvyšuje šance pacienta na zotavení. Analýza sputum pro tuberkulózu je technika, která je nejvíce ceněna a je poměrně účinná. Co to je a kolik stojí taková analýza?

Jaká je analýza sputa pomocí PCR?

PCR znamená polymerázovou řetězovou reakci. Tato metoda je účinná proti infekčním onemocněním. Chcete-li stanovit jasnou diagnózu, nemusíte sbírat velké množství biomateriálu a čekat dlouho, jako v případě setí sputa.

Metoda je založena na získání DNA mikroorganismů. Dále molekulárně genetický výzkum určí, jaký typ mikroorganismů by měl obsahovat dostupný materiál. V podmínkách testovacích zkumavek odborník syntetizuje molekuly bakterií a učiní příslušné závěry během několika hodin.

Účinnost

Analýza sputa pro Mycobacterium tuberculosis je účinná, když Kochova hůlka zasáhla dýchací systém. V tomto případě lze nemoc snadno identifikovat, a to iv prvních hodinách infekce.

Analýza sputem však neprokáže spolehlivý výsledek, pokud je přítomna tuberkulóza:

• kosti;
• mozek, mícha;
• nervový systém;
• spoje atd.

Fiatriatr bude schopen určit typ onemocnění s přihlédnutím k současným symptomům a spoléhat se na výsledky obecných a dalších analýz.

Je také nevhodné pro takový způsob výzkumu v případě, kdy potřebujete provést kontrolní analýzu po terapeutické léčbě onemocnění. Výsledek bude pozitivní, stejně jako v těle, v každém případě stále existuje živá nebo mrtvá IBC. Je lepší dát přednost dalšímu diagnostickému postupu.

Kontraindikace metody

Neexistují tedy žádné kontraindikace pro testování tuberkulózy sputem pomocí PCR. Existují omezení. Jak je uvedeno výše, není nutné jej provádět po léčbě tuberkulózy. Výsledky nebudou užitečné. Zde je žádoucí uchýlit se k jiné diagnóze.

Kromě toho pro tuto diagnózu neexistují žádné další překážky. Sputum může být vyšetřeno ve všech věkových kategoriích a všech souvisejících onemocněních. I když není hojné uvolňování sputa, analýza může být provedena odebráním hlenu pomocí bronchoskopie.

Výhody

V této metodě, množství plusy, tito zahrnují: t

1. Vysoká specificita a citlivost. Je detekován pouze původce tuberkulózy. Neexistuje žádná falešná odpověď, pokud budou vzaty v úvahu všechny nuance postupu. Mykobakterie jsou detekovány i při jejich minimálním počtu. I když je v odebraném materiálu 10 abnormálních buněk, infekce bude detekována.
2. Rychlost získání odpovědi. Jak moc se provádí analýza? Po 3-5 hodinách můžete získat výsledek. Není třeba dělat kultivaci sputa pro tuberkulózu, což zkracuje čas.
3. Můžete se identifikovat jako skrytá infekce a ta, která je v akutní formě.
4. Neexistují žádné absolutní kontraindikace. To umožňuje provádět postup pro všechny bez výjimky (i pro malé děti), a to zejména v případech, kdy nejsou vyřešeny jiné metody.
5. Pomocí PCR diagnostiky jsou studovány různé biomateriály (moč, výkaly, krev, sliny, mozkomíšní mok atd.).
6. Metoda odhaluje tuberkulózu v raných stadiích, v prvních hodinách po infekci.

na obsah ↑

Nevýhody

Kromě pozitivních stránek existují i ​​negativní. To je:

1. PCR analýza je drahá „radost“. V každém zdravotnickém středisku není navíc k dispozici vybavení nezbytné pro jeho realizaci. V klinikách je to zřídka přítomné, protože jeho hodnota je také skvělá. Pokud mluvíme o soukromých klinikách, pak ano, můžete najít tento druh diagnózy. Nechte se, bohužel, ne každý.
2. To ukazuje falešně pozitivní výsledek u těch lidí, kteří nedávno podstoupili léčbu tuberkulózy.
3. Pokud je MBC mutován, může metoda také poskytnout falešné výsledky.
4. Pokud je materiál sbírán nesprávně, nebo odborník, který provádí výzkum, nemá dostatečnou kvalifikační úroveň, je možná i porucha. V některých případech bude nutné postup opakovat několikrát a pokaždé, když se platba opakuje.

na obsah ↑

Příprava na analýzu

Aby materiál měl vysokou kvalitu, musí být správně smontován a musí být na něj řádně připraven.

Existují určitá pravidla pro sběr sputa pro tuberkulózu. Akční algoritmus je následující:

1. I v předvečer, ve večerních hodinách člověk potřebuje pít vykašlávání (pokud se sputum pohybuje špatně). I když to nepomohlo, inhalace by měla být prováděna na základě léčivého ředicího a vykašlávacího léku. V nepřítomnosti sputa je pacient zaměřen na bronchoskopii. Během tohoto postupu je materiál pro studii odebrán.
2. Předem si zakupte speciální kontejner. Je sterilní a vzduchotěsný, takže tam není možné nic navíc, stejně jako předem otevřené.
3. Místnost, kde bude sputum shromažďováno, by měla být dobře větraná. Je nutné otevřít okna, dveře, zapnout kapotu. Další dobrou volbou je dostat čerstvý vzduch (například na balkon nebo do dvora).
4. Bezprostředně před zákrokem musíte všechny varovat, aby nikdo nevstoupil do místnosti, kde se všechno stane. V biomateriálu by neměly být žádné další mikročástice - to je důležité.
5. Nedoporučujeme jíst před vychystáváním.
6. Oplach úst a hrdla.
7. Slin se vylévá ven. Jeho kapacita by měla klesnout na minimum.
8. Při kašlání člověk vyndá flegma a vyplivne ho do připravené nádoby. Po zákroku pevně uzavřete víko a vzorek odeberte do laboratoře.

Jak sbírat sputum by měl informovat lékaře. Pokud se pacient neodváží udělat to na vlastní pěst, pak zdravotníci přijdou na záchranu. Během manipulace si nasadili speciální ochrannou masku. Sbírat sputum bude ve speciální místnosti, kde pro cizince neexistuje žádný způsob. Pokud pacient nemůže přijít na kliniku, přijde specialista do svého domu a pomůže sbírat hlen.

Pokud se provede bronchoskopie, pacient se injikuje do průdušnice přístrojem - bronchoskopem. S jeho pomocí je materiál odebrán.

Pro spolehlivost je vhodné provést analýzu třikrát, a to:

• ráno nalačno;
• poprvé po 4-5 hodinách;
• 24 hodin po první studii a také před jídlem.

na obsah ↑

Jak se tato analýza provádí?

Absolvování testu na tuberkulózu je pouze součástí práce. Hlavní dopředu. Hodně záleží na tom, jak se připravil specialista.

Průběh studie je následující:

1. Specialista postupuje ke zničení primární struktury DNA (denaturace). Jsou zde dva řetězce. Při vysokých teplotách se oddělují.
2. V dalším stupni se teplota sníží (žíhá). To je nezbytné pro spojení řetězce DNA s primerem.
3. Třetí etapou je prodloužení. Zde jsou syntetizovány potřebné molekuly.

na obsah ↑

Výsledky dekódování

Mycobacterium tuberculosis ve sputu pomocí PCR lze detekovat či nikoliv. Pozitivní výsledek je založen na skutečnosti, že v biomateriálu se nachází DNA Koch. To naznačuje, že osoba je infikována. S negativní - 98% skutečnosti, že subjekt není infikován.

Ukazatele lze posuzovat podle:

• jaká fáze patologie (latentní nebo aktivní);
• jak moc je tělo postiženo;
• zda je zvolená léčba účinná v konkrétním případě.

Mějte na paměti, že nic není důkladné. Proto může být falešně pozitivní nebo falešně negativní výsledek. Pro zajištění její správnosti se doporučují další diagnostické postupy nebo dvakrát (třikrát).

Analýza nákladů v různých centrech

Na různých klinikách můžete dávat sputum pro PCR. Dovolte nám uvést příklady několika populárních moskevských center s cenovou politikou.

PCR sputum analýza tuberkulózy

Mycobacterium tuberculosis (tuberkulóza), DNA (PCR), vysoce kvalitní, sputum

Zvláštní studijní příprava není nutná.

Zkušební materiál: Sputum

Tuberkulóza (z latiny. Tuberkulum - "tubercle") - specifické infekční onemocnění lidí a zvířat, které je přenášeno hlavně kapkami. Riziko infekce se zvyšuje v důsledku snížení imunity způsobené HIV / AIDS, chronickým onemocněním ledvin, cukrovkou, těhotenstvím, stárnutím, transplantací orgánů a souvisejícími látkami potlačujícími imunitní systém. Navíc děti mladší 5 let po tuberkulinovém testu a ti, kteří mají kontakt s pacienty s tuberkulózou, jsou náchylnější k onemocnění. Mezi nejzranitelnější skupiny patří bezdomovci, vězni, narkomani a starší osoby.

Tuberkulóza lidí a zvířat způsobuje několik blízce příbuzných druhů mykobakterií. Nejčastějším původcem tuberkulózy u lidí je druh Mycobacterium tuberculosis.

Po identifikaci původce tuberkulózy je nutné provést průzkum citlivosti mykobakterií zjištěných na léky proti tuberkulóze. Tento postup je velmi důležitý pro určení adekvátní léčby onemocnění.

Tato analýza umožňuje stanovit přítomnost genetického materiálu (DNA) mycobacterium tuberculosis ve sputu. Analýza pomáhá při diagnostice plicní tuberkulózy.

Metoda PCR je polymerázová řetězová reakce, která umožňuje identifikaci přítomnosti genetického materiálu v biologickém materiálu.
Více informací o metodě PCR - jejích variantách, výhodách a aplikacích v lékařské diagnostice.

Referenční hodnoty - Norma
(Mycobacterium tuberculosis (tuberkulóza), DNA (PCR), kvalitativní, sputum)

Informace týkající se referenčních hodnot ukazatelů a složení ukazatelů zahrnutých do analýzy se mohou v závislosti na laboratoři mírně lišit!

Normálně DNA mycobacterium tuberculosis chybí ve sputu.

Č. 341MK, Mycobacterium tuberculosis, stanovení DNA (Mycobacterium tuberculosis, DNA) ve sputu, výplachech, výplachové tekutině

Stanovení DNA patogenů tuberkulózy: Mycobacterium komplex: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum ve sputu, výplachy z průdušek, výplachová kapalina metodou polymerázové řetězové reakce (PCR) s detekcí v „reálném“ režimu času.

Tuberkulóza (z latiny. Tuberkulum - tuberkulóza) - běžné, sociálně závislé onemocnění člověka. Jsou nemocní a zvířata. Kauzální původce tuberkulózy byl objeven R. Kochem v roce 1882. Jedná se o kyselinovzdorné aerobní bakterie (74 druhů) rodu mycobacterium, široce distribuované v půdě, vodě a na zvířatech. U lidí je nejčastějším patogenem Mycobacterium tuberculosis. Druhou nejčastější je Mycobacterium bovis. Oba druhy jsou velmi odolné vůči mnoha faktorům prostředí a zůstávají životaschopné v těle po velmi dlouhou dobu a mohou způsobit onemocnění mnoho let po infekci. Je velmi důležité, aby mycobacterium tuberculosis mohla tvořit tzv. L-formy. Přetrvávají v těle a vytvářejí imunitu vůči tuberkulóze. Dlouhodobě se tuberkulóza může objevit latentně a může být detekována náhodně, i když se často projevují příznaky jako slabost, únava, nízká horečka, noční pocení a anémie a leukopenie.

V současné době, přes všechny úspěchy antimikrobiální terapie, tuberkulóza ohrožuje budoucnost národa. Proto jsou všechny diagnostické metody, zejména jejich latentní formy, nesmírně důležité.

Existuje mnoho metod laboratorní diagnostiky tuberkulózy: mikroskopická analýza (nejčastěji používaná pro tento účel sputum), klasická kultivační metoda, ELISA. Všechny mají své výhody, ale také určité nevýhody, zejména zjištění mykobakterií pouze v případě jejich dostatečného počtu.

V posledních letech byla pro diagnózu použita polymerázová řetězová reakce (PCR). Jeho vysoká citlivost umožňuje detekci jednotlivých buněk a dokonce fragmentů DNA ve studovaném materiálu. Metoda eliminuje zkřížené reakce a specificita dosahuje 100%. PCR umožňuje diferencovat omezené a rozšířené formy tuberkulózy, zejména u dětí, i při negativních výsledcích mikrobiologických studií.

Analytické ukazatele:

• detekovatelné fragmenty mykobakteriální DNA specifické pro fragmenty;
• specifičnost stanovení - 100%;
• citlivost detekce - 100 kopií mykobakteriální DNA ve vzorku.

• Bronchitida, bronchopneumonie doprovázená prudkým nárůstem bazálních lymfatických uzlin.
• Hemoptýza na pozadí běžného astenického stavu.
• Akutní zánět horních a dolních dýchacích cest, doprovázený produktivním kašlem v přítomnosti dlouhodobého kontaktu s pacientem s tuberkulózou v anamnéze t

Interpretace výsledků výzkumu obsahuje informace pro ošetřujícího lékaře a není diagnózou. Informace v této části nelze použít pro vlastní diagnostiku a samoléčbu. Přesná diagnóza je prováděna lékařem s využitím výsledků tohoto vyšetření a nezbytných informací z jiných zdrojů: anamnéza, výsledky dalších vyšetření apod.

Kvalita testu. Výsledek je dán výrazem "zjištěno" nebo "nezjisteno".

„Detekováno“: Ve vzorku, který má být analyzován, byly nalezeny specifické fragmenty DNA specifické pro mykobakterie specifické pro mykobakterie.

„Nezjisteno“: v analyzovaném vzorku nebyly mykobakteriální specifické DNA fragmenty nebo koncentrace patogenu ve vzorku nalezeny pod hranicí citlivosti testu.

Věnujte pozornost, že časování studií PCR může být zvýšeno při provádění potvrzujících testů.

1. Makarevich A.E. Respirační nemoci - M. Vyšší škola, 2000 - 368 str.
2. Jacobs D. a kol. Laboratorní zkušební příručka / Lexi-Comp. 2002 - pp. 828 - 829.

• Obecné informace

* Uvedená doba nezahrnuje den převzetí biomateriálu

Sputum, tampony, tekutina na výplach

Detekce PCR v reálném čase.

V této sekci můžete zjistit, kolik to stojí za dokončení této studie ve vašem městě, viz popis testu a tabulka výsledků interpretace. Výběr místa, kde se má provést analýza „Mycobacterium tuberculosis, stanovení DNA (Mycobacterium tuberculosis, DNA) ve sputu, výplachech, tekutině z výplachu“ v Moskvě a dalších městech Ruska Regionální lékařské ordinace se mohou lišit.

Metody testování sputa pro tuberkulózu

Analýza sputum pro tuberkulózu je zahrnuta v souboru diagnostických opatření nezbytných k identifikaci a objasnění diagnózy. Obsah sputa pomůže vytvořit kompetentní léčebný režim.

Jak projít testem na sputum na tuberkulózu

Lékaři vyvinuli pravidla pro provádění analýzy. Sliny se sbírají v dopoledních hodinách před tím, než osoba měla snídaně. Nejprve pacient provede hygienické procedury:

• Čištění zubní skloviny;
• důkladné opláchnutí čistou vodou ústní dutiny a hltanu.

Poté začíná okamžité dodání materiálu pro analýzu. Jak projít testem sputa? Požadavky na postup:

1. Příprava začíná předem, večer. Pacientovi se doporučuje, aby užíval speciální léky, které učiní plicní sekreci přirozenější. Jedná se o vykašlávání a ředění sloučenin. Pokud takové postupy nepomohou, proveďte inhalaci farmaceutickou kompozicí pro vykašlávání.
2. Připravte nádoby na sputum. Mucus musí být sbírán do sterilizovaných nádob, těsně uzavřen, pevně uzavřen.
3. Před porodem vykašlete a vyplivněte do nádoby. Objem slin by neměl být velký, vyžaduje si sputum z hrtanu. Bakterie ústní dutiny jsou v analýze cizí.
4. Sliny sbírejte v místnosti s vynikající ventilací. Analýza se provádí otevřením příčníku a spuštěním odsavače par. Doporučuje se otevřít okna, nebo jít ven na čerstvý vzduch.

Během procedury v místnosti je zakázáno vstupovat. Outsiders mohou přispět k mikroflóře kanceláře, a tak k sputum, patologickým formacím. Zdravotníci obdrží analýzu ve speciální masce (respirátor).

Analýza sputum transkriptu tuberkulózy

Dekódování začíná pohledem na vzhled hlenu. Patologie charakterizuje změnu barvy - ztmavne, s viditelnými příměsemi krve. Barva není hlavním indikátorem. Sputum ztmavne od pití červeného vína, vášeň kávy. Některé léky a barevné nápoje mění vzhled hlenu.

Shromážděný materiál je dešifrován dvěma ukazateli, to znamená, že lékaři mají dva výsledky:

Pozitivní odpověď

Analýza výsledného sputa potvrzuje přítomnost onemocnění v těle. Co to potvrzuje:

• cizí látky nebo neznámé inkluze;
• přítomnost sliznic hlenu;
• viditelné pruhy;
• nepříjemný hnisavý nebo infekční zápach;
• hnis.

Metoda makroskopického výzkumu poskytuje další údaje:

• fibrinové vazby;
• Kochové formace čoček;
• produkty z rozkladného rozkladu bakteriálních látek;
• zbytky patologického procesu v plicní tkáni.

Pozitivní výsledek ukazuje zvýšené množství proteinových sloučenin. Dosahuje 100-120 g / l.

Další mikroskopická metoda umožňuje identifikovat další nebezpečné prvky:

• alveolární makrofágy;
• nadhodnocené složení leukocytů;
• vysoká míra lymfocytů.

Pro tuberkulózu se člověk často plivne z úst. Hemoptýza zvyšuje tvorbu červených krvinek. Objem slin v ústech je takový, že ho člověk nemůže polknout, aniž by si toho všiml. Je to více než ve zdravém stavu.

Negativní odpověď

Studie ukazuje, že počet leukocytů je malý, odpovídá normě. Mikrobakterie také nejsou detekovány. Pokud pacient není zdravý, odborník předepíše další vyšetření. Je možné, že onemocnění souvisí s plicním onemocněním. Typy a metody další diagnostiky závisí na symptomech a stavu pacienta.

Jak se studuje hlen

Tuberkulóza je nebezpečným patologickým účinkem na plicní tkáň, je pozorována jejich dezintegrace. Analýza se provádí několika metodami. Nejběžnější - ELISA (imunotest). Podstata metody:

1. Protilátky jsou přidány do roztoku, ve kterém je umístěna část sputa.
2. Zkontrolujte koncentraci antigenů ve srovnání s normou zdravého těla.
3. Určete aktivitu patologického prostředí.
4. Diagnostikujte.

Druhou verzí laboratorního výzkumu jsou ODPADY. Pro tuto metodu vezměte speciální zdravotnické vybavení. Podstata výzkumu hardwaru:

1. V sputu byl mikroprostředí vstřikován pro zamýšlený typ infekce.
2. Přístroj začne růst u určitých teplotních kmenů bakterií.
3. Oxid uhličitý je produkován v procesu, a senzory vyzvednout.
4. Plyn se kombinuje s barvivem.
5. Na fluorescenčním indexu vyvozte závěry o typu onemocnění.

Nejjednodušší způsob je kulturní. Hleny zasety ve speciálním prostředí. Lékař zkoumá typy kolonií mikrobiálních útvarů. Metoda je nejdelší, ale umožňuje prokázat diagnózu. Používá se velmi zřídka, přesně z důvodu dlouhého časového období, které není vždy vhodné pro pacienta.

Analýza pcr sputa pro tuberkulózu

PCR je zkratka pro lékařský termín polymerázová řetězová reakce. Diagnostika je jedním z nejnovějších vědců. To bylo otevřeno v roce 1983, význam objevu je oceňován na světě, vědec získal nejvyšší uznání - Nobelova cena.

Metoda je založena na použití genetického inženýrství. Jeho všestrannost v potřebě malého množství materiálu pro přesnou diagnózu. Identifikace infekce tuberkulózou je opravdu v prvních hodinách infekce, bez čekání na vývoj onemocnění.

Podstata metody, kterou je polymeráza:

• pacient vezme fragment DNA částic;
• provádět biologickou syntézu materiálu;
• určeno třídou mikroorganismů.

Tento proces je technologicky složitý, zahrnuje molekulárně genetické vyšetření. PCR na tuberkulózu trvá doslova několik hodin. Doba potřebná pro jiné metody nemůže být porovnána s ním v rychlosti. Po absolvování analýzy pacient čeká na detekci původce. Proces, který je základem pouze odborníka, může pochopit. Běžný člověk nerozumí složitosti metody.

Jak je diagnostikována tuberkulóza:

1. Vezměte potřebný materiál pro analýzu. Co by to mohlo být: krev, žaludek, sputum, voda, umyté průduškami.
2. Typ materiálu se volí v závislosti na typu infekce možného patogenu.
3. Dalším krokem je studium řetězového spojení. Dva řetězy jsou vystaveny vysokým teplotám až 98 stupňů. Stádium se nazývá denaturace (destrukce strukturního řetězce DNA). Doba expozice - až 2 minuty.
4. Další fází je žíhání. Teplota se sníží, primer se nechá navázat na řetězec DNA.
5. V důsledku toho dochází k prodloužení - syntéze molekul nezbytných pro tento proces.

Pro takovou analýzu je vyžadováno speciální vybavení. Je to drahé, takže není k dispozici v žádném zdravotnickém zařízení. PCR se provádí v obtížných případech, kdy neexistuje přesný výsledek konvenčních diagnostických metod, není možné provádět instrumentální metody kontroly stavu pacienta.

Výhody technologie PCR:

1. Rychlost dosažení výsledku. Přibližně 5 hodin má lékař přesné údaje. Tato rychlost vám umožní pomoci pacientovi v případě nouze. Častěji se jedná o předoperační období.
2. Povoleno, pokud nelze použít jiné metody. Například časté opakování rentgenových paprsků vede k záření. PCR není pro pacienta nebezpečná.
3. Můžete zkoumat jakékoliv biologické prostředí. Jsou identifikovány i komplexní formy tuberkulózy.
4. Metoda je tedy bezpečná pro děti.
5. Infekce je detekována v každém stadiu.
6. PCR neumožňuje skrýt ani malý počet bakteriálních mikroformací.
7. Vhodné pro kontrolu možného opakovaného výskytu tuberkulózy.

Kolik analýzy sputum pro tuberkulózu

Vzorky se odebírají více než jednou. Opakování vylučuje možnost chyb nebo získání nekvalitního materiálu, který neodráží skutečnou polohu a stav pacienta. Kolikrát sbírat sputum, řekněte ošetřujícímu lékaři. Nejlepší volba je třikrát denně. Někdy mohou být vyžadovány další vzorky. Během které doby shromažďují:

1. Před jídlem ráno.
2. 3-4 hodiny po prvním testu.
3. Druhý den, také před jídlem.

Tuberkulóza je nebezpečné onemocnění, které může ovlivnit tělo jakékoli osoby. Existuje mnoho situací infekce. Při jakémkoliv podezření na možnost infekce nečekejte na jasné příznaky. Měla by být testována, vyšetřena a včas zahájena léčba.

PCR diagnostika tuberkulózy

Tuberkulóza je specifická infekce, její zaměření může být v lidských tkáních po celá léta a pak se šíří několik měsíců. Jedná se o chronické onemocnění, jehož optimální léčebné režimy je obtížné vybrat. Jedním z důvodů je pozdní diagnostika, kdy se mykobakterie, zatímco v lidském těle, již přizpůsobily mnoha lékům.

Jaké moderní metody diagnózy existují? PCR diagnostika - co to je? Jaký je tento výzkum? V jakých případech je tuberkulóza diagnostikována touto metodou a jaká je její podstata?

Co je to PCR diagnostika

Je to jedna z nejmodernějších metod diagnostiky nejen nemocí, ale také detekce biologického materiálu. PCR diagnostika byla vynalezena relativně nedávno. Asi před 30 lety v roce 1983, americký biochemik, Carey Banks Mullis, navrhl komplexní schéma obnovy biologického materiálu mikroorganismů v jednom krátkém segmentu. Díky jeho objevu získal vědec nejvyšší cenu - Nobelovu cenu.

Co je to - PCR diagnostika infekcí? Polymerázová řetězová reakce (PCR) je diagnóza detekce virových onemocnění, založená na metodách genetického inženýrství. Je široce používán v lékařské mikrobiologii, imunologii a virologii. Metoda je univerzální a pomáhá diagnostikovat malé množství materiálu. Infekce může být detekována doslova v prvních hodinách infekce, dlouho předtím, než se objeví první příznaky onemocnění.

Metoda spočívá v tom, že z materiálu od nemocného není získán samotný patogen, nýbrž fragmenty genomu (částice DNA), jeho biosyntéza s následným určením, do které třídy mikroorganismů získaný genetický materiál patří, pomocí molekulárně genetických metod.

Navzdory skutečnosti, že se jedná o komplexní proces, trvá mnohem méně času než mnoho biologických metod detekce infekčních agens. Během několika hodin lze pomocí PCR detekovat mikroorganismus. K tomu není nutné izolovat ji od prostředí (krev, mozkomíšní mok, sputum) a pěstovat ji po dlouhou dobu na umělých živných médiích. Stačí, když je ve studovaném materiálu přítomen malý fragment řetězce DNA infekčního činidla.

Základem reakce je možnost za umělých podmínek (in vitro) vytvořit syntézu molekul nukleové kyseliny infekčního agens.

Co je potřeba pro PCR?

1. Primery jsou segmenty DNA, ze kterých začíná biosyntéza nebo tvorba.
2. Nukleotidy nebo komplexní sloučeniny, které jsou základem molekuly DNA nebo RNA.
3. Polymerázová řetězová reakce není možná bez přítomnosti polymerázy, což je enzym urychlující PCR.

Fáze diagnostiky PCR

Jak probíhá molekulární diagnostika pomocí PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátkou dobu s ohledem na sběr materiálu.

1. Před zahájením studie si vezmou potřebný biologický materiál - to je voda z průdušek, krev, obsah žaludku, sputum. Typ biologického materiálu závisí na podezřelém patogenu.
2. Denaturace nebo zničení primární struktury DNA, která se skládá ze dvou řetězců. Podstatou této fáze je oddělení dvou řetězců pod vlivem vysoké teploty (maximum je 98 ° C, které trvá ne déle než dvě minuty).
3. V dalším stadiu PCR, zvaném annealing, se teplota sníží o několik stupňů, takže se primer naváže na DNA řetězec.
4. Prodloužení, během kterého probíhá syntéza požadovaných molekul přímo.

Výsledkem je, že pouze 25–30 takových cyklů obdrží potřebný počet kopií DNA mikroorganismu, které lze snadno rozpoznat.

Vyžaduje PCR diagnózu tuberkulózy?

Není možné, aby všichni lidé s podezřením na tuberkulózu prováděli PCR, protože tento způsob vyžaduje drahé vybavení. Ne všechny veřejné kliniky si to mohou dovolit koupit. Navíc se tak stalo, že obvyklé metody diagnostiky infekce ve většině případů se také ospravedlňují.

Patří mezi ně:

• průzkum pacientů, historie;
• úplné vyšetření osoby;
• studie s použitím tuberkulinového testu Mantoux;
• radiografie nebo fluorografie;
• počítačová diagnostika v případě potřeby;
• metody mikrobiologického výzkumu: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetření sputa.

PCR pro tuberkulózu se provádí ve zvláštních případech, kdy je obtížné stanovit diagnózu nebo není možné provádět jiné instrumentální metody.

I přes hojnost diagnostických metod stále roste výskyt tuberkulózy. V současné době nejde jen o jeho růst, ale i další funkce:

• onemocnění se často vyskytuje v těžké formě;
• počet smrtelných případů se zvyšuje;
• stále odolnější vůči moderní chemoterapii jsou diagnostikovány formy onemocnění.

Neochota samotných lidí každoročně podstoupit rutinní lékařská vyšetření, odmítnutí očkování vede k šíření tuberkulózy. V takových podmínkách potřebujeme rychlé, informativní a účinné výzkumné metody, které by měly být přístupné dětem i dospělým. Všechny výše uvedené diagnostické metody jsou mnohem horší než PCR.

Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocí PCR

Tento výzkum, i když nový, se osvědčil, zejména v kontroverzních případech, kdy není možné provést diagnózu z několika důvodů.

Díky PCR je mnohem snazší detekovat původce tuberkulózy v testovaném materiálu.

Výhody PCR diagnostiky jsou následující.

1. Jedná se o rychlou analýzu. Malý fragment molekuly DNA může být použit k diagnostice během pouhých několika hodin (asi pět), která se úspěšně používá v nouzových situacích, kdy například před operací je nutné určit, zda je člověk nemocný tuberkulózou.
2. PCR analýza je povolena v případě, kdy jsou jiné metody nedostupné nebo zakázané (pro detekci plicní tuberkulózy, někdy musíte vzít několik radiografických snímků, což bude velká dávka záření).
3. Pomocí PCR se vyšetřuje biologické prostředí na přítomnost patogenu. Například můžete provést studii mozkomíšního moku, pokud existuje podezření na tuberkulózní meningitidu.
4. Povolena PCR diagnostika infekčních onemocnění u dětí, protože metoda je bezpečná.
5. Umožňuje identifikovat patogen v jakékoli fázi onemocnění.
6. Vysoká citlivost PCR umožňuje detekci Mycobacterium tuberculosis, i když je v biologickém materiálu pouze několik mikroorganismů.
7. Je dobré provádět diagnózu recidivy onemocnění.

Přečtená PCR se zdá být téměř dokonalou diagnostickou metodou, která by měla mít podezření na tuberkulózu. Existují však i nevýhody, které je třeba vzít v úvahu.

Nevýhody PCR v diagnostice tuberkulózy

V naší době je taková diagnostika vzácnější než pravidelnost. A pro to je důvod.

1. Jedná se o nákladnou výzkumnou metodu. Na mnoha klinikách chybí vybavení pro PCR kvůli jeho vysokým nákladům, ale analýza může být stále prováděna v placených laboratořích.
2. Ihned po ošetření mohou být v lidském těle stále přítomny mrtvé mykobakterie nebo žijící v malých množstvích (výsledek bude pozitivní během diagnostiky PCR), takže metoda bude v této době nespolehlivá, nemá smysl ji provádět.
3. Výsledkem mutací mykobakterií je neúčinná PCR - nelze syntetizovat normální sekvenci řetězce DNA.
4. Je nutné zvolit správné prostředí pro studii, krev je odebírána pouze v případě, že je podezřelá z infekce (sepse), není třeba brát sputum, pokud existuje otázka tuberkulózy orgánů nervového systému. V tomto případě nebude PCR schopna detekovat patogen a diagnóza bude neinformativní.

Indikace pro detekci tuberkulózy pomocí PCR analýzy

PCR diagnostika tuberkulózy se provádí nejčastěji v kontroverzních případech. Kdy lékaři tuto studii doporučují?

1. Pokud je obtížné provést diagnózu obvyklými dostupnými metodami, byl kontakt s pacientem s tuberkulózou.
2. V případě, že osoba nemůže být doručena na kliniku, aby podstoupila rutinní rutinní testy na tuberkulózu, je snazší jej vyšetřit pomocí PCR, protože sputum pro test může být dodáno do nádoby a diagnóza je potvrzena během několika hodin.
3. Pokud má člověk nouzovou operaci a je naléhavé zjistit, zda je nemocný tuberkulózou.
4. Pokud je to nutné, těhotná žena je také lepší vyšetřit na tuberkulózu pomocí PCR, protože metoda je bezpečná.
5. Každý, kdo nebyl diagnostikován tuberkulózou, byl na základě placení potvrzen bakteriologickými metodami a fluoroskopií. To se děje, když je léze v plicích nepostřehnutelná v přímém obraze, a osoba, která během studie dodala sputum, nemohla dodržovat doporučení pro správný sběr materiálu. V tomto případě se člověk obává všech příznaků charakteristických pro plicní tuberkulózu.
6. Když existují pochybnosti o výsledcích testu Mantoux.
7. Je vhodnější provést PCR diagnostiku tuberkulózy u dětí. Tento postup je bezpečný, nevytváří další ozáření a je účinný při detekci obtížně diagnostikovatelných forem onemocnění.

Včasná diagnóza tuberkulózy je klíčem k řádně předepsané léčbě a snížení šíření nemoci. Často známé metody detekce onemocnění nejsou vždy účinné. Proto je dnes PCR jednou z nejspolehlivějších a nejbezpečnějších způsobů detekce infekce v raných fázích jejího vývoje.

Mycobacterium tuberculosis, DNA [real-time PCR]

Studie k identifikaci původce tuberkulózy (Mycobacterium tuberculosis), během níž je genetický materiál (DNA) mykobakterií ve vzorku biomateriálu stanoven metodou real-time polymerázové řetězové reakce (RT-PCR).

Ruská synonyma

Tuberkulóza, Mycobacterium tuberculosis, Kochovy tyčinky.

Anglická synonyma

Tuberkulóza, tuberkulární bacil, Kochův bacil.

Výzkumná metoda

Řetězová reakce v reálném čase.

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Žilní krev, biopsie, děložní endometriální buňky, mozkomíšní mok, urogenitální stěr (s sekrecí prostaty), sputum, pleurální tekutina, první část ranní moči, ejakulát.

Jak se připravit na studium?

Není vyžadováno žádné školení.

Obecné informace o studii

Tuberkulóza (z latiny. Tuberkulum - "tubercle") - infekční onemocnění lidí a zvířat, přenášené převážně ve vzduchových kapičkách. Riziko infekce zvyšuje imunosupresi způsobenou HIV / AIDS, cukrovkou, onemocněním ledvin, transplantací orgánů a použitím imunosupresiv, těhotenství, stárnutí. Nejvíce jsou k tomu náchylní i ti, kteří jsou v kontaktu s pacienty s tuberkulózou, stejně jako děti do 5 let po tuberkulinovém testu. Mezi nejzranitelnější skupiny obyvatelstva patří bezdomovci, vězni, migranti ze zemí s vysokým výskytem tuberkulózy, uživatelé drog a starší osoby.

Pro tuto studii byl použit testovací systém založený na detekci genomové DNA původce tuberkulózy pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (PCR) (real-time PCR). V moderní diagnostice je to jedna z nejrychlejších, nejuniverzálnějších a vysoce citlivých metod.

Standardní metody detekce mycobacterium tuberculosis jsou založeny na kultivaci patogenních mikroorganismů v živném médiu. Problémy spojené s nízkou rychlostí růstu kolonií Mycobacterium tuberculosis - je třeba očekávat až 1,5 měsíce po požití materiálu.

Molekulárně biologické metody založené na detekci genetického materiálu mycobacterium tuberculosis mají vysokou citlivost a specificitu. Jejich nejvýznamnější výhodou je vysoká rychlost získávání výsledků. Pomocí PCR v reálném čase můžete identifikovat původce tuberkulózy v den obdržení klinického vzorku.

Bakterie (mykobakterie vstupující do krevního oběhu pacienta) se mohou objevit v časných stadiích infekce tuberkulózy, stejně jako ve vývoji generalizované nebo extrapulmonální tuberkulózy. Je to nebezpečné, protože imunitní reakce na bakterie způsobí sepse a septický šok, který je plný smrti. Riziko vzniku generalizované tuberkulózy je nejvyšší u pacientů s HIV v pozdějších stadiích, mezi těmi, kteří přerušili léčbu tuberkulózou, a také mezi těmi, kteří včas nehledali lékařskou pomoc na nástup symptomů tuberkulózy.

Diagnóza tuberkulózy u lidí infikovaných HIV je obtížná vzhledem k imunosupresi v těle, která se často projevuje falešně negativními výsledky tuberkulinových reakcí a mikrobiologických testů. V tomto ohledu má velký význam testování na Mycobacterium tuberculosis pomocí PCR v reálném čase.

Na co se používá výzkum?

• Pro diagnózu plicní tuberkulózy (zejména její generalizované a extrapulmonální, spojené s bakteriémií, formy) a sledování její léčby.

Kdy je naplánována studie?

• Při podezření na extrapulmonální tuberkulózu.
• S příznaky bakterémie na pozadí infekce tuberkulózy: zvýšená tělesná teplota, pocení atd. (S malým počtem bakterií v krvi může být bakteriémie asymptomatická).
• Pokud má pacient dlouhodobý kontakt s pacientem s tuberkulózou.
• S abnormální reakcí na tuberkulinový test u dětí.
• Když má pacient HIV infekci.

Co znamenají výsledky?

Referenční hodnoty: negativní.

• Přítomnost patogenu ve studovaném biomateriálu. Obvykle se vyskytuje při aktivní tuberkulóze vyžadující léčbu. Identifikace velkého počtu mykobakterií často ukazuje extrapulmonální formu tuberkulózy nebo generalizaci infekce.

• Kauzální původce tuberkulózy nebyl detekován. Bakterie chybí.

Co může ovlivnit výsledek?

Účinná terapie proti tuberkulóze vede v průběhu času k vymizení mykobakterií v klinickém materiálu.

Důležité poznámky

Pro předepsání správného léčebného režimu, kdy je pacientovi diagnostikována tuberkulóza, je nutné provést test citlivosti mykobakterií na léčiva proti tuberkulóze.

Doporučuje se také

Kdo studuje?

Praktický lékař, terapeut, fytiolog, urolog, gynekolog, specialista na infekční onemocnění.